化学合成小干扰RNA对大鼠脑内AQP4蛋白沉默效果验证与筛选

目的针对大鼠脑内AQP4蛋白使用化学合成法制备数条小干扰RNA链(siRNA),对其中两条链进行沉默效果验证,并筛选出效果显著的小干扰RNA链。方法根据大鼠的AQP4mRNA序列选择2个不同的靶点,采用化学合成的方法分别合成2条siRNA,并同时合成阴性对照siRNA。雄性成年Wistar大鼠18只,随机分为注射阴性对照液组、注射725链组和注射1006链组,并分别经侧脑室注射相应药物。6 h后将其全部处死,利用免疫组织化学法和原位杂交法分别检测脑内AQP4蛋白和mRNA的表达水平。结果给药6 h后,注射725链siRNA组大鼠脑内AQP4在蛋白质和基因两个水平均显著低于注射阴性对照液组和注射1006链组(P<0.05)。结论脑室注射725链siRNA可以在6 h内有效沉默大鼠脑内AQP4的表达。