2015东北心血管病论坛会议通知

尊敬的各位同道： ＂2015东北心血管病论坛＂将于2015年4月17-19日在沈阳市召开。会议由全军心血管内科专业委员会主办,沈阳军区总医院全军心血管病研究所承办,中华心血管病学会和中国心血管内科医师分会以及东北多家大型医院协办）。本次由百余名国内外著名心血管病专家出席的盛会,将结合行业热点设定以下分论坛：冠心病诊治论坛、心律失常诊治论坛、

心血管内科专业新进展及展望

目的对"十一五"期间国内外心血管内科领域的进展进行深入分析,为明确军队心血管内科专业今后的发展方向提供依据。方法检索近5年来国内外心血管内科专业文献,分析军队心血管内科专业在新药物新技术应用、临床诊断及治疗方法等方面取得的新进展。结果"十一五"期间军队心血管内科专业在基础、临床及应用研究方面均取得了快速发展,尤其在冠心病、心律失常、外周血管疾病介入诊断治疗以及高血压治疗等方面取得了令人瞩目的成绩。结论军队心血管内科专业目前总体发展水平居国内前列。"十二五"期间,应以心脏与血管系统军事医学救治以及冠心病、外周血管疾病、心律失常等军队指战员常见疾病的基础及临床研究为重点,形成平战结合、基础与临床研究并重、具有军队医院特色的优势心血管内科专业学科。

生物可降解涂层雷帕霉素洗脱支架治疗冠脉小血管病变的长期临床安全性与有效性:CREATE研究亚组分析

目的评估国产生物可降解涂层雷帕霉素洗脱支架(ExcelTM,山东吉威医疗制品有限公司)治疗冠状动脉小血管病变的长期临床安全性与有效性。方法 2006年6月至11月在4个国家的59个中心共有2077例接受单一Excel支架治疗的患者连续入选CREATE研究。以靶病变两端参考血管直径≤2.75 mm为小血管标准(有一支靶血管直径≤2.75 mm即为小血管病变患者),将患者分为小血管病变组(886例,42.7%)和非小血管病变组(1 191例,57.3%)。术后接受双联抗血小板药物(氯吡格雷和阿司匹林)治疗6个月,比较两组术后9个月定量冠状动脉造影(QCA)复查结果及18个月临床随访主要心脏不良事件(MACE)、心性死亡和血栓事件的发生率。结果与非小血管组相比,小血管组女性(29.0%vs 24.5%,P=0.022)、高血压(59.9%vs 52.6%,P=0.001)、既往有心肌梗死(14.0%vs.9.2%,P=0.001)的患者较多,平均年龄大[(61.9±10.6)岁vs.(59.6±11.4)岁,P<0.001],氯吡格雷用药时间两组无明显差别[(200.1±55.0)d vs(197.4±55.0)d,P=0.262]。小血管组患者病变较长[(23.23±14.14)mm vs(21.43±11.79)mm,P=0.039],人均支架植入数多[(2.23±1.33)枚vs(1.49±0.82)枚,P<0.001]。术后9个月QCA结果显示,小血管组和非小血管组支架内晚期管腔丢失[(0.20±0.38)mm vs(0.21±0.42)mm,P=0.654]和再狭窄率(3.9%vs3.4%,P=0.856)无显著差别。18个月临床随访结果表明,小血管组靶病变血运重建率(2.8%vs 1.2%,P=0.006)显著高于非小血管组,但两组MACE(3.9%vs 2.5%,P=0.086)、心性死亡(0.9%vs 1.3%,P=0.441)和支架内血栓(1.0%vs 0.8%,P=0.528)发生率均无显著差异。多因素Cox回归分析结果表明,小血管病变并非MACE的独立危险预测因素(OR 0.848,95%CI 0.482-1.491,P=0.567)。结论 Excel支架治疗冠状动脉小血管病变的长期疗效及安全性与非小血管病变相近,但还需随机对照临床研究证实。

