基于Tfh细胞探讨中医药治疗炎症性肠病的新策略

炎症性肠病是一种涉及环境、遗传、微生物和免疫等多种因素的慢性复发性肠道疾病。目前的西药治疗药物疗效差、副作用大、价格昂贵,中医药凸显出了其独特的优势。滤泡辅助性T细胞(Follicular helper T cells,Tfh细胞)是当前免疫学领域的研究热点,其分化与功能异常可导致包括炎症性肠病在内的自身免疫性疾病的发生。大量的证据表明中医药复方及中药有效组分可通过调控Tfh细胞的数量水平、Tfh细胞与滤泡调节性T细胞(Follicular regulatory T cells,Tfr细胞)的平衡、Tfh细胞功能蛋白分子等途径治疗实验性结肠炎。该文就Tfh细胞与炎症性肠病的关系、中医药调控Tfh细胞治疗炎症性肠病的机制作一综述,为从Tfh细胞角度探索中医药治疗炎症性肠病奠定了科学的基础。在中医药的干预下,Tfh细胞数量水平及功能的改善将有望成为中医药治疗炎症性肠病的新策略。

补脾益肠丸通过抑制溃疡性结肠炎模型小鼠糖酵解代谢途径发挥抗炎作用的机制研究

目的探究补脾益肠丸(Bupi Yichang Pills)对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用及潜在作用机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立溃疡性结肠炎模型,同步给予低、中、高剂量补脾益肠丸(1.5、3.0、6.0 g·kg^(-1)·d^(-1))及美沙拉嗪(300 mg·kg^(-1)·d^(-1)),观察小鼠一般表现并称质量,苏木素-伊红染色法观察小鼠结肠组织病理损伤情况,实时荧光定量PCR(qPCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)法测定炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-35、转化生长因子(TGF)-β1]水平,qPCR、蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测葡萄糖转运体及糖酵解代谢激酶的mRNA及蛋白表达水平。结果低、中、高剂量补脾益肠丸明显下调结肠炎小鼠的疾病活动指数(P<0.05,P<0.01);其体质量、结肠长度明显增大,而结肠质量、结肠质量指数、单位结肠质量指数均明显减小(P<0.05,P<0.01),且结肠组织溃疡形成及炎性细胞浸润明显改善;中、高剂量补脾益肠丸明显下调结肠炎小鼠结肠组织促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量及mRNA表达水平(P<0.01),而抗炎性细胞因子IL-10、IL-35、TGF-β1的含量及其mRNA表达水平被明显上调(P<0.01);进一步研究发现在mRNA和蛋白水平上,高剂量补脾益肠丸可明显下调结肠组织中葡萄糖转运体(Glut1、Glut2、Glut4)和糖酵解激酶(HK2、Aldolase A、PKM2)的表达(P<0.01)。结论补脾益肠丸能有效缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎,其作用机制与改善糖酵解代谢途径及调节炎性细胞因子表达有关。

补中益气汤治疗结肠炎的作用机制研究进展

补中益气汤最早记载于《内外伤辨惑论》,由黄芪、人参、白术、炙甘草、陈皮、当归、升麻、柴胡等组成,具有补中益气、升阳举陷的作用。补中益气汤通过单方加减或联合其他复方及西药有效治疗结肠炎,其可能的作用机制涉及调节免疫、抑制炎症小体通路、黏膜保护、抑制结肠上皮细胞凋亡和调控能量代谢等,提示补中益气汤在治疗结肠炎的临床应用中具有良好的开发前景。

四神丸治疗溃疡性结肠炎的临床运用及免疫药理学研究进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因复杂且复发率高的慢性非特异性炎症性肠病。《2017年溃疡性结肠炎中西医结合诊疗共识意见》中将出自《证治准绳》的四神丸作为治疗脾肾阳虚型UC的基础中药方剂。以四神丸为主方加减化裁、联合其他中药复方、联合西药以及其他中医特色疗法治疗慢性复发性UC具有疗效确切、不良反应小、复发率低、多靶点及多通路调控等优势。调节免疫是四神丸治疗UC的主要作用机制,主要表现在对记忆性T细胞(Memory T cell,TM)、辅助型T细胞1(T helper 1 cell,Th1)/辅助型T细胞2(T helper 2 cell,Th2)、调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)、滤泡辅助性T细胞(follicular B helper T cells,Tfh)/滤泡调节性T细胞(follicu⁃lar regulatory T cells,Tfr)、树突状细胞、B淋巴细胞和肠道菌群等以及多条信号通路调控作用,显示出四神丸良好的免疫药理作用。因此,就近年来四神丸治疗UC的临床运用及免疫药理学研究展开综述,以期为中医药治疗UC提供更多思路和途径。

