产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌的耐药机制及分子流行病学分析

目的研究产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌可能的耐药机制及分子流行病学。方法收集2016年6月-2017年12月南昌大学第一附属医院就诊患者分离的KP,同一患者重复分离的菌株只留取患者首次分离的菌株。菌株鉴定和药敏试验采VITEK-2生物分析仪自动鉴定。使用拉丝试验确定高黏液表型特征,使用纸片法试验确认ESBL表型。采用聚合酶链式反应(PCR)实验检测产ESBLs菌株中具有耐药基因blaTEM、blaSHV和blaCTX-M的菌株分布情况。通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及MLST分型,参考文献设计引物,采用聚合酶链式反应(PCR)及测序技术,采用BioNumerics软件对PFGE图像和MLST结果进行处理和分析。明确产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌分子流行病学。结果从临床分离的1263株肺炎克雷伯菌中筛出高毒力肺炎克雷伯菌株124株,其中K1荚膜血清型阳性85株,K2荚膜血清型阳性39株。在124株高毒力肺炎克雷伯菌中,表型试验显示45株为ESBL阳性hvKP菌株,79株为ESBL阴性hvKP菌株。耐药基因检测显示,22株携带blaTEM基因,13株携带blaSHV基因,10株携带有blaCTX-M基因。MLST分型结果显示,产ESBL酶hvKP菌株共45株,其中K1荚膜血清型阳性28株,K2荚膜血清型阳性17株。K1荚膜血清型阳性菌株均为ST23型,而17株K2型产ESBL酶hvKP菌株中10株为ST65型,5株ST86型,2株ST14型。而携带ESBL基因的产ESBL酶hvKP则主要为ST23型、ST65型。结论江西地区高毒力肺炎克雷伯菌中ESBL基因的主要型别为blaSHV-1、blaCTX-M-2和blaTEM-1,具有较严重的耐药性。ST分型上ST23型、ST65型占重要比例,PFGE带型表现出高度的同源性,体现出医院感染的预防措施及减少传播的体系至关重要。