高频电刀应用对心血管植入型电子器械囊袋血肿发生率的影响

目的：探讨心血管植入型电子器械（CIED）植入术中应用高频电刀能否降低CIED囊袋血肿的发生率。尤其是对于有需要接受抗凝和（或）抗血小板治疗（有出血倾向）的患者。

西洛他唑对冠状动脉小血管病变支架术后患者的长期疗效

目的:探讨西洛他唑对冠状动脉小血管病变普通金属支架置入术后再狭窄的防治作用及长期临床疗效的影响.方法:193例接受冠状动脉支架术的患者随机分两组,二联组(阿斯匹林+氯吡格雷)98例,三联组(阿斯匹林+氯吡格雷+西洛他唑)95例.两组均服用阿斯匹林300mg/d,1mo后改为100mg/d长期,以及氯吡格雷75mg/d,3mo;三联组术后加用西洛他唑200mg/d,6mo.患者于术后6mo行冠脉造影随访和1a临床随访.结果:二联组和三联组术后6mo造影再狭窄率分别为33%(17/52)和23%(12/53)(P>0.05).二组术后1a内因心、脑血管事件再住院率分别为26%和16%(P>0.05).两组均无严重出血等副作用,轻微出血亦无明显差异(2%vs5%,P>0.05).结论:两组造影再狭窄率及1a内因心、脑血管事件再住院率无明显差异,出血等副作用无明显差异.支架术后常规抗血小板治疗基础上合用西洛他唑有降低再狭窄率的趋势.

三联抗血小板药物对缺血性脑血管病患者冠状动脉介入治疗术后的近期疗效

目的探讨既往有缺血性脑血管事件发作史的冠心病患者行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后应用西洛他唑联合阿司匹林和氯吡格雷三联抗血小板治疗方案的近期疗效和安全性。方法回顾性分析有缺血性脑血管病史且接受PCI治疗的冠心病患者共216例,其中80例PCI后应用三联抗血小扳治疗(三联组),136例PCI后应用阿司匹林联合氯吡格雷两联抗血小板治疗(两联组)。观察两组PCI后30天主要不良心脑血管事件(MACCE)、亚急性血栓和出血发生率结果两组临床基线特征及PCI即刻结果无差异,术中均无死亡;三联组患者30天病死率、脑卒中发生率、MACCE发生率均显著低于两联组(P值分别<0．05,<0．05,<0．01)。两组亚急性血栓、30天主要出血事件、脑出血发生率差异均无显著性意义。结论有缺血性脑血管病史患者PCI后应用氯吡格雷、阿司匹林和西洛他唑三联抗血小板治疗后,可显著降低近期死亡、脑卒中及MACCE发生率,且不增加脑出血等副作用。

小鼠胚胎干细胞体外分化形成新生血管的实验研究

目的探讨小鼠胚胎干细胞(ES)在体外向内皮细胞(ECs)分化并形成新生血管的条件及特点。方法分别建立二维和三维小鼠ES细胞分化体系,对分化细胞行血小板内皮细胞粘附分子(PECAM-1)免疫荧光染色和DiI-乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)标记,观察ECs分化及血管形成特点。结果在二维分化体系,ES细胞在无外源性生长因子存在的条件下可自发向ECs分化,ECs主要定位在分化细胞密集处,分化表现为:ECs呈集落样生长,不形成网状结构;ECs互相连接形成网状结构,PECAM-1免疫荧光染色证实为ECs网。在三维的悬浮拟胚体培养体系,ECs的分化不依赖于外源性生长因子,分化表现为条索状结构、管腔样结构及排列紊乱的细胞团三种形式。对该拟胚体的冷冻切片进行的三维图像重构显示,拟胚体中有大量的血管网形成。在三维的Ⅰ型胶原培养体系中,ES形成的拟胚体表现为出芽式血管新生,这一过程依赖于外源性生长因子混合物。结论在二维和三维ES细胞分化体系中,ECs分化及新生血管形成过程与体内相似,表现为血管生成和血管新生两种形式,因此可作为研究血管发育机制的理想模型。

