蔓三七叶中分离绿原酸和异绿原酸及其抗氧化活性研究

以蔓三七叶为原料,制备其中的绿原酸和异绿原酸A、B和C,并对它们进行结构鉴定;同时,采用DPPH法、水杨酸比色法、邻苯三酚自氧化法来对其进行体外抗氧化活性研究。结果表明,分离制备的绿原酸和异绿原酸A、B和C质量分数分别为96. 8%、98. 2%、97. 6%和98. 7%。在0. 5～10μg/mL范围内,绿原酸和异绿原酸A、B和C对DPPH和羟基自由基表现出了较好的清除作用,随浓度升高而逐渐增大;但它们对超氧自由基的清除作用时,浓度从5μg/mL升高到100μg/mL时,清除作用都未出现明显的剂量依赖性,各样品与阳性对照组(VC)相比较而言,其清除超氧自由基的作用明显较弱。本文揭示了蔓三七叶中的绿原酸和异绿原酸A、B和C具有不同的抗氧化效果。

蔓三七叶多糖的理化性质及免疫调节活性研究

以蔓三七叶为实验材料,采用水提醇沉法获得蔓三七叶多糖(GPLP),测定了其总糖、糖醛酸、硫酸根以及蛋白质的含量和单糖组成,并对其抗氧化活性和免疫调节活性进行了研究。采用苯酚-硫酸法测定总糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,BaCl2-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分和红外光谱测定多糖的结构。通过总抗氧化能力、DPPH自由基、OH自由基的清除能力评价GPLP的体外抗氧化能力,并探讨其对脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7巨噬细胞免疫调节活性。结果表明,所得GPLP的得率为15.56%,粗多糖中的总糖含量为52.32±1.56 g/100 g;单糖组成为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为1.39:8.70:3.17:1。体外抗氧化实验结果表明GPLP的总抗氧化能力、DPPH和OH自由基清除效果明显。GPLP可显著提高RAW 264.7细胞内一氧化氮(NO)的浓度,在给药浓度为25.0μg/mL时,NO的分泌量达到最大,为31.24±2.30μM。GPLP可以提高免疫力,在功能食品的开发中,可以作为一个潜在的免疫调节剂。

蔓三七叶黄酮提取工艺优化及其体外抗氧化活性研究

研究动态超高压微射流技术对蔓三七叶黄酮得率的影响。以单因素实验为基础,选取乙醇浓度、提取温度、提取时间、动态超高压微射流均质压力为主要因素进行研究,通过响应面优化分析,优化蔓三七叶黄酮的提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行评价。结果表明,最佳提取工艺条件为:乙醇浓度68.0%、提取时间68 min和均质压力80 MPa,在此条件下黄酮得率为2.08%。在质量浓度0.2~1.0 mg/mL范围内,蔓三七叶黄酮体外抗氧化活性呈现出量效关系趋势。在浓度为0.8 mg/mL时,蔓三七叶黄酮的总抗氧化能力值为(11.25±0.45)U/mL,为同等浓度下抗坏血酸的总抗氧化能力[(13.56±0.50)U/mL]的90%以上,各浓度蔓三七叶黄酮对DPPH·和·OH清除能力均有较强的清除能力,是一种良好的天然抗氧化剂。

动态超高压微射流技术对蔓三七叶中黄酮的提取研究

研究动态超高压微射流技术对蔓三七叶中黄酮得率的影响。以单因素实验为基础,选取乙醇浓度、提取温度、提取时间、动态超高压微射流均质压力为主要因素,通过正交实验法优化蔓三七叶中黄酮的提取工艺。经正交实验法优化后,蔓三七叶中黄酮提取的工艺条件为乙醇浓度80%、提取温度65℃、提取时间2.0 h、微射流均质压力80 MPa、微射流均质次数2次、液料比15:1(m L:g)、提取次数2次。此时,蔓三七叶黄酮的得率为1.95%。

大孔树脂-结晶法精制蔓三七叶黄酮的集成技术研究

以蔓三七叶为原料,采用大孔吸附树脂对蔓三七叶黄酮进行初步精制,并探讨了大孔树脂对蔓三七叶黄酮的静态吸附率、吸附流速和洗脱剂浓度对吸附的影响,得到较为合适的工艺:以306型大孔树脂为蔓三七叶黄酮的吸附树脂,吸附流速2 mL/min;吸附完毕后用70%的乙醇洗脱,洗脱率在90.86%以上,得到含量为66.6%蔓三七叶黄酮。上述较纯产品再采用多次重结晶技术对其进一步纯化,蔓三七叶黄酮产品得率随重结晶次数的增加而减少,但其含量随重结晶次数的增加而增加,第4次重结晶后,蔓三七叶黄酮产品含量为91.8%。

蔓三七根精油的萃取及GC-MS分析

以新鲜的蔓三七根为原料,采用同时蒸馏萃取(SDE)提取蔓三七根精油并采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析精油的化学组分。结果表明,SDE法萃取蔓三七根精油的最佳工艺条件为切碎程度8目、液料比9∶1和蒸馏时间2.0h,在此条件下,蔓三七根精油得率为0.71%。蔓三七根精油精油中共鉴定出20种化合物,总含量为91.70%,主要由烯烃类(85.81%)、醇类(5.89%)等化合物组成。其中,含量最高的化合物是α-蒎烯(29.72%),其次是左旋-β-蒎烯(21.89%)和β-水芹烯(5.46%)等。