小儿热性惊厥T淋巴细胞及红细胞免疫功能的研究

目的 探讨热性惊厥患儿外周血T淋巴细胞和红细胞免疫功能的变化。方法 对 82例热性惊厥患儿、4 0例上呼吸道感染患儿及 4 0例正常小儿进行有关免疫检测。用微量全血氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法 ,测T 淋巴细胞增殖反应 ;用McAb APAAP法测T淋巴细胞亚群的分布和CD2 5抗原、HLA DR抗原表达 ;用生物素 亲和素双抗夹心酶联免疫吸附测定法 ,测γ 干扰素 (γ IFN)水平 ;用酵母花环实验 ,测红细胞免疫粘附功能。结果单纯型热性惊厥的每分钟脉冲数 (CPM)及刺激指数 (SI)分别为 5 60 9.4± 3 5 87.4 ,2 0 .5± 15 .6;复杂型的CPM及SI分别为 2 817.3± 2 4 2 2 .8,11.0± 8.4 0 ,均分别显著低于正常对照组 ( 2 0 3 0 5 .9± 12 810 .3 ,69.2± 4 5 .2 )及上感组 ( 9785 .2± 75 0 9.8,4 4 .5± 3 9.8) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。单纯型的CD3 ,CD4及CD4 /CD8分别为 ( 4 0 .0±8.2 ) % ,( 2 6.1± 9.0 ) % ,1.1± 0 .4 ;复杂型则分别为 ( 3 2 .8± 6.9) % ,( 17.8± 4 .9) % ,0 .8± 0 .1,均分别低于正常对照组 [( 64.1± 6.7) % ,( 4 7.7± 5 .5 ) % ,1.9± 0 .8]及上感组 [( 63 .0± 9.3 ) % ,( 4 2 .4± 8.2 ) % ,1.6± 0 .4 ],差异有显著性 (P <0 .0 1)。CD2 5抗原及HLA DR抗原表达结果 。

热性惊厥患儿细胞免疫功能的变化

探讨热性惊厥发病与细胞免疫功能的关系。方法应用微量全血氚标记胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）掺入法及碱性磷酸酶抗磷酸酶桥联酶标染色技术（即APAAP法）检测60例热性惊厥（单纯型、复杂型各30例）及35例正常儿童的T淋巴细胞增殖功能及T淋巴细胞亚群。结果患儿外周血T淋巴细胞增殖功能明显降低，CPM和SI均显著低于正常组，CD3、CD4、CD4／CD8比值亦均明显低于正常组。T淋巴细胞增殖反应水平下降与T淋巴亚群的CD4／CD8比值下降至正相关。结论热性惊厥患儿细胞免疫状态存在着数量及功能的异常改变，并以复杂性热性惊厥变化更为显著。

体液免疫抗白念珠菌感染的研究

探讨抗白念珠菌IgY及其免疫血清对多种动物模型感染白念珠菌的保护作用。制备烧伤继发感染白念珠菌大鼠、白念珠菌性阴道炎小鼠及免疫功能低下小鼠多种动物感染模型 ,分别应用抗白念珠菌IgY、鼠免疫血清和生理盐水对照 ,观察比较各自的作用。抗白念珠菌IgY对烧伤继发感染白念珠菌大鼠及白念珠菌性阴道炎小鼠均有明显的保护作用 ;鼠免疫血清则对阻止远程靶器官的白念珠菌扩散有较好的作用。体液免疫成份抗白念珠菌IgY及其免疫血清对烧伤继发感染白念珠菌大鼠、白念珠菌性阴道炎小鼠及免疫功能低下小鼠均有良好的保护作用。

金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响

目的探讨金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响。方法测定腹腔巨噬细胞的吞噬功能,红细胞C3b受体花环结合率,MTT比色法测定T淋巴细胞增殖反应。结果4～8g/(kg·d)金边瑞香能提高T淋巴细胞增殖刺激指数、腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,1～16g/(kg·d)金边瑞香能提高红细胞C3b受体花环结合率。结论金边瑞香对小鼠的细胞免疫、非特异性免疫、红细胞免疫功能有促进作用。

稀土暴露对人体免疫功能的影响

目的 探讨稀土暴露对人体免疫系统功能的影响。方法 运用电感藕合等离子体 质谱法对 10 2例稀土暴露区居民和 5 8例对照区居民 (均为成人 )血稀土含量进行测定 ,并分别用流式细胞术和免疫比浊法对研究对象的细胞免疫和体液免疫功能进行测定。结果 稀土暴露组血稀土含量明显高于对照组 ;稀土暴露组细胞免疫和体液免疫功能发生明显变化 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。多元逐步回归分析表明血稀土总含量是导致上述免疫学指标发生变化的重要因素之一。结论 稀土暴露对人体细胞免疫功能和体液免疫功能均有一定的影响作用 。