分泌型hCREG蛋白抑制人血管平滑肌细胞增殖的量效关系研究

目的:探讨hCREG表达与人血管平滑肌细胞增殖的量效关系。方法:构建强力霉素(Dox)调控表达的pRevTRE-hCREG重组载体;分别经G418及潮霉素筛选表达pRevTet-On、pRevTRE-hCREG的人血管平滑肌细胞株-HITASY细胞克隆;RT-PCR鉴定转染细胞克隆中抗性基因和插入基因的表达;Western blotting和免疫共沉淀检测不同浓度的强力霉素诱导后,HITASY细胞内及培养上清中hCREG的表达;流式细胞仪检测不同浓度的强力霉素诱导后,hCREG表达与细胞增殖的关系。结果:成功构建了强力霉素可调控表达的pRevTRE-hCREG重组载体;筛选出稳定表达双抗性基因的HITASY-hCREG细胞克隆;RT-PCR检测证实细胞克隆中G418及插入基因表达均为阳性;Western blotting及免疫共沉淀检测发现随强力霉素诱导剂量的增加(0、0.01、0.1、1mg/L),HITASY-hCREG细胞及培养上清中hCREG表达均呈剂量依赖性增加;流式细胞周期分析提示,hCREG表达增加后,HITASY-hCREG细胞的G1期细胞明显增加。结论:hCREG蛋白通过剂量依赖方式抑制人血管平滑肌细胞的增殖。

对中国心血管病临床研究的一些思考

《中国心血管病报告2015》显示，我国心血管病患者近2．9亿，死亡率居慢性非传染性疾病（慢病）首位。临床研究对医学发展和慢病防控的重要性不言而喻。在2000年至2011年间，美国的心血管病死亡率出现了拐点式下降，而2015年发表在JAMA上的研究认为，创新性的临床研究带来的治疗策略创新，是导致美国心血管病死亡率下降的重要原因之一。

经血管内超声分析冠状动脉斑块的性质及特点的临床研究

目的：经血管内超声（IVUS）分析冠心病患者冠状动脉内斑块性质、特点及与临床MACE事件的相关性。

血管内超声在冠状动脉药物洗脱支架晚期血栓研究中的应用

药物洗脱支架与金属裸支架相比,减少了再狭窄的发生率,但其长期安全性却引起了人们的注意。支架置入30 d以后出现的晚期支架内血栓问题成为目前介入心脏病学的研究热点。晚期支架内血栓发生率低,但一旦发生后果严重。有研究显示其发生的原因可能包括动脉的延迟愈合、动脉瘤形成及支架贴壁不良等。现就血管内超声在冠状动脉药物洗脱支架晚期血栓研究中的应用进展做一评述。

