小鼠外胎盘锥次级滋养层巨细胞的分离、培养与鉴定

目的:建立小鼠外胎盘锥次级滋养层巨细胞的分离、培养方法。方法:在小鼠妊娠第8 d,通过机械分离和组织块翻转干涸法分离、培养小鼠外胎盘锥次级滋养层巨细胞;免疫细胞化学鉴定细胞来源与纯度;酶谱方法检测其所分泌基质金属蛋白酶2和9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2,9)结果:利用机械分离法分离外胎盘锥可生长于Matrigel包被的培养板上,并生长出次级滋养层巨细胞,表达特异性标志物Cytokeratin;体外培养24 h、48 h后,外胎盘锥滋养层巨细胞的粘附率分别为(83.3±9.1)%和(92.4±7.3)%;扩展率分别为(45.5±5.3)%和(56.4±6.8)%;及其所分泌的MMP-2,9的24 h光密度值分别为(87±4.7)和(351.5±25.2);48 h分别为(186±40.2)和(556.5±61.5)。结论:采用机械分离和组织块翻转干涸法,可简单、快捷地获得高纯度小鼠外胎盘锥次级滋养层巨细胞。