四价流感病毒裂解疫苗的稳定性

目的评价四价流感病毒裂解疫苗的稳定性,为疫苗的有效期提供依据。方法分别将A1(H1N1)、A3(H3N2)、B/Victoria和B/Yamagata等4株毒株制备单价原液,生产6批疫苗(不含硫柳汞),评价疫苗分别在(37±2)℃、(25±2)℃和(6±2)℃条件下的稳定性。结果四价流感病毒裂解疫苗在(37±2)℃保存10 d、在(25±2)℃保存3个月、在(6±2)℃保存15个月,疫苗各项指标均符合企业注册标准和《中华人民共和国药典》2015版(三部)的要求。结论四价流感病毒裂解疫苗具有良好的稳定性,在(6±2)℃可稳定保存15个月。

四价流感病毒裂解灭活疫苗的研制

目的 研制四价流感疫苗,提高疫苗对人群的保护能力.方法 用WHO推荐的流感疫苗株采用先区带离心再分子筛层析纯化的工艺制备流感疫苗,按中国药典（2010年版三部）的要求进行全项检定,并进行免疫原性试验和动物过敏性试验.结果 各项指标均符合《中国药典》2010年版三部《流感病毒裂解疫苗》项下申报注册标准.免疫原性试验结果表明在现有三价流感疫苗中增加一个B型病毒抗原后,新增抗原与原有抗原无拮抗作用,不影响相关抗体的产生.过敏原性试验表明抗原种类和总量的增加,不会加重局部和全身的副作用反应.结论 本生产工艺成熟、稳定、可靠,可制备高质量适合人用的安全、有效的流感疫苗.

免疫衰老及老年流感疫苗的研究进展

接种流感疫苗是预防季节性流感的有效方法。老年人是季节性流感的高危人群,但普通流感疫苗对老年人的免疫保护效果不如健康成人。随着全球老龄化进程的加快,急需研制更加有效的老年流感疫苗。本综述讨论了老年人体内的免疫衰老,以及目前在老年流感疫苗领域取得的实质性进展。

老年高剂量四价流感病毒裂解疫苗的研究

目的评估老年高剂量四价流感病毒裂解疫苗（A＋B套苗）的免疫原性。方法采用江苏金迪克生物技术有限公司研发的四价流感病毒裂解疫苗，以小鼠为动物模型进行免疫原性试验，测定各组抗血凝素抗体滴度，比较高剂量A＋B套苗与其他组疫苗的免疫原性差别。结果血凝抑制试验结果表明，高剂量单次免疫组对四型抗原的血凝抑制滴度均高于标准剂量单次免疫组；高剂量A＋B套苗的研究中，除高剂量先B苗后A苗组中抗A3的血凝素抗体滴度未显著增加外，其他各组高剂量两次免疫组血凝素抗体滴度均显著高于标准剂量两次免疫组（P〈0.001）。同时发现，不论高剂量还是标准剂量的A＋B套苗组中，先B苗后A苗组中抗A型的血凝素抗体滴度明显高于先A苗后B苗组；先A苗后B苗组中，抗B型的血凝素抗体滴度明显高于先B苗后A苗组。在高剂量A＋B套苗两次免疫时间的间隔对抗血凝素抗体产生的影响试验中，7 d与10 d免疫间隔的免疫效果优于3 d。结论高剂量四价老年流感疫苗（A＋B套苗）分两次注射、免疫间隔7～10 d的方式免疫效果最好，在流感季节可根据A型和B型流感病毒流行监测结果，选择或改变先A苗后B苗或先B苗后A苗使用程序，以增加对人群的保护，是预防老年流感的新方法。

基于中国仓鼠卵巢细胞表达的Fc融合蛋白制备工艺的优化

目的优化基于中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞表达的Fc融合蛋白制备工艺。方法对于上游细胞培养工艺，先在摇瓶中分别对培养基配比和流加培养方案进行优化，再将优化工艺放大到生物反应器规模并确认其可行性。对于下游蛋白纯化工艺，分别对A蛋白亲和层析的洗脱条件和阴离子交换层析的平衡条件进行优化。结果对于上游细胞培养工艺，以种子培养基：基础培养基（CD OptiCHO）：基础培养基（CDM4Mab）为2：1：1的配比配制培养基，并以3、6和9d补料的流加培养方案进行细胞培养，可获得理想的细胞密度和活率，且成本较低。对于下游蛋白纯化工艺，以pH3．3的洗脱液进行A蛋白亲和层析纯化时，Fc融合蛋白的回收率为94．7G，纯度为98．64％；以pH5．0~pH5．5的平衡液进行阴离子交换层析纯化时，Fc融合蛋白的回收率达到98％以上、纯度达到99％。结论基于CHO细胞表达的Fc融合蛋白制备工艺的上游细胞培养和下游蛋白纯化工艺得到成功优化，这为此类抗体药物制备工艺的优化提供了思路。

单向免疫扩散测定四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝素含量

目的四价流感病毒裂解疫苗在三价疫苗中新增一个谱系的B型血凝素抗原,单向免疫扩散法(singleradial immunodiffusion,SRID)是否能准确测定四价疫苗中两种谱系的B型血凝素抗原含量。方法采用江苏金迪克生物技术有限公司研制的四价流感病毒裂解疫苗,运用SRID进行测定。结果在正常检测范围内(10~40μg/ml)比较标准品抗原对照、单价样品、B1+B2单价样品的血凝素测定值差异无统计学意义(P>0.05)。在10~160μg/ml检测范围内分别以三价苗和固定浓度30μg/ml的B型血凝素为基质稀释待测的另一B型血凝素,与该B型不同稀释度的单一血凝素测定结果进行比较,以测定两种B型流感血凝素有无互相干扰。在流感疫苗血凝素检测范围10~40μg/ml之内时,检测的血凝素含量与沉淀环直径呈正比关系(决定系数R^2=0.998),而在10~160μg/ml检测范围内,三元线性回归方程拟合度最高(决定系数R^2=0.999)。结论单向免疫扩散法检测B1和B2毒株的血凝素抗原在10~40μg/ml和10~160μg/ml范围内和存在其他三种血凝素或另一B型血凝素时,均未见互相干扰。