冠心病单支血管病变患者PCI术前后及心脏康复后心肺运动试验指标的变化

目的评估单支血管病变的冠心病患者接受经皮冠状动脉介入(PCI)治疗后心肺运动试验(CPET)各项指标的变化,探讨单支冠脉病变介入治疗对患者运动耐量及持续运动能力的改变。方法入选接受PCI治疗的单支血管病变冠心病患者144例,支架术后来院随访复查患者79例。收集所有受试者术前、术后即刻以及术后随访中CPET各项指标并分析其变化,进一步说明PCI前后活动耐量及坚持心脏康复的长期疗效。结果术前CPET中8例患者出现运动试验阳性;术后有1例阳性,随访复查中无阳性,术后患者CPET阳性率显著降低(P <0. 05)。相较于术前,患者的运动持续时间[(8±4) min vs.(10±4) min]、峰值METs(4. 6±1. 2 vs. 5. 1±0. 6)、峰值公斤摄氧量[(16±4) ml/(kg·min) vs.(17±4) ml/(kg·min)]均有显著统计学差异(P <0. 01)。最后,对比术后即刻数据,随访时持续运动时间[(10±4) min vs.(11±5) min]、静息心率[(70±9)次/min vs.(68±6)次/min]、AT时公斤摄氧量[(11. 3±2. 6) ml/(kg·min) vs.(11. 5±2. 4) ml/(kg·min)]、达AT时METs(3. 51±0. 82 vs. 3. 75±0. 96)、峰值公斤摄氧量[(17±5) ml/(kg·min) vs.(19±4) ml/(kg·min)]等指标均有明显改善(均P <0. 05)。结论单支血管病变的冠心病患者在接受PCI治疗后即刻行CPET结果显示,胸痛症状改善、运动持续时间增加、峰值摄氧量提高,进一步说明PCI能改善患者运动时缺血症状,明显缓解症状,使患者持续运动能力得以提高。根据CPET制定的运动处方进行心脏康复后进行随访发现,心肺功能各项指标有显著改善。

E1A激活基因阻遏子促进人血管平滑肌细胞分化和迁移

为探讨E1A激活基因阻遏子(cellularrepressorofE1A-stimulatedgenes,CREG)蛋白在人血管平滑肌细胞株HITASY分化和迁移中的调控作用,构建了重组逆转录病毒载体pLNCX2(+)/CREG和pLXSN(-)/CREG.以带绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的空载体pLNCX(+)/GFP和正常HITASY为对照,用磷酸钙共沉淀法将重组逆转录病毒载体转染293细胞,包装出完整的逆转录病毒后,感染HITASY.经G418筛选,获得稳定感染的细胞克隆.应用免疫荧光染色、蛋白质印迹等方法检测CREG和平滑肌分化标志蛋白α-肌动蛋白(SMα-actin)表达,同时通过刮伤实验、慢速显微摄像技术检测细胞迁移能力以及用明胶酶谱方法分析细胞基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)的活性.结果表明:pLNCX2(+)/CREG稳定感染的HITASY中CREG和SMα-actin蛋白表达上调,MMP-2和MMP-9活性升高,细胞迁移速度加快;pLXSN(-)/CREG稳定感染的HITASY中CREG和SMα-actin蛋白表达下调,MMP-2和MMP-9活性降低,细胞迁移速度减慢.上述研究提示CREG在诱导血管平滑肌细胞分化的同时促进细胞迁移.

血清反应因子参与RhoA诱导的人血管内皮细胞肌动蛋白骨架重构

为进一步阐明RhoA调控人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)肌动蛋白骨架重构的分子机制,用逆转录病毒感染并筛选出稳定表达持续活化型RhoA(Q63LRhoA)和主导抑制型RhoA(T19NRhoA)的HUVECs。应用免疫组化和Westernblot方法分析去血清前后HUVECs血清反应因子(serumresponsefactor,SRF)的表达及定位,Rhodamine-Phalloidine染色观察F-actin动态变化。结果显示,Q63LRhoA组细胞核中SRF表达增加,F-actin重排形成大量应力纤维;T19NRhoA组中SRF表达较弱,F-actin无明显改变,无应力纤维形成。去血清后,正常HUVECs(对照组)和感染细胞中SRF的表达均显著增加,但其亚细胞定位明显不同。对照组去血清培养3d,SRF主要定位在细胞核,去血清培养5d,SRF出核转位入细胞浆。Q63LRhoA组SRF发生核滞留,不随去血清培养时间延长发生出核转位现象。T19NRhoA组SRF的表达主要定位于细胞核周。对照组去血清培养3d,F-actin表达增加,同时形成大量应力纤维,去血清培养5d,细胞F-actin表达下调,应力纤维解聚。Q63LRhoA组F-actin重构持续发生并形成大量应力纤维,但不随去血清培养时间延长发生明显解聚。而T19NRhoA组F-actin表达不随去血清时间延长而增加。上述结果提示,RhoA介导HUVECsF-actin的重构与SRF的核转位现象密切相关。