补脾益肠丸重塑CD4^(+)T细胞亚群稳态缓解溃疡性结肠炎的机制研究

目的探究补脾益肠丸(BPYCP)对实验性溃疡性结肠炎(UC)小鼠CD4^(+)T细胞亚群的调控作用。方法48只C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为对照组(Control组,10只)、模型组(DSS组,13只)、模型+补脾益肠丸组(DSS+BPYCP组,13只)、模型+5-ASA组(DSS+5-ASA组,12只);采用自由饮用2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导小鼠UC模型,DSS+BPYCP组和DSS+5-ASA组分别采用BPYCP或美沙拉嗪(5-ASA)连续灌胃2周。观察小鼠粪便黏稠度及便血情况,测量结肠长度,结肠称质量并计算结肠质量指数及单位结肠质量指数;苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠病理变化,并进行病理损伤评分;流式细胞术检测肠系膜淋巴结中的CD4^(+)T细胞亚群水平;酶联免疫吸附试验检测干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-17A、IL-10及IL-21表达水平;实时荧光定量PCR检测结肠组织T-框蛋白21(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、B细胞淋巴瘤-6(Bcl-6)及大鼠叉头蛋白P3(Foxp3)mRNA表达水平。结果与DSS组比较,DSS+BPYCP组和DSS+5-ASA组UC小鼠腹泻、便血等症状得到改善,小鼠体质量及结肠长度均增加,且结肠质量、结肠质量指数及单位结肠质量指数均下降,黏膜上皮较完整,腺体排列更规整,炎性细胞浸润更少,病理组织损伤评分显著降低,肠系膜淋巴结中的Th2细胞比例降低,Th17细胞比例及IL-17A水平降低,结肠组织T-bet、GATA-3、RORγt、Bcl-6 mRNA水平降低(P<0.05);DSS+BPYCP组的Th1细胞比例降低,CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例及IL-10水平均升高,CD4^(+)CXCR5^(+)Tfh细胞比例和IL-21水平降低,Foxp3 mRNA水平升高(P<0.05);DSS+5-ASA组的Th1细胞比例及IFN-γ水平降低(P<0.05)。结论BPYCP可能通过重塑肠道组织的CD4^(+)T细胞亚群稳态缓解实验性UC。

清热燥湿药对乳腺癌抑制作用的研究进展

清热燥湿法是乳腺癌的常用治法之一,深入研究其药理作用和机制尤为必要。基于此,就近年来关于常用清热燥湿药对乳腺癌的药理作用和机制的相关文献进行归纳分析,发现清热燥湿药黄芩、黄连、苦参、白鲜皮和秦皮的有效成分能通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期、调节自噬、抗肿瘤血管生成来抑制乳腺癌的生长,并能逆转乳腺癌细胞多药耐药性、减少癌细胞侵袭和转移以及调节肿瘤免疫微环境。梳理清热燥湿药抑制乳腺癌的实验研究现状,可为清热燥湿药抑制乳腺癌甚至其他癌症的深入研究提供借鉴。

