青皮的炮制历史沿革、效应物质及古今临方配伍研究进展

青皮为我国传统中药材,炮制历史悠久,方法多样。但随着历史的演变,一些独具特色的炮制方法逐渐消失,我们对青皮不同炮制品种的认识和传承有待加强。同时,各地对不同品种的制法各异,差别较大。而其加工炮制、质量控制、临床使用都不可避免地会受到这些问题的影响和制约。因此,本文通过对青皮炮制历史沿革、现代炮制规范的详细梳理,并综合药理作用的研究进展,强化对青皮及其炮制品优势特色的认识,寻找目前研究与开发的不足之处,为今后优化青皮炮制工艺和建立质量标准控制体系提供参考。此外,从中药功效和临床应用的角度进一步挖掘青皮及其炮制品在复方配伍方面的特点与规律,促进对现代药理活性及潜在机制的阐述,也为现代配伍研究提供依据。

阴虚火旺证抑郁症模型的建立与评价

目的:通过社交隔离法结合行为学、宏观表征、客观病理指标以及方剂反证法建立并评价小鼠阴虚火旺证抑郁症模型。方法:采用5周的社交隔离法建立小鼠抑郁症模型,通过宏观表征、舌爪红色度r值、颈动脉血管及血清甲状腺素含量进行证候判别,同时予以滋水清肝饮反证病证结合模型的可靠性。结果:与空白组比较,造模后模型小鼠出现精神倦怠、反应迟缓、有攻击行为、形体消瘦、毛发散乱等表现,模型组小鼠蔗糖偏好率、进入旷场中心次数及时间均显著降低(P<0.05),悬尾不动时间增加(P<0.01),抑郁症模型构建成功;同时,模型组小鼠进食量及饮水量均显著增加(P<0.01,P<0.05);舌r值、前后爪r值显著升高(P<0.05,P<0.01),颈动脉舒张期和收缩期血管径均显著降低(P<0.01,P<0.05),心率显著升高(P<0.05),且伴有血中甲状腺素含量增加(P<0.01)。而滋水清肝饮较模型组有显著的治疗调节作用(P<0.01,P<0.05)。结论:持续5周的社交隔离法造模可成功制备阴虚火旺证抑郁症小鼠模型。

基于UHPLC-QE-MS及网络药理学探讨固本化湿降脂汤调控肥胖大鼠进食机制

目的探讨固本化湿降脂汤(由参苓白术散化裁)对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠进食机制的影响。方法采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(UHPLC-QE-MS)联用技术确定固本化湿降脂汤的入血成分;利用相关数据库查询入血成分的作用靶点;借助metascape数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及基因本体(GO)功能分析。建立脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠模型;模型复制成功后,连续灌胃给药4周,并观察大鼠体质量、Lee’s指数的变化;采用免疫印迹法检测大鼠下丘脑中阿黑皮素原(POMC)、刺鼠相关蛋白(AgRP)两个蛋白的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清大鼠瘦素(Leptin,LEP)、大鼠脂肪素(Apelin)、大鼠脂联素(ADP)和大鼠游离脂肪酸(FFA)水平,以及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)的表达。结果鉴定出31个固本化湿降脂汤的入血成分,获得591个预测靶点,核心靶点是IL6、EGFR、ESR1,涉及AGE-RAGE、HIF-1、乙型肝炎、细胞凋亡等信号通路。体内实验:与模型组比较,固本化湿降脂汤组大鼠下丘脑中POMC抑制食欲蛋白表达升高(P<0.001),AgRP促食欲蛋白表达降低(P<0.05);血清中ADP含量有所升高(P<0.01),LEP、Apelin、FFA含量不同程度降低(P<0.05,P<0.01);炎症因子含量都有所降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论固本化湿降脂汤可通过肠-脑轴来影响脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠进食机制,发挥其治疗作用。

黄芩-黄连抗神经炎症的配伍优势及其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的潜在靶点

目的:探索黄芩-黄连防治神经炎症的配伍优势,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路,阐明黄芩-黄连配伍优势的作用特点及机制。方法:选取体外具有代表性的小鼠小胶质细胞(BV2),将BV2分为8组,分别为正常组、模型组、黄芩-黄连组、吡拉西坦组、黄芩组、黄连组;利用细菌脂多糖(LPS)建立BV2细胞炎症模型,通过细胞增殖活性检测(CCK-8)试剂盒检测细胞活性;明场下观察细胞形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫荧光法测定药物对BV2细胞促炎因子产生及释放的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达;细胞免疫荧光检测NF-κB p65核转位情况;通过TLR4信号转导抑制剂CLI-095、NF-κB阻断剂PDTC进行黄芩-黄连抗神经炎症作用靶点的确认。结果:与正常组比较,LPS诱导的模型组细胞大多处于激活状态,培养液及细胞内的IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著升高(P<0.01),TLR4、MyD88、NF-κB p50及NF-κB p65的mRNA表达显著升高(P<0.01),NF-κB p65的入核现象明显;与模型组比较,黄芩-黄连、吡拉西坦组预处理后,BV2细胞形态大部分恢复,IL-6、TNF-α、IL-1β水平均显著降低(P<0.01),TLR4、MyD88、NF-κB p50及NF-κB p65 mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),NF-κB p65大多存在于细胞质中;黄芩组、黄连组与模型组比较,细胞形态略有恢复,促炎因子水平及TLR4、MyD88、NF-κB p50、NF-κB p65 mRNA表达量有所降低;与黄芩-黄连组比较,黄芩组、黄连组的促炎因子抑制作用效果显著低于药对组;与模型组比较,应用信号通路特异抑制剂“黄芩-黄连+CLI-095”组、“黄芩-黄连+PDTC”组,能够明显降低TLR4、MyD88、NF-κB p50及NF-κB p65的mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并明显抑制NF-κB p65转入细胞核内。结论:黄芩与黄连相须配伍后的抗神经炎症作用明显优于单味黄芩或黄连;该药对的抗神经炎症优势与抑制小胶质细胞中的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活密切相关;通过验证说明TLR4、MyD88、NF-κB为黄芩-黄连发挥药对配伍优势的潜在靶点。