促红细胞生成素酶联免疫吸附测定法的研究

目的:建立血清促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的酶联免疫检测(ELISA)方法,观察其临床应用价值。方法:制备EPO多克隆抗体,异丙醇洗涤处理酶标板以增强其吸附能力,利用交叉反应法选择出抗原、抗体及酶标抗体的最佳的配对工作浓度。反应后,观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标,观察效果。以正常血清为对照组,测定缺铁性贫血组、乳腺癌组,并与放射免疫检测对比。结果:酶标板结合蛋白能力增强。抗体、酶标抗体、抗原最佳工作浓度分别为1∶1000,1∶6000,1∶800。灵敏度为0.46U/L,与生长激素、铁蛋白交叉反应率低;高浓度、低浓度样品平均回收率分别为96.3%、97.3%,批内和批间变异分别为8.31%、7.82%,稳定性好。乳腺癌组、缺铁性贫血组EPO水平均明显高于正常对照组。放射免疫检测及酶联免疫检测检出结果差别无统计学意义。结论:本血清EPO双抗体夹心ELISA法的建立在诊断相关疾病方面有一定的临床应用价值。