重组人生长激素对中性粒细胞凋亡和存活的影响

目的:研究重组人生长激素(rhG)对有(或)无H LPS刺激的离体培养中性粒细胞(PM N s)凋亡和存活的影响。方法:采健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PM N s,分为4组:对照组,rhG H(100ng/m L)组,LPS100ng/m L组,LPS100ng/m L刺激1h后加rhG H100ng/m L组,离体培养3h和24h上流式细胞仪检测PM N s的凋亡(A nnexin V法)。结果:无LPS刺激状态下,rhG H可引起PM N s早期凋亡率减少、存活率增加,但不影响晚期凋亡/死亡率;有LPS刺激状态下,rhG H不影响PM N s早期凋亡率、晚期凋亡/死亡率和存活率,而且可能对LPS对PM N s刺激有一定阻抑作用。结论:无LPS刺激状态下,rhG H可延迟PM N s凋亡、增强PM N s活力;与LPS共同孵育时,rhG H不影响PM N s凋亡和活力,且对LPS对PM N s的刺激有一定阻抑的作用。

咪达唑仑多次使用对小鼠学习记忆的影响

目的观察不同剂量的咪达唑仑多次使用对小鼠学习记忆的影响。方法100只KM小鼠分层随机区组设计,分为M1、M2、M3、M4组和生理盐水(NS)组,每组20只,各组再随机选取10只,参加跳台实验或避暗实验。M1、M2、M3和M4组分别以咪达唑仑0.5、1、2和4 mg/kg,NS组以10 m l/kg生理盐水腹腔注射,3次/d,连续10 d后,进行训练,24 h后进行记忆测验,以潜伏期和错误次数作为记忆成绩的指标。结果M1、M2、M3、M4组与NS组比较,M2、M3和M4组与M1组比较,M3和M4组与M2组比较,潜伏期缩短、错误次数次数增多(P<0.05);但M3组与M4组比较,潜伏期和错误次数相似(P>0.05)。结论多次使用咪达唑仑对记忆的影响有一定剂量依赖性,但其记忆抑制作用有封顶效应。

咪达唑仑与盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆获得和巩固及再现的影响

目的探讨咪达唑仑(Mid)、盐酸戊乙奎醚(Pen)对小鼠学习记忆的获得、巩固和再现的影响。方法120只昆明种小鼠分成4组,每组30只。分别为M组:给予Mid 1 mg.kg-1;P组:给予Pen 0.2 mg.kg-1;M+P组:给予Mid 1 mg.kg-1+Pen 0.2 mg.kg-1;NS组:给予等量0.9%氯化钠溶液。上述各组再随机分成3个亚组,均为10只,分别参加记忆的获得、巩固和再现实验。另取30只小鼠作阳性对照,每组10只。分别为S组:给予阳性对照药物东莨菪碱2mg.kg-1;SN组:给予亚硝酸钠125 mg.kg-1;A组:给予30%乙醇。所有药物注射容积均为0.1 mL.(10 g)-1。用避暗实验的错误次数和潜伏期作为评估小鼠学习记忆的指标。训练前给药测定药物对小鼠记忆获得的影响:训练前30 min,各组分别腹腔注射Mid、Pen、Mid+Pen或0.9%氯化钠溶液;训练前15 min,S组腹腔注射阳性对照药东莨菪碱。训练后立即给药测定药物对小鼠记忆巩固的影响:各组训练后立即腹腔注射Mid、Pen、Mid+Pen或0.9%氯化钠溶液;SN组训练后立即皮下注射阳性对照药亚硝酸钠。测验前给药测定药物对记忆再现的影响:测验前30 min分别腹腔注射Mid、阳性对照药30%乙醇灌胃;测验前15 min分别腹腔注射Pen或0.9%氯化钠溶液。结果单用Mid或合用Pen对记忆的获得和巩固均有抑制作用,而对记忆的再现无抑制作用;Mid合用Pen与单用Mid比较,虽不加重记忆获得的抑制,却明显抑制记忆的巩固;单用Pen不抑制记忆的获得、巩固和再现。结论Mid和Pen对记忆的抑制作用有利于防止术中知晓。

咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆的影响

目的观察咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚单用、合用对小鼠学习记忆的影响。方法80只昆明(KM)小鼠分层随机区组设计,分为咪达唑仑(1mg.kg-1,midazolan,Mid)组、盐酸戊乙奎醚(0.2mg.kg-1,penehyclidine hydrochloride,Pen)组、咪达唑仑+盐酸戊乙奎醚(1mg.kg-1Mid+0.2mg.kg-1Pen,Mid+Pen)组及生理盐水(10ml.kg-1,NS)组,每组20只;每组再随机分为测试记忆获得组和巩固组,每组10只。采用避暗实验,以训练前/后给药分别评估药物对小鼠记忆获得或巩固的影响。比较各组避暗实验训练后d1、2、3、4、5、6和7测验所得的潜伏期和错误次数。结果①Mid单用或与Pen合用对记忆的获得和巩固均有抑制作用;②Mid合用Pen与Mid单用相比,不加重对记忆获得的抑制,而明显加重对记忆巩固的抑制,且合用比单用抑制记忆时间长。结论Mid和Pen联合使用,对小鼠学习记忆产生明显影响。

多次使用咪达唑仑对小鼠学习记忆、海马CA_1区长时程增强诱发和钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱ的影响

目的观察多次使用咪达唑仑(Mid)后对小鼠学习记忆的影响,并探讨其机制。方法60只KM小鼠按分层随机区组设计分成M1、M2、M3、M4和NS组,每组12只。分别腹腔注射0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、4mg/kgMid或生理盐水。每天3次,连续10天。第10天给药后30min,进行避暗实验训练,24h后测验。避暗实验测验后各组随机取6只小鼠,取海马分别检测LTP和CaMKⅡ含量(western-blot法)。比较各组小鼠测验时的潜伏期和错误次数、HFS前、60min后PS变化幅度和CaMKII含量。结果各剂量Mid组分别与NS组相比,潜伏期缩短、错误次数增多;在HFS后60min时,M1、M2、M3、M4组和NS组PS幅度分别为刺激前的208.60±8.82%、173.81±10.73%、138.41±8.50%、126.27±10.52%和260.60±48.62%,各剂量Mid组PS变化幅度分别与NS组相比,幅度明显降低(P<0.05);M2、M3和M4组与M1组相比、M3和M4组与M2组相比,潜伏期缩短、错误次数增多;PS变化幅度降低和CaMKⅡ含量减少(P<0.05),似呈剂量依赖性;但M3组与M4组相比,潜伏期和错误次数、PS变化幅度、CaMKⅡ含量均相似(P>0.05)。结论行为学、电生理和生化检测结果相一致,多次使用Mid后可以抑制小鼠的学习记忆,并呈一定的剂量依赖性,但该作用有封顶效应。Mid可能通过抑制CaMKⅡ对学习记忆产生影响。

咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆长时间的影响

目的观察咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚单用或合用对小鼠学习记忆长时间的影响。方法80只KM小鼠分层随机区组设计,分为咪达唑仑(1mg/kg,midazolan,Mid)组、盐酸戊乙奎醚(0.2mg/kg,penehyclidine,Pen)组、咪达唑仑+盐酸戊乙奎醚(1mg/kgMid+0.2mg/kgPen,Mid+Pen)组及生理盐水(10ml/kg,NS)组,每组20只;每组再随机分为测试记忆获得组和巩固组,每组10只。行为学检测采用避暗实验,以训练前/后给药分别评估药物对小鼠记忆获得或巩固的影响。比较各组避暗实验训练后d1、d2、d3、d4、d5、d6和d7测验所得的潜伏期和错误次数。结果①Mid单用或与Pen合用对记忆的获得和巩固均有抑制作用并维持较长一段时间;②Mid合用Pen与Mid单用相比,不加重记忆获得的抑制,而明显加重记忆的巩固,且合用比单用对记忆抑制时间长。结论Mid和Pen在麻醉前使用,对防止术中知晓有利,但可能是POCD的一个因素。

鞘内注射U0126对吗啡戒断大鼠脊髓神经元Fos表达的影响

目的:研究鞘内注射U0126对吗啡依赖大鼠戒断反应中Fos表达的影响。方法:采用大鼠吗啡依赖及戒断模型,分为正常对照组、吗啡依赖组、吗啡戒断组、U0126组、DMSO组,运用免疫组织化学法(n=6)和Westernblot(n=4)方法观察鞘内注射U0126对吗啡戒断大鼠脊髓神经元Fos表达的影响。结果:鞘内注射U0126可明显减少L5节段脊髓背角Fos阳性神经元的数目,U0126组为287±54,低于戒断组380±71,两者差异有显著性(P<0.05)。Western blot显示U0126组Fos蛋白的表达与戒断组相比也明显减少。结论:鞘内注射U0126能明显抑制吗啡戒断大鼠脊髓神经元Fos表达。