萸连丸对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠记忆性滤泡辅助性T细胞的调节作用

目的探究萸连丸(黄连、吴茱萸)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠脾脏记忆性滤泡辅助性T细胞(Memory follicular T helper cell,m Tfh)的调节作用。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、萸连丸组(0.5 g·kg^(-1))和美沙拉嗪组(0.3 g·kg^(-1)),每组10只。采用3%DSS溶液自由饮用7 d诱导溃疡性结肠炎小鼠模型。实验过程每天记录小鼠的精神状态、粪便性状、便血及体质量情况;测量小鼠结肠长度、结肠质量,计算结肠质量指数;采用HE染色法观察结肠组织病理形态变化;ELISA法测定结肠组织中白细胞介素6(IL-6)、IL-15的表达水平;流式细胞术测定脾脏组织中m Tfh细胞亚群的表达情况;Western Blot法测定结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的体质量显著下降(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.01),结肠质量明显增加(P<0.05),结肠质量指数显著升高(P<0.01),结肠组织病理损伤严重;结肠组织中的促炎细胞因子IL-6、IL-15表达水平显著升高(P<0.01);脾脏组织中CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)CD62L^(+)、CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)GL7^(+)、CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)GL7^(+)细胞表达水平显著升高(P<0.01),而CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)CD62L^(+)细胞表达水平显著降低(P<0.01);结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,萸连丸组及美沙拉嗪组小鼠的体质量明显上升(P<0.05),结肠长度显著延长(P<0.01),结肠质量明显降低(P<0.05),结肠质量指数显著下降(P<0.01),结肠组织病理损伤得到较明显改善;结肠组织中的IL-6、IL-15表达水平显著降低(P<0.01);脾脏组织中CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)CD62L^(+)、CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)GL7^(+)、CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)GL7^(+)细胞表达水平显著降低(P<0.01),而CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)CD62L^(+)细胞表达水平显著升高(P<0.01);结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论萸连丸对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有治疗作用,能够改善结肠组织病理损伤,可能与其激活Roquin-1/AMPK-α信号通路,下调炎性细胞因子IL-6、IL-15表达,调控m Tfh细胞亚群稳态有关。

益肾蠲痹丸治疗类风湿关节炎的免疫学视角分析

“八纲辨证”“法随证立”“方从法出”是益肾蠲痹丸治疗类风湿关节炎(RA)的理论基石,但辨证缺乏量化标准,也造成该方疗效欠佳的治疗现状,故进一步明确RA寒热证候分类的生物学基础是提高益肾蠲痹丸临床疗效的重要举措。相关机制研究提示靶向免疫CD4^(+)T细胞能量代谢状态调控其亚群分化及功能可成为益肾蠲痹丸“精准治疗”寒证RA的新思路,其中机制有待进一步探索。

四物汤水提物对肥胖大鼠肠道菌群平衡的调控作用

目的 探讨四物汤水提物对肥胖大鼠肠道菌群平衡的调控作用。方法 选取40只SPF级雄性SD大鼠予以高脂饲料建立肥胖模型,30只造模成功的肥胖大鼠随机分为模型组,四物汤低、中、高剂量组[1.62、3.24、6.48 g/(kg·d)灌胃]和奥利司他组[32.40 mg/(kg·d)灌胃],每组6只,另设正常组6只。正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。分别记录大鼠初始及终末体质量和每日摄食量。治疗8周后测定各组大鼠脂体比(Body fat index, BFI)、甘油三酯(Triglycerides, TG)、总胆固醇(Total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)和葡萄糖(Glucose, GLU)水平;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin, HE)染色观察肝脏和脂肪组织形态学变化;16S rDNA检测大鼠粪便中的肠道菌群种类及其丰度。结果 与模型组相比,各治疗组大鼠体质量、BFI、TG、TC、LDL-C和GLU水平显著下降(P<0.05),气球菌属(Aerococcus)、Facklamia、嗜冷杆菌(Psychrobacter)、NK4A214_group、棒状杆菌(Corynebacterium)的相对丰度显著上升,Quinella、norank_f__norank_o__RF39和厚壁菌门如Turicibacter丰度显著下降。结论 四物汤水提物能够降低高脂饮食诱导的肥胖大鼠的体质量和血脂水平,减少肝脏脂质积累和脂肪堆积,其可能是通过调节肠道菌群平衡实现的。

