焦亡相关基因与胃癌预后及免疫浸润的相关性分析

目的通过生物信息学筛选胃癌预后焦亡相关基因(PRGs),构建和评估风险模型并分析PRGs与免疫浸润的相关性,验证胃癌治疗的新靶点。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取胃癌的转录组和临床数据并筛选差异表达的PRGs。采用单因素Cox回归及LASSO回归分析差异表达的PRGs并构建预后模型。Kaplan-Meier生存曲线、受试者操作特征曲线评估模型的准确性及预后价值。根据风险评分中位数将患者分为高、低风险组,Cox回归风险模型评估风险评分与预后的相关性。胃癌基因芯片数据集GSE84437作为预测模型的外部验证。RT-qPCR和Western blot检测SERPINE1、Caspase-1、NLRP3 mRNA和蛋白表达量。结果筛选35个差异表达PRGs,其中5个PRGs(CRTAC1、GPX3、IRGM、RGS2和SERPINE1)被纳入风险模型构建。年龄、M分期、N分期和风险评分是TCGA队列患者生存率的独立影响因素(P<0.05);年龄、T分期和N分期是基因表达综合(GEO)队列患者生存率的独立影响因素(P<0.05)。TCGA、GEO队列中高风险组免疫细胞浸润水平、免疫相关途径活性总体均高于低风险组(P<0.05)。CRTAC1与CD4+T细胞(r=0.488)、巨噬细胞(r=0.588)和树突状细胞(r=0.332)的浸润水平呈正相关(P<0.01);GPX3与CD4+T细胞(r=0.372)、巨噬细胞(r=0.572)和树突状细胞(r=0.406)的浸润水平呈正相关(P<0.01);RGS2与CD4+T细胞(r=0.343)、巨噬细胞(r=0.526)和树突状细胞(r=0.326)的浸润水平呈正相关(P<0.01);IRGM(r=0.327)、SERPINE1(r=0.310)与巨噬细胞的浸润水平呈正相关(P<0.01)。胃癌组织中SERPINE1表达水平高于正常胃组织(P<0.05);高表达SERPINE1组的生存时间短于低表达SERPINE1组(P<0.01)。干扰组SERPINE1、Caspase-1、NLRP3 mRNA和蛋白表达量均低于阴性对照组(P<0.05)。结论通过生物信息学方法筛选5个PRGs构建胃癌预后模型,SERPINE1高表达与胃癌不良预后相关,可能参与调控NLRP3/Caspase-1细胞焦亡途径。

马斯平对医院常见致病菌活性实验研究及前景展望

目的 验证马期平 (头孢吡肟 )的抗菌谱 ,研究其在临床应用中的前景及意义。方法 用浓度梯度法E test法测定头孢吡肟对临床分离菌 4 0株的最低抑菌浓度 ,并与其他抗生素体外抗菌活性进行比较。结果 头孢吡肟对肠杆菌科抗菌活性强于第 3代头孢菌素 ,对铜绿假单胞菌的抗菌活性也较强 ,与亚胺掊南相当。对苯唑青霉素敏感的金黄色葡萄球菌较敏感 ,(MIC90 为 3mg/L)。 结论 头孢吡肟对革兰阴性杆菌的抗菌活性比第 3代头孢菌素强 ,且低诱导、低选择、高稳定 。

脓毒症大鼠急性肺损伤血清抵抗素及IL-6的变化及其意义

目的研究脓毒症大鼠急性肺损伤(ALI)血清抵抗素及白介素-6(IL-6)的水平,以探讨抵抗素及IL-6与ALI的关系及可能机制。方法 Wistar雄性大鼠45只随机分为正常对照组、假手术组和模型组各15只。静脉注射脂多糖(10mg/kg)复制ALI的动物模型,分别观察6、12、24h后活杀。测定肺湿/干重比,用化学发光法检测血清IL-6及ELISA法检测抵抗素水平。结果与对照组及假手术组相比,模型组肺湿/干重比,肺病理组织评分、血清IL-6水平、抵抗素水平均明显增高(P<0.05)。肺组织损伤程度与血清IL-6和抵抗素水平呈正相关(r值分别为0.739、0.874,P<0.05)。结论抵抗素可能参与了脓毒症所致的肺损伤过程。

淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究

了解淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型及其产物120和121位氨基酸突变与耐药的相关性。采用多重PCR(mPCR)检测淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型,扩增产物测序后分析其编码蛋白的120和121位氨基酸突变情况,二倍平皿稀释法检测临床菌株对青霉素和四环素的耐药性。184株淋病奈瑟菌临床菌株中,99.5%(183/184)检出porB基因,其中61株(33.3%)为porB1A基因型,122株(66.7%)为porB1B基因型。122株porB1B基因型菌株中,117株(95.9%)porB基因120和/或121位氨基酸发生突变,5株(4.1%)porB1B及所有porB1A基因型菌株porB基因120和/或121位氨基酸未突变。117株porB基因120和/或121位氨基酸突变的porB1B基因型菌株中,97.4%(114/117)和95.7%(112/117)分别对青霉素和四环素耐药,2.6%菌株(3/117)对青霉素和四环素敏感。61株porB1A基因型菌株中,仅有2株(3.3%)对青霉素和四环素耐药。研究中采用的mPCR能快速、准确地对淋病奈瑟菌临床菌株porB基因进行分型,这些菌株主要携带porB1B基因且该基因型菌株对青霉素和四环素耐药率显著高于porB1A基因型(P<0.01),该耐药性与porB1B基因120和/或121位氨基酸突变密切相关。

血清标本的保存温度和时间对乙型肝炎两对半定量测定的影响

目的探讨血清标本保存时间和温度件对乙型肝炎(下称乙肝)两对半定量检测结果的影响,寻求保存血清标本的理想方法。方法分别采用2～8℃和-20℃两种温度保存标本,应用雅培i2000SR化学发光仪定量测定两对半指标,2～8℃的保存标本每隔3d检测1次,-20℃的保存标本按照1、3、5、6个月周期检测。结果2～8℃保存标本7d,结果差异无统计学意义(P>0.05),超过7d,乙肝病毒e抗原和核心抗体结果发生变化,差异有统计学意义(P<0.05);-20℃连续保存6个月,测定结果无统计学意义(P>0.05)。结论标本的保存温度和时间直接影响乙肝两对半定量结果的准确性,在各种保存条件下,随着温度的下降,标本保存时间延长。2～8℃标本可稳定7d;-20℃可以保存6个月。

鲍曼不动杆菌生物膜形成与耐药关系研究

目的通过对产生物膜鲍曼不动杆菌的耐药性分析,为临床感染治疗提供参考依据。方法收集经DL-96微生物分析系统鉴定的鲍曼不动杆菌88株,利用聚苯乙烯板条构建生物膜的技术筛选生物膜形成菌株,药敏试验采用微量稀释法。结果 88株鲍曼不动杆菌中67株(76.1%)可以形成生物膜。标本种类以痰液和伤口分泌物居多,主要分布于呼吸科、ICU,神经内科。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮耐药率最高,产膜株96.4%,非产膜株84.6%;鲍曼不动杆菌无论产膜与否,对美满霉素、多粘菌素B、粘菌素敏感性高,敏感率大于95%;对于左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢噻肟的耐药率,产膜株与非产膜株均低于30%;对于阿米卡星、奈替米星、庆大霉素、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、替卡西林/棒酸、头孢他啶、头孢吡肟、美罗培南,产菌株的耐药率高于非产膜株,并且耐药率差异具有统计学意义,P<0.05。结论多数鲍曼不动杆菌具有生物膜形成能力,生物膜明显提高了细菌的耐药性,治疗时应配合选择能有效清除生物膜的抗菌药物。