金边瑞香浸膏对小鼠免疫功能影响的量效关系

目的:通过检测小鼠灌服具有抗炎症、抑菌、抗脂质过氧化和抗衰老等作用的中药金边瑞香后的非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫功能的变化情况,观察不同剂量金边瑞香对小鼠免疫功能的影响及其量效关系。方法:实验于2004-03/2004-06在江西医学院免疫学教研室完成。选用昆明小鼠60只,随机分为生理盐水对照组和1,2,4,8,16g/(kg·d)金边瑞香浸膏实验组共6组,每组10只,分别灌胃0.02mL/g相应不同剂量药物或生理盐水,连续14d。每鼠腹腔注射10mL/L鸡红细胞悬液1mL,1h后麻醉下颈椎脱臼处死小鼠。取腹腔洗液0.5mL滴片,37℃温育30min,甲醇固定,瑞氏染液染色。计数100个巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数和吞噬的鸡红细胞总数,计算吞噬百分率和吞噬指数。取胸腺和脾脏称重,并计算胸腺指数和脾脏指数。四甲基偶氮唑蓝比色法测定小鼠脾脏T淋巴细胞对ConA诱导的增殖反应,免疫比浊法测定血清免疫球蛋白的含量。对比各组小鼠的胸腺指数和脾脏指数、刺激指数、吞噬百分率和吞噬指数、血清IgG、IgM、IgA的含量,分析不同剂量金边瑞香对小鼠免疫功能的影响及其量效关系。结果:纳入小鼠60只,最终进入结果分析60只,无脱失值。①金边瑞香1,2,4,8,16g/(kg·d)剂量组的胸腺指数、脾脏指数和血清IgG,IgM,IgA含量与对照组相比差异无显著性(F=1.217,0.840,1.085,1.156,0.363,P>0.05)。②金边瑞香4,8g/(kg·d)剂量组T淋巴细胞增殖刺激指数明显高于对照组(1.55±0.19,1.48±0.09,1.22±0.06,F=6.674,P<0.01)。③金边瑞香4,8g/(kg·d)剂量组的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数明显高于对照组及1,2,16g/(kg·d)剂量组犤(29.13±14.03)%,(40.68±9.70)%,(12.72±2.61)%,(15.37±4.36)%,(15.18±4.22)%,(20.66±7.19)%,F=14.344,P<0.01;1.62±0.24,1.69±0.18,1.35±0.18,1.38±0.19,1.29±0.14,1.43±0.13,F=6.511,P<0.01犦。结论:金边瑞香具有一定的免疫调节作用。1,2,4,8,16g/(kg·d)剂量金边瑞香浸膏对小鼠的非特异免疫、细胞免疫功能有明显的增强作用,8g/(kg·d)剂量金边瑞香对小鼠的免疫功能增强作用最为有效。

热性惊厥患儿T淋巴细胞和红细胞免疫功能的实验研究

目的 探讨小儿热性惊厥的Ｔ 淋巴细胞和红细胞免疫功能变化。方法 对７２ 例热性惊厥患儿及３５ 例健康儿童应用微量全血氚标记胸腺嘧啶核苷（３Ｈ —Ｔｄ Ｒ） 掺入法作Ｔ 细胞增殖实验，用酵母花环实验测红细胞免疫粘附功能。结果 热性惊厥患儿外周血Ｔ 细胞增殖反应水平明显降低，以复杂性热性惊厥患儿尤为明显，ＣＰＭ 和ＳＩ 均显著低于健康对照组（ Ｐ＜ ０ ．００１） ； 热性惊厥患儿红细胞Ｃ３ｂ 受体花形成率（ ＲＢＣ －Ｃ３ｂＲＲ） 明显较健康组为低（ Ｐ＜ ０ ．０５） ，但红细胞免疫复合物花环形成率（ ＲＢＣ—ＩＣＲ） 则无明显差异。结论 提示热性惊厥患儿在惊厥发作时存在Ｔ 淋巴细胞和红细胞免疫功能低下。

尖锐湿疣患者体液免疫研究

目的 :对人乳头瘤病毒 (HPV)感染所致尖锐湿疣患者的免疫状态进行研究 ,探讨机体体液免疫应答与人乳头瘤病毒 (HPV)感染之间的相关关系。方法 :尖锐湿疣 (CA)患者组 3 0例 ,经HPV6、11型PCR检测均为阳性 ,组织病理学诊断结果也均为尖锐湿疣患者 ,另选择 3 0例正常健康者作为对照组。采用全自动生化分析仪对 3 0例CA患者和 3 0例对照组受试者的免疫球蛋白A、G、M以及补体C3、C4进行了检测。结果 :CA患者的免疫球蛋白A、M、G( 1.62± 0 .3 6g/l、1.2 4± 0 .3 2g/l、8.67± 0 .86g/l)和补体C3、C4 ( 1.4 5± 0 .2 7g/l、0 .2 6± 0 .14g/l)与正常对照组相比有升高趋势 ,但只有免疫球蛋白G(P <0 .0 5 )有显著性。结论 :HPV感染对尖锐湿疣患者体液免疫产生影响 ,导致免疫球蛋白G的升高 。

