挥发性麻醉药后处理保护缺血/再灌注心肌的研究进展

缺血后处理(ischemic postconditioning)是近年来提出的一种新的心肌保护方法,即心肌缺血后在长时间的再灌注之前,进行的数次短暂再灌注/缺血的循环。实验证明后处理对缺血心肌确有显著的保护作用。挥发性麻醉药后处理也可以发挥同样的保护效应,其机制比较复杂,远未阐明,现就其保护作用的机制作一综述。

硫氢化钠后处理对缺氧／复氧心肌细胞线粒体渗透性转换的影响

目的观察硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)供体——硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)后处理对培养的新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中线粒体渗透性转换(mitochon-drial permeable transition,MPT)影响。方法将原代培养大鼠乳鼠心肌细胞随机分为缺氧/复氧组(H/R)和硫氢化钠后处理组(H/R+NaHS)。H/R组为缺氧2h后复氧2h。H/R+NaHS组为缺氧2h后,给予1×10-6mol·L-1NaHS后处理0.5h,再复氧1.5h。两组分别于缺氧前、缺氧2h、复氧0.5h、1和2h,应用噻唑蓝法检测细胞活性,荧光指示剂孵育激光共聚焦显微镜下检测线粒体渗透性转换孔(MPTP)的开放程度和线粒体膜电位(Δψm)的变化。结果缺氧2h内细胞活力明显下降,MPTP开放,Δψm下降。在复氧初期两组细胞损伤会进一步加剧,但H/R+NaHS组在NaHS后处理后,细胞活性(45%±3.7%)下降幅度明显小于H/R组(36.5%±1.8%,P<0.05);MPTP荧光强度(52%±5.7%)和Δψm荧光强度(47.2%±5.1%)也明显高于H/R组(40%±5.4%,33.4%±5.0%,P<0.05)。到复氧2h时,两组细胞损伤均不再加重,但H/R+NaHS组各项指标仍然明显好于H/R组(P<0.05)。结论硫氢化钠后处理可以有效调控缺氧/复氧心肌细胞线粒体渗透性转换,阻止MPTP开放,抑制Δψm下降,从而减轻缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤。

硫氢化钠后处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨硫化氢供体——硫氢化钠(NaHS)后处理对原代培养的新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法体外培养原代新生大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,并随机分为4组:对照组(Normal组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧后处理组(HPC组)和硫氢化钠后处理组(H/R+NaHS组)。4组均为缺氧2 h后复氧2 h,并取5个时间点(缺氧前、缺氧2 h和复氧后0.5 h、1 h、2 h)检测下列指标:①心肌细胞存活率;②乳酸脱氢酶(LDH)活性;③丙二醛(MDA)含量;④超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果缺氧2 h时,H/R组、HPC组和H/R+NaHS组各个指标检测值均无显著差异(P(0.05)。经缺氧后处理和NaHS后处理后,HPC组和H/R+NaHS组的细胞存活率分别为(70.5±2.2)%、(66.2±2.5)%,比H/R组显著升高〔(61.3±1.8)%,P(0.05)〕;同时HPC组和H/R+NaHS组LDH活性分别为(36.2±1.3)U.L-1、(39.5±1.5)U.L-1,显著低于H/R组〔(44.6±1.7)U.L-1,P(0.05〕;HPC组和H/R+NaHS组MDA含量分别为(0.905±0.033)mmol.g-1、(0.986±0.042)mmol.g-1,也明显低于H/R组〔(1.120±0.045)mmol.g-1,P(0.05〕;而HPC组和H/R+NaHS组SOD活性分别为(16.9±1.0)U.L-1、(15.9±1.2)U.L-1,却明显高于H/R组〔(13.3±1.5)U.L-1,P(0.05〕。在2 h复氧期内,HPC组和H/R+NaHS组细胞存活率和SOD活性始终明显高于H/R组,而LDH活性和MDA含量始终明显低于H/R组(P(0.05)。结论NaHS后处理可以提高心肌细胞清除氧自由基的能力,从而有效减轻缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤。

