基于Nrf2-HO-1/GPX4信号轴探讨中药靛玉红衍生物E804抑制肺癌A549细胞增殖和迁移的作用机制

目的 探讨中药靛玉红衍生物E804对非小细胞肺癌(NSCLC)系A549细胞增殖和迁移的影响,并阐明Nrf2-HO-1/GPX4信号轴可能的作用机制。方法 以肺癌A549细胞为细胞模型。采用MTT和细胞划痕实验观察0、10μmol/L E804和10μmol/L E804+不同特异性抑制剂(Nec-1、CQ、Z-VAD、DFO、Fer-1和Lip-1)组细胞的增殖和迁移能力;采用DCFH-DA荧光探针法检测0、2.5、5和10μmol/LE804组细胞内活性氧(ROS)含量,比色法检测二价铁离子(Fe^(2+))含量,分光光度法检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量,微量法检测丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测0、2.5、5和10μmol/L E804组细胞SLC7A11、Transferrin、GPX4、SLC40A1、Nrf2和HO-1蛋白表达水平。结果 与对照组(0μmol/LE804)比较,2.5、5和10μmol/L E804升高细胞内ROS、Fe^(2+)和MDA水平,降低细胞内GSH含量(P<0.01),同时降低SLC7A11、GPX4、SLC40A1、Nrf2和HO-1蛋白表达水平(P<0.01),升高Transferrin表达水平(P<0.05)。与单独使用10μmol/LE804组比较,细胞凋亡抑制剂(Z-VAD)组和细胞铁死亡抑制剂(DFO、Fer-1和Lip-1)组能够部分逆转E804对A549细胞的增殖和迁移抑制(P<0.01)。结论 E804可抑制A549细胞增殖和迁移,并诱发铁死亡,其机制可能与抑制Nrf2-HO-1/GPX4信号轴有关。

脊髓自噬在电针减轻大鼠神经病理性疼痛中的作用

目的探讨脊髓自噬在电针减轻大鼠神经病理性疼痛(Neuropathic pain,NP)中的作用。方法选择健康成年雄性SD大鼠60只,体重280~350 g,使用随机数字表法,将60只大鼠随机均分为5组(n=12):假手术组(S组)、神经病理性疼痛模型组(NP组)、电针组(EA组)、三甲基腺嘌呤组(MA组)和电针+三甲基腺嘌呤组(EM组)。NP组、EA组、MA组和EM组进行脊神经结扎术(Spinal nerve ligation,SNL)制备神经病理性疼痛大鼠模型,S组仅予以暴露脊神经但不结扎。EA组于NP建模7 d后开始给予电针刺激,每次持续30 min,每天1次,连续7 d;MA组于NP建模当天至NP建模后7 d每天鞘内给予10μL三甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA),连续给药7 d;EM组于建模当天至建模后7 d每天鞘内给予10μL三甲基腺嘌呤,连续给药7 d,同时在连续给药7 d结束后予以电针刺激,每天1次,每次持续30 min,连续7 d;S组和NP组鞘内给予等剂量的二甲亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO),但不予以电针刺激。于NP建模前1 d(T0)和NP建模后1、3、7、10、14 d(T1~T5)分别测定大鼠疼痛行为学指标机械缩足反射阈值(Mechanical withdrwal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(Thermal withdrawal latency,TWL);并在SNL术后14 d进行行为学测试后处死大鼠,取脊髓L4~L6段,通过电镜观察分析各组大鼠脊髓背角自噬小体的形态和数量;使用Western blot检测大鼠脊髓组织LC3Ⅱ、Beclin 1及p62蛋白表达水平;采集尾静脉血样,使用Elisa法测定血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的浓度。结果与S组比较,NP组大鼠建模3 d后MWT降低,TWL缩短,脊髓组织LC3Ⅱ及Beclin 1蛋白表达水平上调,p62表达水平下调,自噬小体数量增加,血清IL-6和TNF-α浓度均升高(P<0.05);与NP组比较,EA组大鼠建模3 d后MWT升高,TWL延长,脊髓组织LC3Ⅱ及Beclin 1蛋白表达水平上调,p62蛋白表达水平下调,自噬小体数量增多,血清IL-6和TNF-α浓度均降低(P<0.05);与EA组比较,EM组大鼠建模3 d后MWT降低,TWL缩短,脊髓组织LC3Ⅱ及Beclin 1蛋白表达水平下调,p62表达水平上调,自噬小体数量减少,血清IL-6和TNF-α浓度均升高(P<0.05)。结论电针可减轻大鼠NP,其机制与诱导脊髓自噬和抑制炎性反应有关。