白念珠菌免疫显性抗原的分离纯化及鉴定

目的 :纯化和鉴定白念珠菌免疫显性抗原。方法 :用凝胶过滤法分离纯化白念珠菌免疫显性抗原 ,用酶联免疫法和免疫印迹法鉴定抗原性。结果 :获得的两种白念珠菌免疫显性抗原达到电泳纯 :p38蛋白和 p2 8蛋白。经SDS PAGE测定其分子量分别为 38.1 kDa和 2 8.1 kDa ,Lowry法测定其含量分别为 0 .5 82mg/ml和 1.34 5mg/ml。酶联免疫法和免疫印迹法显示p38和 p2 8都能和小鼠抗白念珠菌血清反应。结论 :初步证实 p38和p2 8为白念珠菌免疫显性抗原 ,初步建立了分离纯化白念珠菌免疫显性抗原的基本方法。

复发性口疮患者免疫功能的研究

目的 探讨复发性口疮（RAU）患者的细胞及体液免疫功能的变化。 方法 对门诊确诊的复发性口疮患者98例及健康成人对照31例，采用微量全血3H－TdR掺入法检测T淋巴细胞增殖功能；酵母菌花环法检测红细胞免疫粘附功能；采用单向免疫扩散法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA及补体C3、C4含量。 结果 复发性口疮患者外周血T淋巴细胞增殖功能较健康成人有显著降低（刺激指数（SI） P＜0．001）；患者红细胞C3b受体花环形成率（RBC－C3bRR）、红细胞免疫复合物花环形成率（RBC－ICR）较健康成人均无明显差异；患者血清中C3含量较健康成人无明显差异，而C4（P＜0．01）及IgG（P＜0．001）、IgM (P＜0．01)、IgA (P＜0．05)含量则明显升高。 结论 复发性口疮患者血清中C4含量明显增加，体液免疫功能异常升高，而T淋巴细胞免疫功能低下，提示复发性口疮的发生可能与机体免疫功能异常有关。

中华硬蜱叮咬105kDa纯化抗原免疫接种宿主后中肠组织化学变化的动态观察

目的 观察中华硬蜱叮咬 10 5kDa纯化抗原免疫接种宿主后 ,其中肠组织化学变化。方法 采用茚三酮法、PAS法、Feulgen法及图像分析仪 ,对中华硬蜱叮咬不同免疫力宿主后中肠蛋白质、糖原及多糖定位和分布以及DNA的含量进行研究。结果 中华硬蜱叮咬 10 5kDa纯化抗原组宿主后 ,中肠上皮细胞蛋白质含量较对照组明显降低 ,但糖原及多糖含量与初次叮咬或佐剂对照组相比无显著性变化 ;随着叮咬时间的延长 ,纯化抗原组DNA含量明显低于对照组 ,且以 2～ 4倍体为主。结论 10 5kDa纯化抗原组诱导的抗蜱免疫作用可干扰中肠消化细胞蛋白质和核酸的合成 。

中华硬蜱叮咬105kD纯化抗原免疫接种宿主后其吸血、生殖能力变化的实验研究

目的 观察中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后的吸血、生殖能力变化。方法 选用中华硬蜱 10 5kD柱层析纯化抗原对新西兰兔进行常规免疫接种 (3次 )后 ,用中华硬蜱成虫感染 (叮咬 )新西兰兔 ,分别观察空白对照组、佐剂对照组、10 5kD纯化抗原组中华硬蜱雌性成虫的吸血、生殖情况。结果 中华硬蜱 10 5kD纯化抗原可诱导新西兰兔产生显著的抗蜱免疫力 ,使其吸血、生殖能力显著降低 ,其中吸血量较空白叮咬对照组分别下降 6 7 9%、6 5 9% ,产卵量分别下降 74 6 %、73 7% ,并且中华硬蜱吸血时间延长 ,产卵量指数降低。而中华硬蜱叮咬佐剂免疫接种组兔后 ,其吸血、生殖能力较空白对照组相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 中华硬蜱 10