外周苯二氮受体激动剂Ro5-4864抑制大鼠心肌细胞线粒体通透性转换

线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)导致线粒体氧化应激性损伤。近年研究认为,位于线粒体外膜的外周苯二氮(?)受体(peripheral benzodiazepine receptor,PBR)参与了线粒体的重要生理功能。本研究在心肌细胞线粒体水平探讨激动PBR能否抑制Ca2+诱发的MPT。分离Sprague-Dawley大鼠心肌细胞线粒体,将PBR激动剂Ro5-4864 (50、100、200μmol／L)和线粒体孵育,利用150μmol／L Ca2+诱发MPT,部分线粒体在与100μmol／L Ro5-4864孵育前5 min加入MPT孔道开放剂苍术苷(atractyloside,ATR)。采用分光光度法观察线粒体膨胀情况;Western blot检测线粒体细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)释放;利用荧光探针JC-1在激光共聚集显微镜下观察线粒体膜电位的变化。50、100、200μmol／L Ro5-4864均显著抑制Ca2+诱发的520 nm处线粒体吸光度的下降,而且抑制Ca2+引起的线粒体Cyto C释放和线粒体膜电位下降,但ATR可阻断Ro5-4864的上述作用。结果提示,PBR激动剂可抑制大鼠心肌MPT,保持线粒体Cyto C含量和稳定线粒体膜电位,减轻线粒体损伤。PBR的激活可能成为减轻心肌细胞应激性损伤及心肌保护的新方法。

外周苯二氮受体参与调控大鼠心肌线粒体通透性转换

目的探讨外周苯二氮受体(peripheral benzodiaz-epine receptor,PBR)在调控心肌线粒体通透性转换(mito-chondrial permeability transition,MPT)中的作用。方法分离SD大鼠心肌线粒体,电镜观察其形态证实线粒体结构完整性。将线粒体分别和不同浓度(50,100,200μmol·L-1)的PBR拮抗剂PK11195孵育,部分线粒体和100mmol·L-1PK11195孵育之前5min加入5μmol·L-1MPT抑制剂环孢菌素A(CsA组)。不给任何处理的线粒体为阴性对照(Con组),单纯给150μmol·L-1Ca2+作阳性对照(Ca2+组)。分光光度法测520nm处吸光度的改变反映MPT变化,电镜观察线粒体超微结构改变,Western blot检测线粒体细胞色素C(CytoC)释放。结果PK11195剂量依赖性诱发MPT,不同浓度组间比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);PK11195导致线粒体出现空泡变性、线粒体肿胀、线粒体脊膜破裂,CytoC释放明显增多(vsCon组,P<0.01);CsA能阻断PK11195的上述作用,CsA组线粒体超微结构基本完好,线粒体CytoC释放较少(vs100μmol·L-1组,P<0.05)。结论PBR参与调控大鼠心肌MPT,其拮抗剂PK11195可剂量依赖性诱导心肌MPT,导致线粒体超微结构损伤和线粒体CytoC释放。

吸入麻醉药心肌预处理的信号转导机制

吸入麻醉药预处理有IPC样的心肌保护作用,其作用机制目前尚未完全阐明。吸入麻醉药预处理的信号转导机制可能与IPC的信号转导途径相似,吸入麻醉药可能刺激心肌产生触发因子,然后启动级联反应,激活效应因子,发挥预处理效应。目前为止,研究已证实ROS、G蛋白耦联受体、蛋白激酶、线粒体和肌膜K_(ATP)通道(Mito K_(ATP) and Sarc K_(ATP))介导APC。现就吸入麻醉药心肌预处理信号转导机制方面的最新进展作一综述。