九江地区手足口病病原学特点及临床特征

目的分析手足口病病原学变化及其相应临床特点,指导重症手足口病防治。方法采用回顾性分析方法,对2011-2013年收治的手足口病病例病原学结果及临床转归等进行分析。结果病原学结果显示,EV71感染人数及比例呈下降趋势,CoxA16型和其他肠道病毒感染的比例和人数均有升高。但重症病例当中,其病原学检查主要为肠道病毒EV71型,占77.09%,其次为CoxA16型,占15.51%,其他型别肠道病毒感染占7.40%。在临床特征方面,患者年龄在4个月~11岁之间,1~5岁患儿占发病人数的94.5%。城郊及农村病例多于市区,占61.5%。临床普通病例主要表现为手、足、口皮疹,占87.29%,发热占73.31%,心肌酶升高占78.54%;重症、危重症病例主要表现为神经系统、循环系统并发症,该类病例多在1~3岁,常伴有外周血白细胞、中性粒细胞增高等现象。结论儿童为手足口病高发人群,城郊及农村仍是该病防治的重点;重症、危重症病例多见于EV71感染。

基于胸痛中心建设构建急性ST段抬高型心肌梗死患者多学科随访体系及应用

目的探讨基于胸痛中心建设构建急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者多学科随访体系及应用效果。方法回顾性分析2020年10月至2021年12月九江学院附属医院胸痛中心STEMI介入术后90例患者的临床资料,按照随访方法不同将其分为对照组与观察组,每组45例。对照组实施常规随访,观察组实施多学科随访,两组患者均随访1年。比较两组患者的生存率、药物不良反应发生率、心血管不良事件发生率、心理状态、健康行为能力及生活质量。结果两组患者随访过程中均未出现死亡情况,生存率为100%。观察组药物不良反应总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组心血管不良事件总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组随访6、12个月焦虑抑郁评分表(HADS)评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者随访6、12个月HADS评分均低于本组随访1个月,两组患者随访12个月HADS评分低于本组随访6个月,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组随访6、12个月健康行为能力量表(SRAHP)各维度评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者随访6、12个月SRAHP量表各维度评分均低于本组随访1个月,两组患者随访12个月SRAHP量表各维度评分低于本组随访6个月,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组随访6、12个月健康调查简表(SF-36)评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者随访6、12个月SF-36评分均低于本组随访1个月,两组患者随访12个月SF-36评分低于本组随访6个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于胸痛中心建设构建STEMI患者多学科随访体系及应用的效果较好,减少药物不良反应及心血管不良事件的发生,改善患者心理状态、健康行为能力,提升生活质量。