黄芪多糖对结肠炎小鼠树突状细胞亚群的调节作用

目的:探讨黄芪多糖(APS)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠树突状细胞(DCs)分化的影响及其可能的作用机制。方法:将32只SPF级BALB/c雄性小鼠随机选取8只作为正常组,其余24只采用3%DSS溶液复制结肠炎小鼠模型,造模成功后,随机均分成3组,分别为模型组、APS组和美沙拉嗪组。观察各组小鼠体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度及单位结肠质量指数等情况;HE染色后进行病理损伤评分;流式细胞术检测小鼠外周血中总DCs(CD11c^(+)CD103^(+)、CD11c-CD103^(+)、CD11c^(+)CD103-、CD11c-CD103-细胞)、炎症DCs(CD11c^(+)CD103^(+)i NOS^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)TNF-α^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)E-Cadherin^(+)细胞)、滤泡性DCs(CD11c^(+)CD103^(+)CXCR5^(+)细胞)水平;Western blot法分析结肠组织中PI3K/Akt信号通路相关分子的表达水平。结果:与模型组相比,各治疗组小鼠在给药治疗后体质量明显增加,结肠长度明显增长,结肠质量、结肠质量指数、单位结肠质量指数及病理组织学评分显著下降(P<0.05或P<0.01);同时,经APS治疗后,结肠炎小鼠外周血中炎症DCs数量如CD11c^(+)CD103^(+)INOS^(+),CD11c^(+)CD103^(+)TNF-α^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)E-cadherin^(+)和滤泡性DCs(CD11c^(+)CXCR5^(+)CD103^(+),DC-Tfh)数量明显下调(P<0.05或P<0.01)。各治疗组结肠组织中PI3K、p-Akt、Rheb和Kif2α蛋白表达水平有所降低(P<0.05或P<0.01)。结论:APS有效缓解小鼠结肠炎与下调小鼠炎症、滤泡性DCs数量以及抑制PI3K/Akt信号通路活化密切相关。

越鞠丸干预DMBA诱导乳腺癌模型大鼠的效应及机制研究

探究越鞠丸对乳腺癌的抑制作用及其机制。92只SPF级SD雌性大鼠随机选14只为对照组;其余78只采用7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)建立乳腺癌模型。将模型建立成功的大鼠随机分为模型组、他莫昔芬组(1.9 mg·kg^(-1)·d^(-1))、越鞠丸低剂量组(17 g·kg^(-1)·d^(-1))、越鞠丸高剂量组(34 g·kg^(-1)·d^(-1))。每日观察大鼠精神、饮食、活动,隔日称量体质量,给药12周后处死动物,称量瘤重;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清雌激素、孕酮水平;HE染色观察乳腺和肿瘤组织病理学改变;蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase muscle,PFKM)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)和核因子-κB(nuclear facter-κB,NF-κB)、磷酸化NF-κB表达情况;采用16S rRNA高通量测序检测肠道微生物组。结果显示,与模型组相比,越鞠丸高、低剂量组肿瘤抑制率分别为15.8%、64.5%,低剂量组抑制作用更为显著;与对照组相比,模型组血清中雌激素、孕酮水平明显升高,越鞠丸给药后血清中雌激素、孕酮水平相较于模型组呈下降趋势,且越鞠丸低剂量组作用显著(P<0.05);HE染色结果显示,与模型组比较,越鞠丸给药组乳腺组织增多的腺体减少,乳腺导管扩张程度减轻,腺泡数量与腺泡腔面积减少,分泌物减少,乳腺上皮细胞的复层排列层次减少;同时研究发现越鞠丸干预后糖酵解相关蛋白GLUT1、LDHA、PFKM、PKM2、HK2和炎症因子NF-κB的表达显著下调(P<0.05),并使乳腺癌大鼠肠道微生物群落多样性、微生物组成和结构及群落丰度发生改变。研究结果表明,越鞠丸对乳腺癌具有抑制作用,其作用机制可能与调节雌激素、孕激素分泌,调控糖酵解和炎症因子以及影响肠道微生物组成密切相关。

调控免疫:从肺论治炎症性肠病的新思路

炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一种慢性非特异性肠炎性疾病,包括溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)和克罗恩病,它以反复发作的腹痛、腹泻及黏液脓血便为主要症状。目前医学界认为其发病原因可能与遗传、环境和肠道黏膜对肠道内细菌的免疫失调等因素有关,免疫因素可能是占主导的发病因素。中医学认为肺与肠在生理、病理上密切相关,古代医家提出“肺与大肠相表里”的理论,认为很多大肠病证可以从肺论治,为从肺论治IBD提供了中医理论依据。IBD在中医学中属于“泄泻”“肠澼”“痢疾”等疾病范畴。病机多以脾胃虚弱为本,病位虽在大肠,但亦与其他脏腑,如脾、肺、肾等密切相关。根据“肺与大肠相表里”理论化生出从肺论治IBD的方法,临床治疗取得了显著疗效。同时,国内外现代医学研究也证实了肺与大肠在免疫学功能上存在诸多联系,并有研究表明从肺论治IBD可以获得显著的疗效,为未来深入挖掘肺与肠之间的免疫学联系和交流,以及对于IBD的治疗,都提供了新思路与新途径。

