LAMC3在肺腺癌中的表达及对细胞生物学行为的影响

目的:探讨层粘连蛋白亚基γ3(laminin subunit gamma 3,LAMC3)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的表达及对细胞生物学行为的影响。方法:通过在线生物信息学数据库GEPIA查询LAMC3在LUAD组织中的表达情况;收集2018年1月至2020年12月本院收治的行LUAD手术的48例LUAD患者的LUAD组织及癌旁组织,使用RT-qPCR检测了组织中LAMC3的mRNA表达水平,并分析LAMC3表达水平与LUAD患者临床病理特征的相关性。体外培养人LUAD细胞株(A549、H1299、PC-9)和人正常肺细胞株MRC-5,使用RT-qPCR和Western blot检测了细胞中LAMC3的mRNA和蛋白表达水平。将PC-9细胞分为5组:对照组(control组)、si-NC组、LAMC3沉默组、pcDNA3.1-NC组、LAMC3过表达组,采用小分子RNA干扰技术(siRNA)和pcDNA3.1质粒转染构建LAMC3沉默/过表达细胞,RT-qPCR和Western blot检测各组细胞中LAMC3的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell小室实验检测各组细胞的迁移、侵袭能力;Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin,VIM)、基质金属蛋白9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)]的表达。结果:LAMC3在LUAD组织和细胞中低表达,且LAMC3低表达与肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。沉默LAMC3后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及N-cadherin、VIM、MMP-9的表达升高,细胞凋亡率和E-cadherin的表达降低(P<0.05);过表达LAMC3后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),且LAMC3过表达后细胞中E-cadherin的表达升高,N-cadherin、VIM、MMP-9的表达降低(P<0.05)。结论:LAMC3在LUAD的发生发展中发挥着重要作用,过表达LAMC3可抑制LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制EMT有关。

生长抑素对大鼠不同肠段粘膜机械屏障损伤的保护作用

目的比较重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠末段回肠及右半结肠起始段粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白表达的差异和生长抑素对肠粘膜机械屏障的保护作用。方法Spraque-Daw-ley大鼠90只,随机分为3组,对照组、SAP组、治疗组。术后6、12、24 h分批处死大鼠,取末段回肠及右半结肠起始段,用原位末端标记技术、免疫组化技术,检测肠粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白的表达。结果(1)SAP组与对照组比较,肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达上调,细胞凋亡增加;治疗组和SAP组比较,肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达下调,细胞凋亡减弱;差异均有显著性。(2)SAP组中各时相点,结肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达及细胞凋亡较回肠更强,差异有显著性。(3)各组各时相点bcl-2蛋白表达受抑制。结论SAP大鼠结肠粘膜机械屏障损伤较回肠更大;肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达的上调是其细胞凋亡增加的重要原因;早期用生长抑素能有效保护SAP大鼠肠粘膜机械屏障。

胆道术中大出血的原因及防治(附八例报告)

目的 探讨胆道手术中并发大出血的原因与防治措施。方法 对 1990～ 2 0 0 1年间本院 92 8例胆道手术中并发术中大出血的 8例临床资料进行回顾性分析。结果 胆囊动脉出血 3例 ,门静脉出血 1例 ,门静脉侧支出血 2例 ,胆管内出血 1例 ,肝破裂出血 1例。 8例中 ,7例术中止血成功 ,1例止血失败死亡 (死亡原因为门静脉大出血 )。结论 胆道手术富有危险性。凝血功能检测等术前准备应充分 ,手术操作应规范、谨慎。如遇术中意外大出血 ,关键是迅速控制肝蒂或用手指压迫出血部位暂时控制出血后 ,再在明视下辨清局部解剖 ,找到出血点 。