老年小鼠突触可塑性和记忆功能变化与nNOS表达的关系

目的对老年小鼠突触可塑性和记忆能力变化与海马nNOS表达变化之间的关系进行探讨。方法2月龄(青年)和16月龄(老年)昆明小鼠分别用Y型迷宫测试自发交替和活动能力,离体脑片细胞外观测海马长时程增强(LTP)的变化,免疫组化检测海马nNOS阳性细胞表达的变化。结果老年小鼠的自发交替的百分率和活动能力较青年小鼠明显下降(P<0.01),离体海马脑片LTP诱发成功率和群峰电位振幅增大率明显下降(P<0.01),海马CA1区、齿状回的nNOS阳性细胞的染色强度减弱(P<0.01)。结论小鼠在衰老过程中会伴有突触可塑性和记忆功能降低,其病理机制和nNOS神经元丧失有关。

鞘内注射U0126对吗啡戒断大鼠脊髓神经元磷酸化CREB表达的影响

目的:研究鞘内注射细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂U0126对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断反应、脊髓磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响。方法:建立大鼠吗啡依赖和戒断模型,分为正常对照组、吗啡依赖组、吗啡戒断组、U0126组、溶媒(DMSO)组,采用行为学(n=8)、免疫组织化学(n=6)和Western blot(n=4)方法观察鞘内应用U0126对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断反应、脊髓p-CREB表达的影响。结果:①鞘内注射U0126可明显减轻吗啡依赖大鼠戒断症状,戒断组戒断症状评分为28.6±4.89,U0126组为22.5±4.09(P<0.05);戒断组促诱发痛评分(TEA score)为13.5±2.55,U0126组为10.0±2.76(P<0.05)。②鞘内注射U0126可明显减少胸腰段脊髓背角p-CREB阳性神经元的数目,U0126组为287±54,低于戒断组(380±71,P<0.05)。③western blot结果显示:鞘内注射U0126明显抑制吗啡戒断期间脊髓p-CREB表达的增加。结论:鞘内注射U0126能明显抑制吗啡戒断大鼠脊髓神经元p-CREB的表达。

乌司他丁对肠源性脓毒症大鼠凝血四项和血小板的影响

目的观察乌司他丁（Ulinastatin，UTI）对严重脓毒症大鼠凝血四项和血小板的影响。方法将Wistar大鼠随机分为4组：假手术组（SC组，n=36）、脓毒症组（SEP组，n=30）、乌司他丁3h给药组（UTI3h组，n=30）和12h给药组（UTI12h组，n=18）。利用经典盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型，分别在制模后0、6h、12h、24h、48h及72h心脏取血测定血小板（PLT）和凝血四项[凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时问（APTT）、纤维蛋白原（FIB）]的情况。结果与SC组相比，SEP组大鼠的PT、TT、APTT在造模后逐渐升高，PLT降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。与SEP组相比，乌司他丁治疗组大鼠的PT、TT、APTT升高程度及PLT降低的程度都有减轻，差异有统计学意义（P〈0．05），且乌司他丁3h给药组效果好于12h给药组。结论乌司他丁能有效改善严重脓毒症大鼠的凝血紊乱情况，在一定程度上阻断了凝血一炎症间的相互促发的恶性循环，减轻由于凝血系统异常导致的组织器官的损害，保护了器官功能。

两种液体复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障的影响

目的探讨不同液体复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障功能的保护作用。方法50只雄性SD大鼠，随机分为假手术组（Sham组）、复方氯化钠溶液组（RS组）、6％中分子羟乙基淀粉组（HES组），RS组和FIES组制备失血性休克模型，分别在复苏后1h和24h，检测各组动物细菌移位、肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及髓过氧化酶（MPO）活性的变化，并行Chiu氏评分。结果Sham组未检测出细菌和TNF-α表达。与RS1h组比较，H-IES1h组移位的细菌数量、TNF-α表达和MPO活性明显较多；与RS24h组比较，HES24h组移位的细菌数量和TNF-α表达明显降低，MPO活性恢复至Sham组水平。结论与RS比较，HES较好的保护肠黏膜屏障功能。

线粒体通透性转运孔道模型的研究进展

由于很多实验结果不能通过传统的mPTP模型得到圆满的解释，最近人们逐渐接受一些新的假说：线粒体内膜存在两种胛孔道——可调控的胛孔道（regulated PT pores）和不可调控的胛孔道（unregulated PT pores），兼性蛋白簇集、CYPD及其他未明确的分子伴侣复合体构成可调控的胛孔道，当兼性蛋白簇集大量生成，分子伴侣不足以抑制其开放时，线粒体胛孔道由可调控状态变为不可调控状态。