脊髓水平γ-氨基丁酸转运体参与痛觉信息传递的研究进展

γ-氨基丁酸(GABA)是哺乳动物中枢神经系统的重要抑制性神经递质,能快速被γ-氨基丁酸转运体(GAT)摄取,从而终止其抑制作用。GABA作用的程度和持续时间受到GAT的调节。GAT作为GABA能系统重要的组成部分,参与痛觉信息在脊髓水平的传递和慢性疼痛的发生与发展过程。

不同胶体溶液急性高容血液稀释对结肠癌根治术患者围术期GPⅡb／Ⅲa、P-选择素表达的影响

目的观察羟乙基淀粉(HES)溶液和琥珀酰明胶(GEL)溶液急性高容血液稀释(AHHD)对结肠癌患者围术期血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa(GPⅡb／Ⅲa)、P-选择素表达的影响。方法择期在全身麻醉下行结肠癌根治术患者60例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为3组(n=20):术前以15 ml·kg-1剂量分别在30min内经颈内静脉输注HES溶液(组Ⅰ)、GEL溶液(组Ⅱ)或乳酸钠林格氏(RL)溶液(组Ⅲ)。抽取静脉血标本,采用流式细胞仪测定AHHD前即刻(T0)、手术开始后30 min(T1)、手术开始后2 h(T2)和术毕1 h(T3)GPⅡb／Ⅲa与P-选择素的表达。结果与T0比较,组ⅠT1、T2和T3时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达均降低;组Ⅱ,T1、T2时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达降低,T3时GPⅡb／Ⅲa表达降低;组ⅢT1、T3时P-选择素表达增强(P<0．05)。与组Ⅱ比较,组ⅠT3时GPⅡb／Ⅲa表达降低;与组Ⅲ比较,组Ⅰ与组ⅡT1、T2和T3时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达降低(P<0．05)。结论术前采用HES溶液或GEL溶液AHHD能抑制结肠癌根治术患者围术期血小板的过度活化,对防止肿瘤细胞转移和术后深静脉血栓形成可能有一定作用。

脊髓背角ERK激活在大鼠神经病理性疼痛中的作用

目的 探讨脊髓背角细胞外信号调节激酶（ERK）的激活在大鼠神经病理性疼痛诱发和维持中的作用。方法 雄性SD大鼠，体重200～300g。本研究分多剂量给药和单剂量给药两部分，均进行行为学实验和脊髓背角磷酸化ERK（p-ERK）表达检测。实验一 48只鞘内置管大鼠随机分6组（n=8）：假手术＋生理盐水（NS）组（S组）、慢性压迫性损伤（CCI）＋NS组（C组）、CCI＋5％二甲亚砜（DMSO）组（D组）、CCI＋错义寡核苷酸10μg组（M组）、CCI＋U01265μg组（u组）、CCI＋反义寡核苷酸组10μg组（A组）。鞘内给药后记录大鼠机械缩足阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）。实验二 48只鞘内置管大鼠随机分3组（n=16），白CCI术前1d至术后3d分别注射NS（G1组）、U01265μg（G2组）或ERK反义寡核苷酸10弘g（G3组），假手术大鼠4只为阴性对照组，检测脊髓p-ERK的表达。实验三CCI术后5d大鼠40只随机分5组（n=8）：CCI＋5％DMSO组（D’组）、CCI＋U01260．2腭组（U0．2组）、CCI＋．U01260．5μg 组（U0．5组）、CCI＋U01261μg组（U1组）、CCI＋U01265μg组（U5组），假手术大鼠8只注射5％DMSO（S组）为阴性对照组，记录MWT和TWL；实验四另选CCI术后5d大鼠20只为实验组，鞘内注射U01265μg，假手术5d大鼠（阴性对照组）与CCI术后5d大鼠（阳性对照组）各4只，鞘内注射5％DMSO0．5h后取材，检测脊髓p-ERK的表达。结果 实验一与C组比较，U组与A组MWT和TWL升高，作用持续至术后13d；实验二与G1组比较，G2组与G3组术后3、5d胞浆p-ERK2表达以及术后3、5、10d胞核p-ERK1与p-ERK2表达降低；实验三与D组比较，U0．5组给药后MWT和TWL升高，其作用分别持续至鞘内给药后6h和2h；与U0．2组比较，MWT：U0．5组鞘内给药后0．5、2、6h、U1组给药后0．5、2、6、12h、U5组鞘内给药后0．5、2、6、12、24h升高，TWL：U1组鞘内给药后12h、U5组鞘内给药后0．5、6、12、24h升高；与U0．5组比较，U5组MWT鞘内给药后0．5、12、24h和TWL鞘内给药后0．5、12h升高；实验四与阴性对照组比较，实验组鞘内注射U01265μg后0．5h胞浆与胞核p-ERK1和p-ERK2表达下降，与实验组0．5h比较，实验组胞浆p-ERK1于6、12、24h升高，胞核p-ERK1于2,6、12、24h升高，胞浆与胞核p-ERK2于6、12、24h均升高（P〈0．05）。结论 脊髓背角ERK激活参与了大鼠神经病理性疼痛的诱发和维持过程。