miR-543调控ATG-7影响肝癌细胞HepG2凋亡

目的探讨microRNA-543(miR-543)通过调控其靶基因自噬相关基因7(ATG-7)对肝癌细胞凋亡的影响。方法通过荧光定量PCR及western blot实验观察多株肝癌细胞株里miR-543和ATG-7的表达情况;选取与人源胚胎肾细胞(293T)相比ATG-7高表达的HepG2肝癌细胞分组,瞬时转染miR-543摸拟物和miR-543抑制剂,在HepG2细胞中使用Western blot方法检测ATG-7蛋白表达变化,再使用qRT-PCR检测miR-543和ATG-7的mRNA水平;经过microRNA数据库预测miR-543与ATG-7的结合区域,构建ATG-73’UTR野生型及突变型的荧光素酶质粒和miR-543质粒后,通过荧光素酶报告基因实验观察野生型及突变型的荧光素酶活性变化;用流式细胞仪检测转染miR-543模拟物和ATG-7质粒的HepG2细胞凋亡情况。结果多株肝癌细胞株中ATG-7蛋白水平表达情况不一,ATG-7的mRNA和miR-543表达水平呈负相关;选用ATG-7相对高表达的HepG2细胞,过表达miR-543后发现miR-543 mRNA升高后,ATG-7蛋白和mRNA水平随之降低;降低miR-543,ATG-7蛋白和mRNA水平随之升高;通过荧光素酶报告基因证实miR-543结合ATG-7 mRNA 3’UTR区域的特定序列来降低ATG-7的mRNA水平;通过细胞凋亡实验证实miR-543通过下调ATG-7抑制肝癌细胞凋亡。结论在肝癌细胞中miR-543下调ATG-7抑制肝癌细胞的凋亡。

内科胸腔镜在老年胸腔积液患者68例中的应用

目的探讨内科胸腔镜在诊断老年不明原因胸腔积液中的价值和安全性研究,对老年不明胸腔积液患者最终病因进行分析。方法采用德国STORZ内科电子胸腔镜对68例老年不明原因胸腔积液患者进行胸腔镜检查,术中对可疑病变部位进行直视下多点活检,明确胸腔积液成因,观察术中术后患者病情变化。结果 68例不明原因胸腔积液患者中病理确诊63例,诊断阳性率92.6%,其中结核病26例(38.2%);恶性肿瘤31例(45.6%);慢性脓胸3例(4.4%),曲霉菌感染1例(1.5%),活检组织中可见大量曲霉菌菌丝。非特异性炎性改变7例(10.3%),其中2例最终诊断肺血吸虫病伴胸腔积液,另5例原因不明。所有病例均未发生严重并发症。结论老年不明原因胸腔积液患者经内科胸腔镜检查诊断阳性率高、安全、微创、有效,可作为临床常规诊断手段进行推广。老年不明原因胸腔积液患者其首要病因是恶性肿瘤,次要病因为结核。

嗓音主客观分析在嗓音疾病诊断中的应用

目的探讨嗓音主客观分析在嗓音疾病诊断中的应用。方法利用计算机嗓音声学分析系统及电声门图仪同步检测50例正常受试者、139例嗓音疾病患者(包括声带息肉73例、声带小结14例、慢性声带炎31例、声带囊肿10例、声带任克水肿11例)的嗓音声学分析与电声门图的参数值,并采用声音嘶哑评估标准GRBAS系统中的总嘶哑度G对所有受试者进行主观听感知评估。结果嗓音疾病组基频微扰(jitter)、振幅微扰(shim-mer)、标准化噪声能量(NNE)均较正常对照组增大,谐噪比(HNR)及信噪比(SNR)均较正常对照组减小,差异均有统计学意义(P<0.01);随主观听感知评估嗓音总嘶哑度加重,基频微扰、振幅微扰及NNE值逐渐增大,HNR和SNR值逐渐减少。结论嗓音客观分析参数与主观听感知评估具有一致性,客观评估能反映主观听觉印象。

阴道超声宫腔造影联合宫腔镜诊断子宫腔内疾病的价值

目的探讨阴道超声宫腔造影联合宫腔镜诊断和治疗子宫腔内病变的价值。方法对83例阴道不规则出血的患者常规经阴道超声(TVUS)检查,发现异常者进行阴道超声宫腔造影(SHG)及宫腔镜检查,在宫腔镜下取组织活检并送病理检查,以病理检查结果为诊断标准,将阴道超声造影与宫腔镜两种检查结果相比较。结果宫腔镜对子宫内膜息肉的诊断正确符合率为96.2%,明显高于阴道超声造影(72.0%)。宫腔镜对子宫黏膜下肌瘤的诊断正确符合率为90.0%,明显高于阴道超声造影(60.0%),在统计学上差异有显著性(P<0.05),对于诊断子宫内膜增生,这两种方法的诊断正确符合率无显著性差异(P>0.05)。结论阴道超声造影是一种操作简单易行,患者无痛苦,易接受的检查方法 ,而联合宫腔镜诊断效果明确,且克服以往手术的盲目性,两者联合应用产生较好的互补效应,优于单一检查,是准确诊断子宫腔内病变的一种可行性方法 。

