血液净化技术在银屑病治疗中的应用

血液净化（blood purification）是指将患者的血液在体外通过净化装置，除去血液中某些致病物质，从而净化血液的技术总称。包括血液透析、腹膜透析、血液滤过、连续性动静脉血液滤过、血液灌流、血浆置换等一整套血液净化技术。其应用范围亦日益扩大，在皮肤科疾病中的应用也日渐显示其成效。

白念珠菌菌丝相全长cDNA文库的构建和鉴定

目的利用SMART（Switching Mechanism At5′end of RNA Transcript Method）技术,构建高质量的白念珠菌菌丝相（芽管）全长cDNA文库。方法不完全1640培养基诱导高于95%的白念珠菌带芽管孢子,提取总RAN并纯化poly A＋RNA作为模板,应用SMART技术利用SMARTScribeTMMMLV反转录酶和经修饰的oligo（dT）引物（CDSⅢ/3′PCR引物）合成第一链cDNA,SMARTⅣTM寡核苷酸作为mRNA5′端延伸出去的模板,采用LD-PCR合成双链cDNA,经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切及过柱分级分离后,与λTriplE×2载体连接经噬菌体包装后转导大肠杆菌,构建全长cDNA文库。结果原始菌丝相白念珠菌cDNA噬菌体表达文库滴度为1.87×10^7PFU/mL,重组率达100%,库容量9.35×10^6;文库扩增后,滴度达5×10^9PFU/mL,插入cDNA长度多在0.4-2.5kb,平均长度在1.5kb左右。文库的代表性和重组片段的序列完整性均达建库要求。结论成功构建了菌丝相白念珠菌cDNA噬菌体表达文库,为进一步筛选和克隆白念珠菌芽管特异性抗原表达基因及致病性相关基因奠定了基础。

白念珠菌芽管特异性抗原快速检测方法的建立和初步评价

目的建立白念珠菌芽管特异性抗原快速检测系统，探讨其特异性和敏感性。方法以单克隆抗体McAb03．2C1-C2作为一抗，辣根过氧化物酶标记McAb03．2C1-C2为二抗，建立双抗体夹心ELISA实验方法并检测6只动物模型和5例系统性白念珠菌感染患者的血清标本。结果筛选出McAb03．2C1-C2最佳稀释度和检测包被抗原浓度分别为l：4000和1．25-40μg,／ml；双抗体夹心ELISA检测动物模型的特异性和敏感性分别为95％、92％，其对阳性临床标本的检测结果与常规鉴定方法一致。结论初步建立白念珠菌芽管特异性抗原的双抗体ELISA快速检测系统，动物模型实验证实该系统有较好的特异性和敏感性。