米库氯铵的过去、现在与未来

米库氯铵是作用最短效的苄异喹啉类非去极化神经肌肉松驰药，可被血浆胆碱酯酶水解，代谢迅速。该药在体内无蓄积，适于连续输注给药；作用短效，特别适用于日间手术麻醉；没有潜在的神经毒性，可以广泛用于神经外科实践。现就其理化性质、药代动力学及药效动力学等特性进行综述。

鞘内注射硫酸镁或/和吗啡对大鼠切口疼痛的影响

目的观察在大鼠切口疼痛模型中鞘内注射(IT)硫酸镁(MgSO_4)或/和吗啡对大鼠切口疼痛的影响。方法雄性SD大鼠96只,随机均分为12组,每组8只,分别为假手术组、对照组、术前MgSO_4375μg治疗组和术后MgSO_4 375μg治疗组、术前MgSO_4 188μg治疗组和术后MgSO_4 188μg治疗组、术前吗啡5μg治疗组和术后吗啡5μg治疗组、术前吗啡2.5μg治疗组和术后吗啡2.5μg治疗组、术前MgSO_4188μg加吗啡2.5μg治疗组和术后MgSO_4 188μg加吗啡2.5μg治疗组。按Yaksh法施行鞘内置管。按Brennan法建立大鼠足底切口痛模型。分别于术前、术后2 h、3 h、6 h、12 h、1d、2 d、3 d、5 d以von Frey细丝法(机械性痛觉过敏)、热辐射法(热痛觉过敏)和累积疼痛评分法观察大鼠疼痛行为学变化。结果与假手术组和术前值比较,对照组、术前或术后MgSO_4 375μg治疗组、术前或术后MgSO_4 188μg治疗组、术前或术后吗啡2.5μg治疗组大鼠在术后2 h、3 h、6 h、12 h、1 d、2 d的累积疼痛评分均明显升高(P<0.05或P<0.01),von Frey纤毛刺激机械缩足反射阈值(MWT)均明显降低(P<0.01),热刺激缩足潜伏期(TWL)均明显缩短(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,术前或术后吗啡5μg治疗组、术前或术后MgSO_4188μg加吗啡2.5μg治疗组大鼠的累积疼痛评分均明显降低(P<0.01),MWT均明显升高(P<0.01),TWL均明显延长(P<0.05或P<0.01)。结论在大鼠切口疼痛模型中,单次IT吗啡5μg或MgSO_4188μg加吗啡2.5μg能提供术后早期抗伤害作用。