急性脑梗死患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原与脂蛋白(a)水平检测及其意义

目的分析急性脑梗死患者血浆D一二聚体(D-D),纤维蛋白原(Fg)及脂蛋白(a)(LP(a))的水平变化,探讨三者在急性脑梗死临床诊断及治疗中的价值。方法急性脑梗死患者72例(56.3±5.9岁)和对照组30例(58.2±5.8岁)进行血浆D-D、Fg及Lp(a)的联合检测并进行统计学分析。结果患者血浆D-D,Fg及LP(a)含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血浆D-D、Fg及Lp(a)水平越高,梗死面积越大,病情越严重。结论血浆D-D、Fg及Lp(a)检测对急性脑梗死的诊断和治疗具有参考价值。

弓形虫疫苗研究的现状与展望

本文对弓形虫疫苗的种类及其研究现状进行了综述,并展望了弓形虫疫苗的研究前景。

腹部严重多发伤64例的救治体会

目的研究腹部严重多发伤的早期救治方法。方法总结64例腹部严重多发伤的临床救治,并进行分析。结果57例治愈,生存率89.1%;死亡7例,病死率10.9%。死亡原因腹腔大出血4例,严重感染致多器官功能衰竭3例。结论腹部严重多发伤,伤情复杂,危急,不是单个损伤的相加,并发症常可致命,注意早期全面诊疗,尽早行确定性手术治疗。休克的抢救及腹腔大出血的处理,术后并发症早诊治,是提高救治的关键。

急性左心衰竭的诊治进展

急性左心衰竭是由于急性心脏病变引起左心射血功能急速下降，导致肺循环压力急剧升高，出现以急性肺水肿为特征的病理生理综合征，发病急而重，及时、正确的诊断和治疗非常重要。近年来，急性左心衰竭的临床诊断方法和治疗手段取得了很大进展，本文对急性左心衰竭的诊断模式和治疗方法予以综述。

患者数据移动均值法在血液流变学检测室内质控中的应用

血液流变学检测对预防和早期发现、早期治疗心脑血管疾病等方面具有十分重要的意义，其在临床上的应用已日益广泛。目前血液粘度测定的室内质控物为仪器生产厂家提供的专用质控油．仅能对全血粘度的高切粘（200s。）和低切粘度（ls^-1）进行室内质控．而对全血中切粘度和血浆粘度测定的质控不能进行．从而难免会有测定结果出现较大误差而不能及时发现的问题．影响临床诊疗。为解决这一问题，我室将移动均值法运用于血液流变仪的室内质控，

血管紧张素Ⅱ和高糖环境对大鼠肾小球系膜细胞Toll样受体4信号通路及炎性因子表达的影响

目的探讨高糖条件下肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)及其信号通路中下游因子MyD88、核因子-κB(NF-κB)以及炎性因子的表达变化,论证高糖环境下血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与TLR4的对话关系,以期阐明TLR4信号通路在糖尿病肾病(DN)发病机制中的作用。方法设计3对针对大鼠TLR4基因的特异性siRNA片段以及带有绿色荧光的阴性对照,筛选出转染效率最高的siRNA,用于后续实验。第1部分实验在高糖的基础上分别加入AngⅡ、TLR4siRNA、血管紧张素Ⅱ受体阻断剂(ARB)、阴性对照siRNA,探讨高糖对各组细胞TLR4、MyD88及NF-κB表达的影响;第2部分实验在AngⅡ的基础上分别加入高糖、TLR4siRNA、ARB、阴性对照siRNA,探讨AngⅡ对各组细胞TLR4,MyD88及NF-κB表达的影响。采用荧光定量PCR检测各组TLR4、MyD88 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、MyD88及NF-κB蛋白表达水平的变化,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达情况。结果高糖及AngⅡ都可以上调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88mRNA的表达水平(均P<0.05),也可上调IL-6及MCP-1的表达(均P<0.01)且二者协同刺激情况下上调更明显。siRNA干扰及ARB可下调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88 mRNA的表达,下调IL-6及MCP-1的表达,与高糖及AngⅡ组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。结论高糖环境和AngⅡ刺激系膜细胞TLR4/MyD88信号通路激活,特异性TLR4siRNA基因可以部分阻断由高糖及AngⅡ诱导的TLR4信号的激活,厄贝沙坦也可部分阻断TLR4信号通路,高糖和AngⅡ共刺激增强由TLR4介导的天然免疫炎症效应,TLR4/MyD88信号通路在此效应中扮演重要角色;TLR4siRNA基因沉默技术为寻找DN的治疗方法提供了新思路,也为临床上使用ARB延缓DN进程提供了新的理论依据。