毒性矿物药的安全性思考

数千年来,矿物药历经“识毒-用毒-防毒-解毒”的探索和实践,“毒”已成为其药性的重要组成。科学认识矿物药的毒性已成为临床安全用药的基石。本文着重介绍含汞矿物药在“识毒-防毒-解毒”等方面的基础研究,为毒性矿物药的临床安全“用毒”研究提供参考依据,同时提出肠道菌群在矿物药“识毒-防毒-解毒”的应用构想。

人参皂苷Rg1对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠Treg/Th9细胞平衡的调控作用

目的探讨人参皂苷Rg1对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞9(Th9)细胞平衡的调控作用。方法将40只BALB/C雄性小鼠随机分为正常组、模型组、人参皂苷Rg1组(200 mg·kg^(-1))及美沙拉嗪组(300 mg·kg^(-1)),每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用3%DSS自由饮水7 d建立溃疡性结肠炎模型;给药组同时按照上述剂量灌胃给药,每日1次,连续10 d。观察记录小鼠一般情况及体质量;测量结肠长度及其质量,计算结肠质量指数;采用HE染色法进行结肠组织病理学观察,并进行病理损伤评分;采用ELISA法检测结肠组织中IL-1β、IL-4、IL-15、IL-17A表达水平;采用流式细胞术检测小鼠外周血中CD4^(+)CD44^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD44^(+)IL-9;、CD4^(+)CD44^(+)IL-10^(+)、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD25^(+)PD-1;及CD4^(+)CD25^(+)PD-L1;T细胞水平。结果与正常组比较,模型组小鼠结肠黏膜充血、水肿,杯状细胞减少,大量炎症细胞浸润,部分区域溃疡形成;小鼠体质量明显下降、结肠质量明显增加、结肠长度明显缩短、结肠质量指数及病理评分明显升高(P<0.01);小鼠结肠组织中IL-1β、IL-15、IL-17A表达水平显著升高(P<0.01),IL-4表达水平显著降低(P<0.01);小鼠外周血的CD4^(+)CD44^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD44^(+)IL-10;T细胞水平均显著降低(P<0.01),而CD4^(+)CD44^(+)IL-9^(+)、CD4^(+)CD25^(+)PD-1;、CD4^(+)CD25^(+)PD-L1;T细胞水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,人参皂苷Rg1组小鼠结肠黏膜充血、水肿明显减轻,糜烂修复,炎症细胞浸润明显减少;体质量明显增加、结肠质量明显降低、结肠长度明显延长、结肠质量指数及病理评分明显降低(P<0.05);小鼠结肠组织中IL-1β、IL-15、IL-17A表达水平明显下降(P<0.01),IL-4表达水平明显升高(P<0.05);小鼠外周血的CD4^(+)CD44^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)、CD4^(+)CD44^(+)IL-10^(+)T细胞水平均显著升高(P<0.01),同时CD4^(+)CD44^(+)IL-9^(+)、CD4^(+)CD25^(+)PD-1;、CD4^(+)CD25^(+)PD-L1;T细胞水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论人参皂苷Rg1可能通过调控Treg/Th9细胞平衡治疗DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎。

安宫牛黄丸联合丁苯酞治疗缺血性中风

目的观察安宫牛黄丸联合丁苯酞对缺血性中风中脏腑闭证患者的临床疗效及血清N端前脑钠肽(NT-pro BNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响。方法将113例急性缺血性中风患者按随机数字表法分为治疗组(57例)与对照组(56例)。在2组均予常规治疗方案的基础上,对照组单一使用丁苯酞注射液(100 mL,每日1次),连续7 d;治疗组在对照组基础上加用安宫牛黄丸(每日1丸,口服或鼻饲),连续7 d。治疗前后分别观察并记录2组临床疗效、神经功能缺损评分(NIHSS),格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分和不良反应发生率,并检测2组治疗前后血清NT-pro BNP和hs-CRP水平。结果治疗后,2组NIHSS和GCS评分均显著改善(P<0.05),治疗组NIHSS和GCS评分显著优于对照组(P<0.05);治疗后,2组NT-pro BNP与hs-CRP水平均显著下降(P<0.05),且治疗组下降明显;治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论安宫牛黄丸联合丁苯酞能有效改善缺血性中风患者神经功能缺损,降低不良反应发生率。