加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节Toll样受体4表达的影响

目的探讨加巴喷丁（gabapentin，GBP）对糖尿病神经病理性疼痛（diabeticneuropathicpain，DNP）大鼠背根神经节（dorsalrootganglia，DRG）T0Ⅱ样受体4（toll-likereceptor4，TLR4）表达的影响。方法108只成年健康雄性sD大鼠，采用完全随机分组法分为4组：对照组（C组）、模型组（DNP组）、生理盐水（sc）＋DNP组和GBP＋DNP组（每组27只）。观察链脲佐菌素（streptozocin，STZ）注射前1d及注射后3、7、10、14、21、28d测定缩足反射机械刺激阚值（pawwithdrawalmechanicalthreshold，PWMT）和缩足反射热辐射潜伏期（pawwithdrawalthermallatency，PWTL），SC＋DNP组和GBP＋DNP组于STZ注射15d起分别腹腔注射生理盐水或GBP50mg／kg，1次／d，连续7d，并于21、28d测定PWMT和PWTL。行为学测试完成后选择21d大鼠用免疫组化和Westernblot方法检测大鼠DRG中TLR4的表达。结果与C组比较，DNP组PWMT（3．9±0．9）g降低，PWTL[（6．1±0．8）S]缩短，DRG中TLR4蛋白的表达显著上调（P〈0．05）；与DNP组比较，SC＋DNP组大鼠在腹腔注射生理盐水后，PWMT、PWTL和TLR4蛋白的表达无明显改变（P〉0．05）；与DNP组和SC＋DNP组比较，GBP＋DNP组PWMT（8．3±0．8）g升高，PwTL[（9．9±1．2）s]延长，DRG中TLR4蛋白的表达下调（P〈0．05）。结论GBP可通过抑制DRG中TLR4表达，从而减轻大鼠DNP。

老年患者呼吸机相关性肺损伤及全麻术中保护性肺通气策略的应用

机械通气可造成呼吸机引起的肺损伤（ventilator-induced lung injury，VILI），由于老年患者常合并呼吸功能减退，所以全麻期间更易引起VILI，现就全身麻醉下老年患者机械通气引起的肺损伤的发生机制以及相关保护性肺通气策略及应用的研究进展作一综述。

脑源性神经营养因子／酪氨酸激酶B受体信号参与不同水平伤害性感受的调制

脑源性神经营养因子（brain－derived neurotrophic factor，BDNF）是神经营养因子家族的重要成员之一，BDNF支持了发育期间一些神经系统神经元的生长与生存。BDNF是成年突触可塑性的一种重要调质。外周炎症、神经离断、神经损伤及神经病理性疼痛模型在内的多种疼痛均能改变神经系统内BDNF的表达。BDNF通过与其高亲和力受体酪氨酸激酶B（receptior tyrosine kinase，TrkB）受体结合，从而激活下游信号通路发挥效应，在不同水平伤害性信息的调制中发挥了重要作用。

气体信号分子硫化氢与心肌保护

硫化氢可以在哺乳动物循环系统内源性产生。硫化氢能减轻心肌缺血／再灌注损伤，这一保护作用的机制包括：清除自由基、抑制炎症反应、保护线粒体功能、有关信号通路激活、ATP敏感性钾通道开放。

白介素和神经病理性疼痛

近来实验发现免疫细胞活化对于人类和实验动物神经病理性疼痛的病因和症状有密切联系，而免疫细胞活化的一类产物——白介素在疼痛形成和维持过程中发挥重要作用。此文讨论白介素-1（白介素-1α、白介素-1β、白介素-1ra）、白介素-6和白介素-10在神经病理性疼痛的产生和维持过程的作用，探讨白介素在神经病理性疼痛治疗的前景。

左西孟旦在心脏外科手术的应用

心脏外科手术中体外循环后心功能障碍的病人常需要正性肌力药物的支持。传统的正性肌力药由于存在增加心肌氧耗和致心律失常的危险，临床应用受到一定限制。左西孟旦，一种新型强心剂-钙增敏剂，其强心作用机制是增加心肌收缩蛋白对钙离子的敏感性，并通过激活KATP发挥扩血管和抗缺血效应。现有的临床资料表明左西孟旦在治疗术中高危或合并左心功能不全的心脏手术病人以及帮助病人顺利脱离体外循环方面具有很好的应用前景。