1株人源抑制致病菌的粪肠球菌性能评价

目的对分离自健康成人粪便中的一株粪肠球菌QT01进行生物学性质和抑制致病菌能力评价。方法采用PCR方法扩增16S rDNA基因并测序确定分离菌株的种属;采用药敏试验和耐酸耐胆盐试验评价QT01对抗生素敏感性及耐受胃肠道能力;采用抑制试验评价QT01拮抗致病菌和益生菌的能力。结果经16S rDNA序列同源性分析,鉴定该菌株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis);它不耐酸,但具有较强的耐胆盐能力;对常见抗生素如阿莫西林、青霉素、氯霉素和环丙沙星等敏感;能抑制粪肠球菌致病株V583和产气肠杆菌,但不能抑制植物乳杆菌和嗜热链球菌。结论粪肠球菌QT01不耐酸耐胆盐,对抗生素敏感,能够抑制致病菌V583,在微生态制剂产品开发方面具有应用潜力。

白及多糖改善5-FU化疗毒副作用的非靶向代谢组学研究

通过非靶向代谢组学技术研究白及多糖(Bletilla striata polysaccharide,BSP)对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗的荷瘤小鼠血清中内源性代谢物的影响,探讨BSP改善5-FU引起的机体毒副反应的作用机制。将雄性BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组、5-FU组和5-FU+BSP组,每组8只。除正常组外,其余各组均通过皮下接种CT26小鼠结肠癌细胞构建荷瘤小鼠模型,造模第2天起开始5-FU化疗和BSP给药。给药期间记录各组小鼠体质量变化、腹泻情况及外周血白细胞数量变化。模型组小鼠瘤重达到约1 g时终止化疗进行取材。通过TUNEL荧光染色检测各组小鼠小肠组织中细胞凋亡情况;流式细胞术检测小鼠骨髓中造血干细胞和髓系祖细胞占比;每组随机选取5个血清样本进行非靶向代谢组学分析。实验结果表明,BSP抑制小鼠结肠癌效果不明显,但经BSP干预后5-FU化疗引起的腹泻、白细胞减少及体质量下降等情况得到显著改善,小肠组织中凋亡细胞减少,骨髓造血干细胞和髓系祖细胞占比明显升高。代谢组学分析结果显示,5-FU毒副作用导致小鼠血清中29种代谢物含量显著降低,22种代谢物含量显著升高;其中19种发生紊乱的代谢物在BSP用药后向正常水平回调,通路富集显示这些代谢物所涉及代谢通路主要包括嘧啶代谢、花生四烯酸代谢和类固醇生物激素合成等。因此,BSP改善5-FU引起的肠道和骨髓毒副作用的机制可能与调控核苷酸合成、炎症损伤和激素生成相关。

植物乳杆菌ZDY04促进胆固醇逆向转运减轻TMAO诱导的ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化

目的探讨植物乳杆菌ZDY04能否改善氧化三甲胺(TMAO)诱导的小鼠动脉粥样硬化及其机制。方法6~8周龄雌性载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E-deficient mice,ApoE^(-/-))小鼠被随机分成3组:正常饮食组(Chow组)、胆碱+溶剂组(Choline+PBS组)和Choline+ZDY04组,每组5只,通过自由饮用1.3%高胆碱饮食构建小鼠动脉粥样硬化模型,灌胃含有15%甘油的无菌PBS或菌株,持续16周,检测血脂水平,uHPLC-MS/MS测定血浆TMAO和粪便三甲胺(TMA)的含量,采用油红“O”染色检测全长主动脉粥样硬化病变程度,采用苏木素-伊红、油红“O”以及Masson染色分别检测主动脉根部斑块面积、脂质占比以及胶原纤维含量,采用免疫荧光检测主动脉根部斑块中巨噬细胞以及平滑肌细胞数量,采用RT-qPCR和Western blotting检测小鼠肝脏胆固醇逆向转运相关基因及Fmo3基因的表达水平。结果与Choline+PBS组相比,Choline+ZDY04组小鼠主动脉脂质沉积区域显著减少,主动脉根部动脉粥样硬化斑块面积、脂滴及巨噬细胞阳性区域显著减少,胶原纤维和平滑肌细胞在斑块中占比没有显著变化。粪便TMA及血清TMAO含量显著降低。血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量具有下降趋势,但差异无统计学意义,高密度脂蛋白胆固醇含量显著上升。胆固醇逆向转运相关基因Sr-b1、Abcg5和Cyp7a1等显著升高,Fmo3基因表达水平没有变化。结论植物乳杆菌ZDY04通过促进胆固醇的逆向转运和分解,抑制ApoE^(-/-)小鼠体内的动脉粥样硬化。