E1A激活基因阻遏子过表达抑制体外人血管平滑肌细胞凋亡

为探讨EIA激活基因阻遏子(cellular repressor of EIA-stimulated genes,CREG)对人血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)凋亡的影响及调控机制,应用正、反义重组逆转录病毒表达载体pLNCX_2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染人胸廓内动脉平滑肌细胞克隆株(human internal thoracic artery-Shenyang,HITASY)细胞模型．观察CREG蛋白过表达及表达抑制对平滑肌细胞凋亡的影响。荧光显微镜下观察DAPI染色后凋亡细胞核形态,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析凋亡相关基因caspase-9mRNA的表达,蛋白质印迹法分析p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)的表达变化。研究结果显示,CREG蛋白过表达明显抑制血清饥饿诱导的HITASY细胞凋亡的发生；同时细胞中p38 MAPK、p-p38 MAPK的表达增加。相反,抑制CREG蛋白表达则引起正常血清培养状态下VSMCs的自发凋亡明显增加,同时细胞内p38 MAPK、p-p38 MAPK表达显著下降。进一步研究发现,预先应用特异性抑制剂SB203580阻断p38 MAPK信号转导通路后,CREG蛋白过表达引起的细胞凋亡抑制作用被明显减弱,血清饥饿后CREG蛋白过表达引起的HITASY细胞凋亡现象明显增加。上述结果提示,CREG蛋白过表达可以抑制体外培养的VSMCs凋亡．p38 MAPK信号转导通路可能介导CREG蛋白对VSMCs凋亡的抑制作用。

国产生物降解涂层雷帕霉素洗脱支架置入术治疗冠心病一年结果：国内首项单中心注册研究

目的:评价国产生物降解涂层雷帕霉素洗脱(EXCEL)支架置入术后1年的临床疗效和安全性。方法:前瞻性连续入选100例均单一置入EXCEL支架的住院冠心病患者。术后联合应用抗血小板药氯吡格雷和阿司匹林(ASA)6个月,其后单用阿司匹林。主要研究终点为术后1年主要不良心脏事件(MACE),次要终点为术后30天及6个月主要不良心脏事件及平均8个月冠状动脉(冠脉)造影判定的支架内再狭窄(ISR)发生率。结果:患者全部成功置入EXCEL支架。在153处靶病变中127处为B2/C型复杂病变(83.0%),平均靶病变长度(29.42±15.90)mm,直径(3.17±0.53)mm。共置入211枚EXCEL支架,人均(2.02±1.53)枚,平均支架长度和直径分别为(35.34±17.35)mm和(3.23±0.46)mm。患者住院期及术后30天无主要不良心脏事件发生。1例分别于术后5个月,3例分别于术后6～12个月因支架内再狭窄行再次PCI,主要不良心脏事件发生率4.0%,无死亡、心肌梗死和血栓事件发生。75例患者(112处靶病变)行造影复查,定量冠脉造影测量(QCA)支架内病变再狭窄率3.6%(4/112),支架段病变再狭窄率5.4%(6/112)。结论:这项对冠心病患者应用国产生物降解涂层EXCEL支架的国内首次注册研究表明,与其它药物洗脱支架的关键性研究文献相比。EXCEL支架术后1年支架内再狭窄和主要不良心脏事件发生率相似,患者术后接受6个月氯吡格雷抗血小板治疗是安全的。这一结论有待大规模、多中心的随机对照试验进一步证实。

