人源醛酮还原酶7A2融合蛋白的纯化及其对苯代谢产物的催化活性

目的使用FPLC系统纯化人源醛酮还原酶(AKR)7A2融合蛋白,并检测纯化的AKR7A2蛋白对苯的代谢产物的催化活性。方法将含有His-AKR7A2的重组质粒转化至BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导AKR7A2融合蛋白的大量表达;利用FPLC系统通过HiTrap亲和柱和G25 Sephadex凝胶色谱柱纯化AKR7A2融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot鉴定。采用酶活性实验检测纯化的重组AKR7A2蛋白对苯甲醛、双苯醌和反向,反向-2,4-二烯-1,6-己二酮(MUC)的底物特异性。结果使用FPLC系统通过两步纯化法成功获得重组的His-AKR7A2融合蛋白,纯度高达98%。酶活性实验结果显示:重组AKR7A2蛋白对苯甲醛有中等亲和力,对MUC亲和力较高,对双苯醌的亲和力较低。结论成功纯化了重组人源AKR7A2蛋白,并检测了其对3种苯代谢产物的底物特异性,AKR很可能在苯的代谢途径中扮演重要角色。

伊马替尼与顺铂联用对人胶质母细胞瘤U87细胞株及其裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的探讨伊马替尼与顺铂联合对胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为临床治疗提供实验依据。方法 SubG1法检测U87细胞株在伊马替尼及顺铂单药处理和联合处理时各组细胞的凋亡率;观察不同治疗对U87荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率及Q值;测量各组裸鼠体质量变化,评价药物的毒副作用。结果伊马替尼与顺铂联合处理对U87细胞凋亡诱导率显著高于相同剂量的各单药处理组;联合治疗组与相同剂量的各单药治疗组比较,抑瘤率差异有统计学意义(P<0.05),Q值为1.264;与顺铂高剂量组比较,抑瘤率差异无统计学意义(P>0.05)。结论伊马替尼与顺铂联用有协同效应,二者联用可降低顺铂使用剂量,减轻对裸鼠的毒副作用。

肿瘤干细胞标记物CD133在肺癌组织中的表达

背景:随着肿瘤干细胞研究的深入,肺癌干细胞成为目前研究的热点之一。目的:评价肿瘤干细胞标记物CD133在肺癌组织中的表达,以及与肺癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化染色检测CD133在不同类型、不同分化程度肺癌组织中的阳性表达率,并分析CD133阳性表达与肺癌患者年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分期及分级、分化程度、淋巴转移和预后等临床病理特征的相关性。结果与结论:CD133在各种类型肺癌组织中均有较高的表达率,但是其阳性表达与肺癌患者的年龄、性别等患者临床特征无相关性,与肺癌的组织学分型、分期及分级、分化程度也无相关性,而与肺癌组织的淋巴转移及预后密切相关,伴有淋巴转移的肺癌组织中CD133的阳性表达率更高,且5年生存率明显降低,预后差。