可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)在紫癜性肾炎发病中的作用探讨

目的:探讨血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)在过敏性紫癜性肾炎(HSPN)发病中的作用,并观察其与白介素-6(IL-6)、免疫球蛋白E(IgE)在HSPN发病中的关系。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测27例过敏性紫癜、35例紫癜性肾炎患儿(其中急性期16例,恢复期10例)及20例健康对照儿童的血清sVCAM-1、IL-6、IgE水平。结果:①紫癜性肾炎组较单纯过敏性紫癜组、正常对照组血清sVCAM-1均明显升高,且急性期高于恢复期及正常对照组,差异均有显著性意义(P均<0.001),肾炎组、单纯组分别与对照组比较,血清IL-6、IgE水平升高,差异有显著性意义(P<0.01),恢复期较正常对照组血清sVCAM-1、IL-6水平无很大变化,差异无显著性意义(P均>0.05)。②紫癜性肾炎组、单纯过敏性紫癜组sVCAM-1水平随血清IL-6、IgE水平升高而增加(相关系数分别为0.35、0.38,P均<0.01)。结论:sVCAM-1参与了过敏性紫癜、紫癜性肾炎的发病过程,且可反映其病情程度。

屋尘螨变应原Der p 1基因原核表达产物的纯化及特性鉴定

目的建立屋尘螨主要变应原Derp1蛋白原核表达产物的纯化方法,获得理想的表达产物并鉴定其免疫原性。方法大量诱导表达含pET24a-Derp1质粒的BL21工程菌,表达产物以重组蛋白包涵体的形式存在,包涵体经洗涤与溶解后,使用结合6组氨酸的镍柱进行亲和层析纯化蛋白质,用稀释复性方法进行重组蛋白的复性,再用屋尘螨过敏性哮喘患者阳性血清经Dot-ELISA方法分析Derp1纯化蛋白的抗原活性。结果分步洗涤可有效去除重组蛋白包涵体沉淀中混杂的多数杂蛋白成分,亲和层析分离可获得高纯度重组变应原Derp1蛋白。Dot-ELISA法检测结果表明经复性并纯化的Derp1蛋白呈强阳性反应,最佳血清稀释度为1∶64,而重组蛋白与正常人血清呈阴性反应。结论纯化后的融合蛋白Derp1具有较高的纯度及较强的免疫活性,可望作为有效的屋尘螨变应原诊断试剂和疫苗的候选分子。

IgY联合乳酸杆菌防治阴道白色念珠菌感染的实验研究

目的:观察特异性抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌的体内外生物学效应,探讨将二者复合应用的可能性。方法:分离人阴道上皮细胞,用抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌对阴道上皮细胞预处理后进行白色念珠菌黏附抑制试验;建立小鼠白色念珠菌性阴道炎模型,通过阴道局部给抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌来观察其疗效。结果:抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌均能抑制白色念珠菌黏附阴道上皮细胞,并能减少白色念珠菌在小鼠阴道内的定植和减轻小鼠阴道局部的炎症反应。结论:特异性抗白色念珠菌IgY具有良好的体内外生物学效应且优于单独使用乳酸杆菌,二者复合应用效果最佳。

抗白色念珠菌IgY的稳定性及体内抗感染活性研究

目的观察抗白色念珠菌IgY的稳定性及体内抗感染活性.方法水稀释法从免疫鸡卵黄提取抗白色念珠菌IgY,酶联免疫吸附试验间接法和微量间接血凝试验测定其抗体效价,并观察其对热、酸碱度、胰蛋白酶及冻存时间的稳定性和对小鼠腹腔感染白色念珠菌的保护效果.结果水稀释法提取的抗白色念珠菌IgY效价为1:5 120;IgY在25～70℃处理15 min,pH3.0～11.0、37℃处理2 h,或普通冰箱冻存6年效价改变不明显;在37℃下与胰蛋白酶作用2 h效价仍保持50%.IgY对免疫功能低下小鼠腹腔感染白色念珠菌有明显的保护作用(P＜0.01).结论抗白色念珠菌IgY具有良好的稳定性和较好的体内抗感染活性.

抗白念珠菌IgY对白念珠菌性阴道炎小鼠的保护作用

目的 研究抗白念珠菌IgY对阴道感染白念珠菌小鼠的保护作用。 方法 用环磷酰胺造成BALb/C小鼠免疫功能低下 ,经阴道感染白念珠菌 ,用IgY治疗 ,2天后取阴道冲洗液进行细菌学培养 ,计算菌落数 (CFU )。 结果 感染标准菌株实验组菌落数的几何均数为 0 .5 85 3,对照组为 2 .110 0 ;感染临 1菌株实验组菌落数的几何均数为 0 .5 2 2 7,对照组为1.9131;两两比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 抗白念珠菌IgY对免疫功能低下鼠阴道感染白念珠菌有明显的保护作用。