RhoA和血清反应因子(SRF)介导E1A激活基因阻遏子诱导人血管平滑肌细胞分化

为探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的调控机制,应用重组逆转录病毒表达载体pLNCX2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染HITASY细胞模型,观察CREG蛋白过表达及表达抑制对人VSMCs分化的影响并探讨其调控机制.结果显示:pLNCX2(+)/CREG稳定感染细胞呈分化表型,细胞细长变成组织样聚集生长趋势,细胞中CREG蛋白和平滑肌分化标志蛋白平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)表达显著增加,同时SMα-actin相关调控因子——血清反应因子(SRF)入核转位,RhoA总蛋白表达上调,以Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用后,CREG诱导的SMα-actin表达下调的同时SRF出核转位;pLXSN(-)/CREG稳定感染的细胞体积变大,细胞极性消失,呈无序生长,细胞中CREG和SMα-actin蛋白表达显著降低,同时伴有SRF出核转位及RhoA总蛋白表达下调.免疫共沉淀分析发现,CREG蛋白能被分泌到VSMCs培养基中表达,并可与细胞膜受体6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(M6P/IGF2R)发生直接相互作用.用蛋白磷酸酶PP2A特异性抑制剂okadaicacid减少M6P/IGF2R在细胞膜表面分布,可明显抑制CREG过表达引起的RhoA、SRF和SMα-actin表达.上述结果提示,在体外培养的人VSMCs中,CREG可能作为一种分泌型蛋白质通过与细胞膜受体M6P/IGF2R相互作用,依次激活SMα-actin蛋白相关调控因子RhoA和SRF引起SMα-actin表达增加,促进VSMCs向分化表型转换.

转录因子E2F1抑制CREG表达调控体外培养的人血管平滑肌细胞分化

为探讨转录因子E2F1在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化中的作用及其对E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)表达调控的分子机制,应用生物信息学方法,定位人CREG(hCREG)基因启动子并确定转录因子E2F1在hCREG启动子区的结合位点,PCR方法克隆并构建hCREG基因启动子绿色荧光报告基因载体,以hCREG启动子区E2F1结合位点为模板,化学合成E2F1寡聚脱氧核苷酸(ODN)和错配E2F1ODN,利用转录因子"诱骗(Decoy)"策略,用E2F1ODN转染体外培养的VSMCs以阻断E2F1与hCREG基因启动子区的结合,蛋白质印迹(Western blot)分析检测阻断前后细胞内hCREG蛋白、报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和平滑肌细胞分化标志蛋白SMα-actin表达变化.结果显示:分化表型HITASY细胞中E2F1表达下调伴出核转位,而增殖表型的HITASY细胞中E2F1蛋白表达明显增加且定位于核内.进一步应用FuGene6瞬时转染E2F1ODN和错配E2F1ODN于体外培养HITASY细胞中,蛋白质印迹分析发现,转染E2F1ODN后,HITASY细胞中hCREG、SMα-actin和GFP表达均较未阻断组及错配组细胞明显增加.上述研究结果证实,E2F1是hCREG基因转录的重要调控因子,能够直接结合于hCREG启动子区阻遏hCREG表达,参与hCREG蛋白对VSMCs表型转化的调控作用.

替米沙坦降压疗效的临床研究

目的 前瞻性评估替米沙坦治疗原发性高血压的降压疗效和安全性。 方法 139例轻中度原发性高血压病人随机服用替米沙坦 4 0～ 80mg或福辛普利 10～ 2 0mg共 2 6周 ,服药前、后行动态血压监测 (ABPM ) ,观察 2 4hSBP和DBP、谷峰比值、给药末 6h血压变化、降压有效率和不良反应。结果 替米沙坦和福辛普利均能有效降低血压 ,2 6周治疗有效率分别为 75 %和 72 % (P >0 0 5 ) ,替米沙坦谷峰比值较福辛普利高 (SBP :72 %vs 6 2 % ,P <0 0 5 ;DBP :75 %vs 6 3%P <0 0 5 ) ,且较福辛普利具有更强的降低清晨 2 :0 0 - 8:0 0血压的作用 (P <0 0 5 )。替米沙坦不良反应发生率较少。结论 替米沙坦治疗轻中度原发性高血压安全有效 ,耐受性好 ,可持续 2