糖尿病肾病患者泌尿系统肠球菌多重耐药菌株感染状况和耐药性分析

目的：为了了解糖尿病肾病患者泌尿系统肠球菌感染状况和耐药情况,为临床治疗及防治糖尿病肾病泌尿系统肠球菌感染提供最新参考依据.方法：收集我院2009年-2013年糖尿病肾病患者泌尿系统感染中段尿培养出的肠球菌菌株并分析其耐药性.结果：中段尿培养检出120株肠球菌,粪肠球菌和屎肠球菌检出为主,分别66株（55.0%）、44株（36.7%）,从高到低依次为鸟肠球菌、母鸡肠球菌、铅黄肠球菌.粪肠球菌和屎肠球菌是糖尿病肾病患者泌尿系统感染肠球菌最常见的菌种.120株肠球菌中MDR菌株83株（69.2%）,其中氨基糖苷类高度耐药菌株HLAR多重耐药株64株（53.3%）,1株耐万古霉素VRE菌株.药敏表明：万古霉素和替卡拉宁的敏感度最高.粪肠球菌对氨苄西林、青霉素和呋喃妥因的敏感度较高;而屎肠球菌刚相反敏感率较低.结论：糖尿病肾病患者肠球菌MDR菌株感染严重,多重耐药对临床治疗带来不利,临床应注重病原菌的检测,根据药敏结果合理选择药物,延缓和控制耐药菌的产生.

姜黄素联合全反式维甲酸诱导耐药的急性早幼粒细胞白血病细胞分化的实验研究

本研究旨在探讨姜黄素联合全反式维甲酸(ATRA)对耐药的急性早幼粒细胞白血病细胞分化的影响及其分子机制。以耐药的NB4-R1细胞为实验对象,对细胞进行计数和细胞形态学观察,应用流式细胞术(FCM)检测姜黄素单用或联合ATRA对NB4-R1细胞增殖、分化的影响;用Western blot检测AKT磷酸化在细胞分化中的变化。结果显示,全反式维甲酸对NB4-R1细胞增殖无影响,但可增强姜黄素对NB4-R1生长的抑制作用。单用姜黄素或全反式维甲酸对细胞分化无影响,姜黄素联合全反式维甲酸可明显诱导细胞CD11b表达,细胞在形态上呈明显分化特征。全反式维甲酸可在短时间内促进NB4细胞AKT第473苏氨酸磷酸化,而对NB4-R1细胞中的AKT磷酸化影响不大。姜黄素可以促进NB4-R1细胞AKT磷酸化,而联合全反式维甲酸可进一步增强AKT磷酸化。结论:PI3K/AKT通路失活可能是导致APL细胞耐药的因素之一,而姜黄素通过活化PI3K/AKT信号通路逆转APL耐药,促进NB4-R1细胞分化。

一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立

本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。