尿动力学检查在女性膀胱过度活动症中的临床应用

目的探讨尿动力学检查在女性膀胱过度活动症中的临床价值。方法回顾分析176例临床诊断为膀胱过度活动症女性患者行尿动力学检查的资料。结果膀胱过度活动症患者尿流率检查曲线不稳定,充盈性膀胱测压可见膀胱压力波动不稳定,部分患者可见急迫性尿失禁。结论尿动力学检查可为膀胱过度活动症诊断提供客观资料。

自拟抗弓形虫汤对小鼠急性弓形虫感染的治疗机制研究

目的观察自拟抗弓形虫汤对急性弓形虫感染小鼠的治疗作用及其作用机理。方法将昆明雌性小鼠随机分三组(A中药抗弓形虫汤组、B复方SMZ组、C模型组),将弓形虫RH株速殖子感染小鼠,2h后灌胃给药,A组给予中药配伍0.5ml(18mg/ml),B组给予0.5ml复方SMZ悬浊液(12mg/ml),治疗组疗程14d,观察至30d,记录小鼠存亡情况;肝组织病理切片采用HE染色;在感染后第3d、6d和第20d用羟胺法分别检测各组小鼠的血清、心、肝和肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果A(16.55d)、B(23.20d)组小鼠存活时间均较C(7.85d)组差异有极显著性(P<0.01),其中,A组与B组比较,差异有显著性(P<0.05);病理检查A组及B组有不同程度肝细胞肿大、炎症细胞浸润等病变,但与C组相比损伤程度明显减轻,差异有极显著性意义(P<0.01),A组与B组比较,差异有显著性(P<0.05);A、B组小鼠各部位SOD活性较C组差异有极显著性(P<0.01),但A组与B组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论自拟抗弓形虫汤有显著的抗弓形虫作用,它从推迟小鼠死亡时间,保护肝细胞,增强抗氧化损伤等方面发挥重要作用。

miRNA-140-5p在人骨髓间充质干细胞成脂分化中的表达及其靶基因的预测

目的筛选出人骨髓间充质干细胞(h MSCs)成脂分化中具有潜在价值的mi RNA及其靶基因,为人类成骨细胞与脂肪细胞分化平衡调控机制的深入研究提供有力实验依据。方法收集h MSCs成脂分化过程中的0、7、14、21 d的细胞样品,应用mi RNA芯片和转录组测序(m RNA-seq)技术,分析4个点细胞中mi RNA和m RNA的表达水平,并将mi RNA与m RNA的表达趋势进行关联分析,聚焦具有研究价值的mi RNA与m RNA相互调控关系,同时,采用Target Scan、Pic Tar和mi Randa等数据库进行靶基因的预测。结果发现mi R-140-5p在成脂分化中表达量呈逐渐下降的趋势,而白血病抑制因子受体(LIFR)表达量呈逐渐升高趋势,二者呈现负调控的对应关系。同时经3个靶基因数据库预测,LIFR为mi R-140-5p共有的靶基因。结论 mi RNA-140-5p可能与人骨髓间充质干细胞的成脂分化密切相关,且通过调控其靶基因LIFR的表达而参与成脂分化。