肝癌患者多药耐药基因检测及其对介入治疗疗效影响分析

目的探讨原发性肝癌中多药耐药性对介入治疗疗效的影响。方法选择52例不能手术的肝癌患者,分为TACE联合PAI治疗组和单纯TACE治疗组,比较两组患者治疗前后肿块缩小情况并随访比较生存时间。单纯TACE组患者选择残余肝癌组织的部位进行细针穿刺活检,应用RT-PCR法行多药耐药相关基因MDR1、MRP mRNA检测。结果联合组与TACE组有效率分别为61.5%(16/26)、30.8%(8/26),两组间差异有显著性(P<0.05),1、2年生存率分别为80.8%(21/26),61.5%(16/26);69.2%(18/26),30.8%(8/26),差异有显著性(P<0.01)。26例患者MDR1、MRP阳性率分别为73.1%(19/26)和57.7%(15/26)。结论与单纯TACE相比,TACE联合PAI治疗中、晚期巨块型肝癌有较好的临床疗效,肝癌细胞存在多药耐药性比较普遍,并可能影响单纯TACE治疗效果。

人肝癌多药耐药细胞系BEL-7402/ADM的建立及耐药相关基因表达检测

目的:建立人肝癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性及机制。方法:应用人肝癌细胞株BEL - 74 0 2 ,采用阿霉素(ADM)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系BEL - 74 0 2 / ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多药耐药基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P- gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH / GST)的表达情况,应用RT- PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果:BEL - 74 0 2 / ADM对多种抗癌药物产生耐药,对ADM的耐药性(半数抑制浓度,IC50 )提高了17.31倍。流式细胞仪分析发现(6 5 .5±5 .8) %的BEL - 74 0 2 / ADM细胞表面P- gp表达阳性,而对照细胞BEL - 74 0 2表达仅为(31.3±4 .3) % ;(32 .4±3.5 ) %的BEL - 74 0 2 / ADM细胞表面MRP表达阳性,而对照细胞BEL - 74 0 2表达仅为(2 3.4±3.1) % ,二者差异有显著性(P<0 .0 1) ;BEL - 74 0 2 / ADM和BEL -74 0 2细胞的GSH/ GST表达无明显变化(P>0 .0 5 )。RT- PCR检测发现BEL - 74 0 2 / ADM中MDR及MRP m RNA高表达。结论:BEL - 74 0 2 / ADM具有明确的多药耐药性,其多药耐药相关基因MDR及MRP m RNA表达升高。

肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM的建立及耐药机制研究

目的建立人肝癌多药耐药细胞系并研究其耐药特性及机制。方法应用人肝癌细胞株HepG2,采用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法,建立多药耐药细胞系HepG2/ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多药耐药基因(mdr)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达情况,应用RT-PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果HepG2/ADM对多种抗癌药物产生耐药,对阿霉素的耐药性提高了89.38倍。流式细胞仪分析发现(45.5±5.1)%的HepG2/ADM细胞表面P-gp表达阳性,而对照细胞HepG2表达仅为(11.3±1.2)%,二者差异有显著性(P<0.01);HepG2/ADM和HepG2细胞的MRP及GSH/GST表达无明显变化(P>0.05)。RT-PCR检测发现HepG2/ADM中MDR mRNA高表达。结论HepG2/ADM具有明确的多药耐药性,其多药耐药相关基因MDR mRNA表达升高。

热疗联合ADM诱导肝癌细胞BEL-7402/ADM凋亡的实验研究

目的 研究热化疗诱导多药耐药肝癌细胞BEL 74 0 2 /ADM凋亡的效果 ,为热化疗在治疗已产生多药耐药性的原发性肝癌方面的应用提供理论依据。方法 将BEL 74 0 2 /ADM分为对照组、单纯热疗组、热化疗 3组 ,应用热疗联合阿霉素诱导BEL 74 0 2 /ADM细胞凋亡 ,以流式细胞仪、TUNEL染色法检测其凋亡率。结果 对照组、单纯化疗组细胞凋亡率分别为 3 2 4± 1 5 6 %、4 12± 1 77% ;;而BEL 74 0 2 /DM +ADM +热疗 (热化疗组 )凋亡率为 31 83± 5 5 9% ,与前两组相比差异有显著性 ,P <0 0 1。结论 热化疗与单纯化疗相比能显著增加耐药细胞BEL 74 0 2 /ADM凋亡率 ,应用于临床治疗已产生耐药性的原发性肝癌有可能产生较为理想的治疗效果。