江西梅岭高校园区大型真菌多样性研究

为开发梅岭地区大型真菌资源,研究梅岭高校园区大型真菌资源多样性,采用孢子弹射分离法和组织分离法分离菌种,按Ainsworh分类系统进行分类。共采集到野生大型真菌标本115个,整理鉴定出77种大型真菌,隶属于担子菌亚门层菌纲和腹菌纲,共5目22科44属,其中食用菌31种,木腐菌16种,药用菌9种,毒菌17种和菌根菌4种,发现江西省新记录9种;不同植物群落中大型真菌的物种多样性有所差异,优势类群为口蘑科和多孔菌科;获得52种大型真菌的纯培养物,初步建立了一个校园大型真菌的菌种库。

茶皂素的提取纯化及其单当归酰基茶皂苷元的制取

榨取茶油后的茶籽饼粕含有丰富的茶皂素。为了精确定位茶皂素的生物活性及其构效关系,设计合成多样性药物分子,分离茶皂素单体和制取明确结构的苷元成为必要。本试验采用水浴提取,树脂吸附及沉析获得茶皂素;通过酸水解、溶剂萃取、柱层析和高效液相色谱等方法制备其茶皂苷元,色谱和波谱定性定量。结果显示,茶饼中茶皂素的水提取条件为:料液比1∶25(m/V)、80℃水浴,提取2 h,3次。纯化条件为:茶皂素水提取液过AB-8型树脂,依次用水、稀碱、水和90%乙醇洗脱,醇洗脱液冰浴沉析3 h,离心获得茶皂素,纯度达96%。然后将其进行盐酸水解,条件为:3 mol/L盐酸60%甲醇水溶液,料液比1∶15(m/V),85℃回流水解5 h;再进行乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析,收集石油醚-乙酸乙酯洗脱液,液相制备,获得2种茶皂素苷元,波谱数据并与文献比对,确定其结构为:21-当归酰基-22-乙酰茶皂苷元Ⅰ和Ⅱ,两者仅有C4位甲基和醛基差别。

木荷皂苷对稻瘟病病原细胞的致毒作用

为了探索木荷皂苷抗稻瘟病菌的作用方式,通过显微观察、血球计数板计数、活体侵染等方法,测定木荷5种皂苷对稻瘟病菌孢子和附着胞的致毒作用。结果显示,木荷皂苷对稻瘟病菌孢子及附着胞的抑制作用均强于阳性对照稻瘟灵,R2-A、R2-1、R2-2、R2-3、R3-4、稻瘟灵对稻瘟病病菌的孢子萌发抑制EC50分别为2.73、2.27、0.61、0.95、4.68、13.94μg/m L;在浓度为10μg/m L时,它们对孢子产附着胞的抑制率分别为78.68%、93.27%、97.23%、91.93%、36.34%、9.11%;抑制稻瘟病病菌附着胞产黑色素的MIC分别为7.0、6.0、4.0、6.5、17.0、18.0μg/m L。受处理的稻瘟病病菌孢子侵染活体水稻叶片能力会不同程度下降,同时抑制附着胞黑色素的积聚成为空胞,难以形成高压渗透钉,阻断了稻瘟病病菌的侵染传播。研究表明,木荷皂苷抗稻瘟病病菌对稻瘟病病原不同类型细胞不具选择性,除了作用于菌丝细胞膜外,还可通过抑制孢子萌发、附着胞黑色素积累等方式产生作用;R2-1、R2-2、R2-3是木荷抗稻瘟病病菌的主要活性先导物。

一株祼脚菇属菌株产抗菌活性物的基础液体培养碳、氮源等优化及其对柑橘青绿霉菌的作用

江西是柑橘类水果的主要产区之一,青绿霉菌是导致柑橘采后腐烂的主要病害,化学杀菌剂可产生病原抗药性和残留,一株具有拮抗此病菌的祼脚菇属菌株0612-9被发现。为了探索其产活性物质的代谢培养和活性作用,采用菌丝生长速率法和显微观察法测定了其抗菌活性,单因素试验、Plackett-Burman、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验响应面设计等优化出液体培养基组成和培养条件。结果显示:液体培养基组成和培养条件为:马铃薯279.94g/L,葡萄糖30g/L,麸皮8.87g/L,MgSO_4·7H_2O 0.47g/L,KH_2PO_42g/L,发酵周期10d,接种量5 ml/100 ml,转速180r/min,摇床温度26℃,装液量100ml/250ml,发酵液抗病菌活性从42.26%提高到55.77%。对意大利青霉和指状青霉的EC_(50)分别为69.25g/L和56.70g/L,最小杀菌浓度250μg/ml低于阳性对照物抑霉唑的500μg/ml,并且对病原菌菌丝体有一定的毒害作用。该祼脚属菌株有潜在开发成柑橘采后保鲜剂的价值。