贻贝粘蛋白中多巴氧化还原状态表征方法研究

目的对高效液相色谱法表征贻贝粘蛋白中多巴氧化-还原状态可行性进行研究。方法用高效液相色谱法、Arnow法和考马斯亮兰法测定贻贝粘蛋白中多巴含量及蛋白质含量。结果随着氧化时间延长,贻贝粘蛋白样品中蛋白含量不变,还原态的多巴含量下降。加速氧化和自然存放样品的色谱峰保留时间均随着放置时间的延长发生偏移,与多巴的氧还还原状态变化有关。结论高效液相色谱法可以用来表征贻贝蛋白的氧化还原程度,对于产品设计研发与质量控制具有重要意义。

聚己内酰胺分离纯化缩宫素粗品研究

通过考察在不同乙腈浓度等度洗脱条件下,缩宫素在聚酰胺色谱柱上的保留,研究了聚酰胺对缩宫素的分离机理,建立并优化了聚酰胺对缩宫素粗品的粗分离方法,并与反相C18分离效果进行对比.缩宫素在聚酰胺色谱柱上的保留呈现典型的氢键吸附和疏水作用吸附共同作用的混合吸附模式;在优化的纯水等度洗脱分离缩宫素粗品的条件下,样品栽量可达9.38 mg/mL介质,纯度可达65.8%,回收率72.1%.研究结果表明,聚酰胺纯水等度洗脱分离缩宫素粗品有着与传统反相C18分离基本相当的效果,与反相C18相比还有着样品栽量高、经济、安全和环保等优点.

贻贝粘蛋白综述

对贻贝粘蛋白的组成、获取方法、粘附机制、性能以及应用现状进行了总结,并展望了贻贝粘蛋白在生物医学领域的应用前景。

贻贝黏蛋白在BALB/c小鼠中的免疫原性研究

目的:评估贻贝黏蛋白(MAP)注射入小鼠体内时的免疫原性,并为其临床应用提供安全性依据。方法:选择BALB/c小鼠72只,采用随机数表法将小鼠分为试验样品组(S组)、阴性对照组(N组)、阳性对照组(P组)、阳性抑制组(D组)、阳性促进组(P*组)及空白对照组(C组)6组,每组小鼠根据不同实验选取不同数量。通过免疫学实验评估MAP对小鼠免疫系统的影响,对T淋巴细胞转化功能、巨噬细胞吞噬功能、体液免疫应答、体重和脏器系数以及血液学和脾淋巴细胞总数对免疫器官组织学的影响进行评估。结果:注射高剂量MAP时,小鼠产生免疫应答;但S组与N组比较,临床等效剂量MAP产生的免疫原性未产生显著差别。S组与N组对淋巴细胞表面CD4、CD8和CD3、CD19标志的表达差异无统计学意义(t=0.171,t=0.995,t=0.240,t=0.163;P>0.05);MAP对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力无明显的促进或抑制作用,S组与N组之间的差异无统计学意义(t=1.14,P>0.05)。MAP对小鼠的体液免疫应答和免疫因子水平、小鼠的体重和免疫器官(胸腺和脾脏)和小鼠的白细胞计数未产生显著影响,且未表现出刺激小鼠脾淋巴细胞增长的迹象,S组脾淋巴细胞总数虽低于N组,但差异无统计学意义(t=1.85,P>0.05)。结论:临床等效剂量MAP对BALB/c小鼠的体液免疫和细胞免疫未产生影响,应用于小鼠时安全性良好。

贻贝粘蛋白纤维素敷料用于慢性溃疡临床观察

贻贝粘蛋白纤维素敷料是贻贝粘蛋白与纤维素通过共价交联形成的一种新型敷料,可用于促进创面的愈合。通过30例慢性难愈性创面或溃疡患者试用,贻贝粘蛋白纤维素敷料能有效促进溃疡、慢性难愈性创面的愈合,并且安全性好。

贻贝粘蛋白降解的关键酶

针对贻贝粘蛋白产品的应用范围,对于评分中的蛋白水解环境进行了文献调研,结果显示,丝氨酸蛋白酶是皮肤中主要的蛋白酶类,表明可以利用胰蛋白酶对于贻贝粘蛋白的降解特性进行研究,为贻贝粘蛋白产品开发和应用提供依据。

高效液相色谱法在贻贝黏蛋白检测中的应用

目的:建立高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)鉴别检测贻贝黏蛋白(Mussel Adhesive Protein,MAP)的方法。方法:采用Agilent Zobax SB 300A C8(4.6×250mm,5μm)色谱柱,流动相为0.1%三氟乙酸水溶液(A)和含0.1%三氟乙酸乙腈溶液(B)梯度洗脱,检测波长280nm,洗脱温度25℃,流量为0.9mL/min。进样量20μL。考察方法的系统适用性、线性、精密度、检测限及定量限。结果:贻贝黏蛋白供试样品与对照品的HPLC图谱一致。贻贝黏蛋白在0.01~9.79mg/mL范围内峰面积与其浓度呈良好的线性关系(r=1),峰面积及保留时间RSD均小于5%,最低定量限(LOQ)为0.03mg/mL,最低检出限(LOD)为0.01mg/mL。结论:该方法专属性强,稳定性好,简单易用,适用贻贝黏蛋白的检测。