高糖抑制miR-126-5p促进肾小管上皮细胞损伤

目的探究糖尿病肾病(DN)疾病发展过程中的miRNA差异表达谱,并且进一步探讨miR-126-5p参与肾小管上皮细胞高糖诱导损伤的作用机制。方法首先,从基因表达综合数据库(GEO)中下载已有的芯片数据,依次使用GEO2R、miRanda、基因本体论(GO)分析以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析对差异miRNA进行数据挖掘。随后,采用高糖诱导HK-2细胞损伤模型,再分为3组:高糖模型组、si-HOTAIR组、si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组,对3组细胞依次转染siRNA-NC、siRNA-HOTAIR以及siRNA-HOTAIR+miR-126-5p mimic,并培养于含60 mmol/L葡萄糖的培养基中。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平变化,CCK-8检测细胞增殖变化。结果通过GEO进行数据挖掘分析发现,相较于普通小鼠,DN小鼠的肾脏组织中存在74个miRNA表达上调,80个miRNA表达下调,富集分析结果表明miRNA可以靶向Wnt、PKG、MAPK以及Rap1等信号通路,且miR-126-5p显著下调。高糖诱导HK-2细胞损伤模型中,实验结果表明,60 mmol/L高糖浓度下细胞增殖活性抑制效果较为显著(P<0.05);高糖刺激会显著降低miR-126-5p的表达(P<0.05)。流式细胞仪结果表明,与高糖模型组相比,si-HOTAIR组细胞凋亡率显著下降(P<0.05),而si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组细胞凋亡率显著上升(P<0.05)。CCK-8实验表明,与高糖模型组相比,si-HOTAIR组的细胞活力显著上升(P<0.05);而si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组细胞活力则被抑制(P<0.05)。结论miR-126-5p可以抑制高糖诱导HK-2细胞凋亡,保护HK-2细胞。