冠脉搭桥手术中桥血管模型建立及内皮型一氧化氮合酶基因转染的研究

目的建立冠状搭桥手术（CABG）中桥血管动物模型，桥血管壁转染人内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因并验证转染效果。方法家兔40只，随机分为4组（n=10），自体股动脉移植建立动脉桥血管模型：（1）eNOS组，股动脉转染eNOS基因后移植为桥血管；（2）空载基因组，股动脉转染空载eNOS基因后移植为桥血管；（3）对照组，股动脉仅移植为桥血管，不进行基因转染；（4）正常股动脉组。基因转染采用浸泡法转染腺病毒封装的eNOS基因组或空载eNOS基因组。3周后获取桥血管、正常颈动脉以及股动脉标本，通过免疫组织化学法检测组织中一氧化氮（NO）含量、eNOS活力测定和eNOS蛋白采用Western blot等方法，观察和证实转染的效果和效率。结果本组兔无死亡，桥血管通畅。模型中各组桥血管均可见不同程度的适应性改变。其中eNOS组血管壁增厚，eNOS蛋白表达明显增多；对照组和空载基因组可见血管壁变性，eNOS蛋白不表达或表达极少（P〈0．05）。eNOS组动脉管壁NO含量及总eNOS活力分别为（8．83±1．24）μmol／g和（0．987±0．239）U／mg，远高于其他3组（P〈0．05）。Western blot分析也证明eNOS组血管壁eNOS蛋白含量明显增多，与其他3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论此动物模型有一定实用性。可以借助eNOS基因转染增加动脉桥血管壁eNOS表达及活力，进而增加NO在局部的含量及表达。