人脑胶质瘤中miR-106b^25基因簇表达的研究

目的:检测胶质瘤细胞系及组织中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93、miR-25的表达情况。方法:运用实时定量PCR的方法检测不同人脑胶质母细胞瘤细胞系及不同病理级别胶质瘤标本中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93和miR-25的表达水平。原位杂交技术检测含不同病理级别及瘤旁正常脑组织的胶质瘤组织芯片中miR-106b^25基因簇成员的表达情况,进而分析该簇miRNAs的表达与胶质瘤病理级别的相关性。结果:以正常脑组织表达量为基准,3种miRNA在所有检测细胞系中均有增高的趋势。收集43例胶质瘤标本中,RT-PCR结果显示,随着肿瘤病理级别的升高,3种miRNA在各组中的平均表达量也逐步升高。其中,miR-106b(F=4.479,P=0.018)和miR-93(F=3.493,P=0.040)各组间的表达差异均有统计学意义。而miR-25表达无明显的统计学差异(F=2.766,P=0.075)。原位杂交结果显示3种miRNA的表达在高级别胶质瘤中的表达量明显高于低级别肿瘤。Spearman等级相关分析表明3种miRNA的表达信号强度分布均与胶质瘤的WHO病理分级呈正相关,在miR-106b、-93、-25中的相关系数分别为rs=0.617(P<0.001)、rs=0.438(P<0.001)、rs=0.463(P<0.001)。结论:miR-106b^25在胶质瘤中表达呈不同程度增高,并与肿瘤分级呈正相关。

血管内皮生长因子及其特异性受体蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其特异性受体（KDR）蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系。方法采用免疫组织化学S-ABC法和RT-PCR检测58例人垂体腺瘤中的VEGF及KDR蛋白和mRNA的表达，并对血管进行染色及计数。将肿瘤的侵袭程度分为0、1、2、3级，分别为5例、14例、20例和19例。结果VEGF阳性蛋白主要位于胞浆，血管内皮很少表达，KDR蛋白主要表达在垂体腺瘤微血管内皮细胞胞浆中。随侵袭性程度的增加，VEGF和KDR蛋白、mRNA的表达相应增加，1级与0级、3级与2级比较P〈0．01，但1级与2级比较，P〉0．05。以VEGF和KDR表达的中位数为界分成高、低表达组，VEGF和KDR高表达组中的微血管密度明显高于低表达组（P〈0．01）。结论VEGF以旁分泌、自分泌形式，通过KDR协同促进垂体腺瘤血管的生成，并与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。

探析集束化护理在重症颅脑损伤患者中的临床运用效果

目的:对集束化护理措施在重症颅脑损伤患者中的运用情况加以探析。方法选取2015年2月~2016年2月我院所接收的64例重症颅脑损伤患者作为研究对象,按就诊前后顺序分成常规组与研究组,前者予以常规护理,在此基础之上,对后者予以集束化护理。结果研究组患者的不良反应发生率、住院时间以及满意度均优于常规组,差异有统计学意义(<0.05)。结论对重症颅脑损伤患者采取集束化护理,效果显著,可降低不良反应的发生,提高护理满意度。

血管内皮细胞通过Notch信号通路对胶质瘤细胞侵袭性生长的影响

目的探讨血管内皮细胞对胶质瘤细胞侵袭力的影响及其与Notch信号通路之间的关系。方法在体外采用Transwell共培养系统将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和U87胶质瘤细胞进行间接共培养;抑制剂DAPT(N-[N-(3,5-di-fl uorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butylester)抑制Notch信号通路;Transwell小室快速检测各组U87细胞的侵袭力;Real-time PCR检测各组U87细胞中Notch1、Notch2、Hes1、Delta样配体4(Dll4)、Cathepsins B、MMP-9、MMP-2 m RNA的表达情况;Western blot检测各组U87细胞中MMP-9、MMP-2蛋白、Cathepsins B的表达情况。结果共培养组较单纯组U87细胞生长旺盛,DAPT处理后生长受抑制;共培养组穿过Matrigel膜的U87细胞数目明显多于单纯组,DAPT处理组较共培养组穿膜细胞数目减少。共培养组U87细胞的Notch1、Notch2、Hes1、Dll4、Cathepsins B、MMP-9 m RNA的表达及各组U87胶质瘤细胞中MMP-9、Cathepsins B蛋白的表达水平明显升高,DAPT处理组较共培养组相关的m RNA和蛋白水平降低。结论血管内皮细胞可以通过Notch信号通路增强U87胶质瘤细胞的侵袭力,DAPT抑制Notch信号通路可以降低血管内皮细胞对U87胶质瘤细胞侵袭力的增强效果,Notch信号通路在血管内皮细胞对U87胶质瘤细胞的侵袭力的增强过程中起重要的调控作用。

致癌基因CUG2的研究进展

CUG2蛋白,又称着丝粒蛋白W,是一种近期发现的核蛋白,研究发现CUG2为细胞分裂、细胞凋亡等过程所必需,在许多癌组织中都存在高表达,如结肠直肠癌及胃癌,被预测是一种致癌基因。它位于核仁上或者着丝粒上,能和着丝粒蛋白T相互结合,共同参与着丝粒染色质结构的形成。现概要介绍CUG2基因的发现、结构特点、生物学功能及其与肿瘤之间关系的最新进展。

反义抑制miR-106b表达对人脑胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨抑制miR-106b过表达对人脑胶质瘤细胞株增殖和侵袭的影响.方法 培养人脑U251、LN229及TJ905胶质瘤细胞,并将其分为细胞对照组,转染阴性对照组（简称阴性对照组）,转染miR-106b inhibitors组（简称106b inh组）.将反义miR-106b用脂质体转染于人脑胶质瘤细胞中,抑制miR-106b的表达.采用实时定量PCR法检测转染后胶质瘤细胞miR-106b的表达,流式细胞术检测细胞周期的变化、噻唑兰比色分析法检测细胞增殖能力、软琼脂克隆形成实验评价细胞非锚定依赖性生长能力及Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 与细胞对照组,阴性对照组比较,（1） 106b inh组3种胶质瘤细胞中miR-106b的表达均被明显抑制;细胞周期进展被抑制,S期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例增加,其中U251、TJ905细胞的周期时相分布差异有统计学意义（P值均＜0.05）,LN229细胞的周期时相分布差异无统计学意义;（2） 106b inh组转染抑制后48 h,3种胶质瘤细胞的增殖能力均明显减弱,P＜ 0.05;（3）细胞的克隆形成能力也被明显抑制[克隆形成率分别为,U251：（10.6±0.9）％、（10.5±1.2）％对比（3.3±0.4）％;LN229：（12.5±1.7）％、（11.0±2.4）％对比（4.1±0.3）％;TJ905：（9.9±1.2）％、（10.2±0.6）％对比（3.5±0.4）％.P值均＜0.01];（4）穿过Transwell小室的细胞数明显降低[U251：（90.6±5.7）、（85.2±6.1）个对比（27.6±4.0）个;LN229：（22.6±3.7）、（21.2±3.7）个对比（2.4±1.5）个;TJ905：（79.4±4.4）、（76.8±5.9）个对比（11.8±3.2）个.P值均＜0.0l].结论 下调miR-106b的表达可抑制胶质瘤细胞的增殖、生长和侵袭能力.