香参丸对溃疡性结肠炎小鼠炎性树突状细胞的调节作用

目的在评价疗效的基础上,评价香参丸对结肠炎小鼠炎性树突状细胞水平的调节作用。方法将雄性BALB/c小鼠随机平均分成4组,即正常组、模型组、香参丸组、美沙拉嗪(5-ASA)组,每组10只。采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠模型,香参丸5 g·kg^(-1)·d^(-1)、美沙拉嗪300 mg·kg^(-1)·d^(-1),正常组和模型组给予等体积生理盐水,灌胃给药10 d后,通过测量小鼠体质量、结肠质量、结肠长度,计算肠重指数、肠长指数,观察结肠组织病理切片评价香参丸疗效;流式细胞术检测炎性树突状细胞数量;酶联接免疫吸附剂测定法(ELISA法)检测炎症因子的含量。结果与模型组小鼠相比,经香参丸治疗的小鼠结肠质量与结肠质量指数明显降低(P<0.05),结肠长度明显恢复(P<0.05),炎性树突状细胞亚型CD11c^(+)CD103^(+)CXCR5^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)iNOS^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)E-cadherin^(+)、CD11c^(+)CD103^(+)TNF-α^(+)细胞数量明显下降,抑炎因子IL-13、IL-4表达增加,促炎因子IL-33、IFN-γ和MCP-1/CCL-2表达水平降低。结论香参丸可能通过调节UC小鼠炎性树突状细胞,发挥对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。

以温阳-能量-免疫轴理论解析四神丸治疗炎症性肠病

在中医经典理论“凡阴阳之要,阳密乃固”“益火之源以消阴翳”及“治未病”等指导下,结合免疫代谢学研究最新热点提出的“温阳-能量-免疫轴”理论,诠释了阳气的功能物质基础、阳虚证的免疫代谢学表征以及“益火之源以消阴翳”的科学内涵,进而为从阳论治未病提供科学依据。在这一理论指导下,具有温脾补肾、涩肠止泻之功的四神丸可通过改善炎症性肠病动物模型能量代谢水平,调节免疫状态平衡,维持免疫耐受,从而有效治疗炎症性肠病,不失为“温阳-能量-免疫轴”理论实际利用的典范。

姜黄素对AIH小鼠肠道菌群失衡的改善作用

目的 探讨姜黄素(curcumin, Cur)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)小鼠肠道菌群失衡的改善作用。方法 BALB/c小鼠随机分成空白对照组、AIH模型组、姜黄素组和地塞米松(阳性药)组。采用刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)尾静脉注射建立小鼠AIH模型。收集小鼠回盲部粪便进行DNA抽提和PCR扩增获取碱基序列,并建立数据库;探索肠道菌群与自身免疫性肝炎的相关性及姜黄素对其肠道菌群失衡的影响。结果 与空白对照组比,AIH模型组小鼠粪便中肠道菌群中拟杆菌属(Bacteroides)、葡萄球菌属(Staphylococcus)丰度明显下降,而norank-f-Muribaculaceae、毛螺旋菌属(Lachnospiraceae-NK4A136-group)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、罗斯氏菌属(Roseburia)、Jeotgalicoccus、糖化假丝酵母菌(Candidatus-Saccharimonas)、Lachnoclostridium、厌氧棍状菌属(Anaerotruncus)丰度有所上升;与AIH模型组比较,姜黄素组和地塞米松组中葡萄球菌属(Staphylococcus)、norank-f-Muribaculaceae、毛螺旋菌属(Lachnospiraceae-NK4A136-group)、Jeotgalicoccus、棒杆菌属(Corynebacterium)、芽孢八叠球菌属(Sporosarcina)丰度有所下降,而拟杆菌属(Bacteroides)、乳酸菌属(Lactobacillus)、毛螺旋菌属(norank-f-Lachnospiraceae)、Colidextribacter、细小杆菌(Parvibacter)、Harryflintia丰度有所上升。结论 与正常小鼠相比,AIH小鼠肠道菌群结构发生改变,且姜黄素对AIH小鼠的肠道菌群失衡有明显改善作用。

