途径工程改造谷氨酸棒杆菌产莽草酸

莽草酸是一种芳香族中间代谢产物,也是合成抗禽流感药物磷酸奥司他韦的前体。目前,国内外莽草酸的生产主要依靠成本较高,周期较长的植物提取法。微生物发酵法合成莽草酸具有生产成本低、周期短等优势成为研究的热点。为了构建产莽草酸的重组谷氨酸棒杆菌,此次研究从基因组水平上对谷氨酸棒杆菌体内的莽草酸代谢途径进行代谢工程改造。通过阻断莽草酸分解代谢途径、解除反馈抑制以及阻断竞争性代谢途径的策略,实现了莽草酸产量的大幅提升。结果显示,所构建的重组谷氨酸棒杆菌SKA06经72 h摇瓶发酵,莽草酸产量达到7.61 g/L,相较出发菌种提升了68倍。并且,基于染色体工程的遗传改造策略克服了引入质粒带来传代不稳定、需要添加抗生素等问题,可以为莽草酸工程菌种的选育提供重要参考。

1种复合腐秆菌剂保质期的研究

将自主筛选的6株快速腐秆菌配制成复合腐秆菌剂,并对其保质期进行研究。结果表明：保藏第180天,细菌和真菌有效活菌数分别为6.62×10^8 CFU/g和1.83×10^8 CFU/g,pH范围稳定在6.0-7.0,含水率逐渐减小,第120天低于20%并趋于稳定,纤维素酶活力总体上降低,180 d的酶活为50.16μg/g。研究发现自制复合腐秆菌剂达到了国标农用微生物菌剂的要求,且保质期时长大于180 d。

松乳菇液态发酵培养基研究

选用松柏外生菌根真菌松乳菇(Lactarius deliciosus)为对象,研究该菌最适碳源、氮源、无机盐、生长因子及培养基优化。结果表明:松乳菇的最适碳源为蔗糖,菌丝干重为0.49 g;最优氮源为蛋白胨,菌丝干重为0.68 g;MgSO_4、维生素B_1对菌丝生长的促进作用最为明显,其菌丝干重分别为0.42 g、0.48 g。二次正交旋转设计试验得出该菌最适培养基配方为蔗糖37.42 g/L、蛋白胨3.13 g/L,MgSO_4 0.1 g/L,VB1 25 mg/L,pH为7。

复合腐秆菌剂对稻草腐熟过程的影响

为了研究复合腐秆菌剂对稻草好氧堆肥的影响,采用好氧堆肥技术,设计了不接菌(对照)和接种复合菌剂2个处理,探讨堆肥过程中堆体温度、pH、有机质、C/N、发芽指数的变化。结果表明,接种复合腐秆菌剂堆体初期温度上升迅速,最高温度达到60℃,高温发酵阶段维持了12 d;与对照相比,接种复合腐秆菌剂对pH值、容重与孔隙度、有机质、C/N变化影响不大;但增加堆体全氮的含量,提高堆肥产品的质量,种子发芽率在第20天迅速上升,最大值为93%。显然接种复合腐秆菌剂促进好氧堆肥迅速起温,提高了堆肥的腐熟质量。