苦参素干预AKT/mTOR通路调节记忆性B细胞治疗溃疡性结肠炎作用机制研究

目的探讨苦参素(Oxymatrine,OMT)对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的结肠炎小鼠的记忆性B细胞分化及其可能的作用机制。方法将40只SPF级BALB/c雄性小鼠随机均等分成四组:正常组、模型组、治疗组、阴性对照组。模型组、治疗组小鼠自由饮水法饮用DSS溶液诱导小鼠结肠炎模型,观察小鼠临床症状,体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度及单位结肠质量指数等情况;HE染色后进行病理损伤评分;流式细胞术检测小鼠外周血中记忆性B细胞:CD19^(+)CD27^(+)IgG^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgM^(+)、CD19^(+)CD27^(+)FCRL5^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CXCR3^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CD38^(+)记忆性B细胞水平和CD19^(+)CD27^(+)CD103^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IL-10^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgA^(+)记忆性调节性B细胞(Regulatory B cells,Breg cells)水平;Western blot法分析结肠组织中AKT/mTOR信号通路相关分子的表达水平。结果与模型组相比,治疗组小鼠在给药治疗后体质量明显增重,结肠长度明显增长,结肠质量、结肠质量指数、单位结肠质量指数及病理组织学评分显著下降(P<0.05或P<0.01);同时,经苦参素治疗后,结肠炎小鼠外周血中CD19^(+)CD27^(+)IgG^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgM^(+)、CD19^(+)CD27^(+)FCRL5^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CXCR3^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CD38^(+)的记忆性B细胞水平下降和CD19^(+)CD27^(+)CD103^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IL-10^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgA^(+)记忆性Breg细胞水平升高。各治疗组结肠组织中ICOS、p-AKT和mTOR等蛋白表达水平有所降低(P<0.05或P<0.01)。结论苦参素有效治疗小鼠结肠炎,可能与其抑制AKT/mTOR信号活化调节记忆性B细胞亚群平衡密切相关。

萸连丸对溃疡性结肠炎小鼠脾脏CD4^(+)T细胞BCL-6/Blimp-1,PD-1/PD-L1表达的调节作用

目的:探讨萸连丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)小鼠脾脏CD4^(+)T细胞转录因子B细胞淋巴瘤因子6/B细胞诱导成熟蛋白1(BCL-6/Blimp-1),程序性死亡受体-1/程序性死亡受体配体-1(PD-1/PD-L1)表达的调节作用。方法:将40只BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、萸连丸500 mg/kg组以及美沙拉嗪300 mg/kg组。除正常对照组小鼠外,其余小鼠采用DSS复制慢性溃疡性结肠炎模型,造模成功后,各组灌胃给予药物或生理盐水,观察小鼠体质量、结肠长度、结肠质量、肠质量指数、结肠黏膜病理形态及病理组织学损伤评分;ELISA法检测结肠组织中白细胞介素-7(IL-7)、IL-9、IL-23含量;流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)Blimp-1^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)及CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平;Western blot法检测结肠组织中BCL-6、Blimp-1蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组结肠组织中IL-7、IL-9、IL-23含量明显升高(P<0.05),小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)、CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平显著升高(P<0.01),CD4^(+)Blimp-1^(+)细胞水平显著降低(P<0.01),BCL-6蛋白表达明显上调(P<0.05),Blimp-1蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组相比,萸连丸500 mg/kg组小鼠体质量和结肠长度明显增加、肠质量指数明显降低(P<0.05),结肠组织中IL-7、IL-9、IL-23含量显著降低(P<0.01),小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)、CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平明显降低(P<0.05),CD4^(+)Blimp-1^(+)细胞水平明显升高(P<0.05),BCL-6蛋白表达明显下调(P<0.05),Blimp-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:萸连丸可能通过调节小鼠CD4^(+)T细胞表面BCL-6/Blimp-1,PD-1/PD-L1表达水平改善溃疡性结肠炎。