哺乳动物胚胎生物技术应用中线粒体的命运

胚胎生物技术是生命科学的重要组成部分,包括体外受精、显微受精、细胞核移植技术等。线粒体是真核细胞中的重要细胞器,是机体的能量代谢中心。作者系统地就线粒体在体外受精与显微受精、细胞核移植技术等胚胎生物技术应用中的命运作一概述。

哺乳动物颗粒细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是雌性生殖系发育过程中的一个重要组成部分,在哺乳动物中,超过99%的雌性生殖细胞都会在卵子发生的不同阶段发生凋亡。目前,在颗粒细胞凋亡过程中至少发现5个配体受体系统:TNFa和TNF受体系统,Fas配体受体系统,TRAIL和TRAIL受体系统,APO-3配体受体系统,PFG-5配体受体系统,而且发现颗粒细胞凋亡属于依赖于线粒体凋亡信号传导凋亡途径。

辽宁绒山羊胚胎冷冻保存方法与技术研究

本研究探讨了不同冷冻方法、不同冷冻液和冷冻前CB处理对辽宁绒山羊胚胎低温保存效果的影响,以筛选适合于辽宁绒山羊胚胎冷冻保存的方法与技术。常规冷冻时以1.5 mol/L EG为保护液的保护效果较好,解冻后胚胎发育率为62.86%,孵化率为54.29%;玻璃化冷冻(细管法和OPS法)以EFS40为保护液可以获得较好的冷冻效果,玻璃化细管法和OPS法解冻后胚胎的发育率分别为65.79%和57.89%;冷冻前CB处理能改善辽宁绒山羊胚胎低温保存的效果。

葡萄糖在牛体外受精及胚胎发育中的影响

在牛精子获能液中添加不同浓度的葡萄糖,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育进行研究,通过观察顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率,筛选出获能液中最适葡萄糖浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明:葡萄糖是精子获能和维持超激活运动的主要能源物质,其代谢过程中产生的活性氧在牛精子体外获能、受精过程中起重要作用,高浓度(超过9.15mM)葡萄糖有利于获能的完成;但是对早期胚胎发育不利,对早期胚胎发育来说其最适添加量为6.10mM,此时的囊胚率最高。

不同共培养体细胞和胎牛血清浓度对牛体外受精后早期胚胎的影响

利用屠宰黄牛的卵母细胞经体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)后的早期胚胎,与单层颗粒细胞(GC)、输卵管上皮细胞(BOEC)等体细胞共培养及在胎牛血清的胚胎培养液中的后续发育进行了研究,并探讨了其影响因素,以期筛选出最佳的体外培养条件。结果表明:使用GC和BOEC体外共培养牛体外受精后胚胎,均取得了较好的囊胚发育率;且牛体外受精后早期胚胎体外培养体系中,添加10%血清能有效地促进牛体外受精后胚胎的囊胚率。

β-巯基乙醇或牛磺酸对牛体外受精后早期胚胎的影响

对屠宰黄牛的卵母细胞经体外成熟（IVM）、体外受精（IVF）后的早期胚胎,在β-巯基乙醇（β-ME）或牛磺酸等添加物的胚胎培养液中的后续发育进行了研究,并探讨了其影响因素,以期筛选出最佳的体外培养条件。试验结果表明：4-8细胞期添加β-ME可显著提高胚胎桑椹胚、囊胚发育率和囊胚细胞数,但不能改善孵化囊胚的质量。在体外发育培养液中添加7mM牛磺酸可显著提高桑椹胚率和囊胚率（P〈0.05）,并且在4-8细胞期添加牛磺酸最为合适。

牛早期胚胎体外培养的研究进展

本文就目前牛早期胚胎体外培养的常用基础培养液、牛早期胚胎的体外培养方法以及影响牛早期胚胎发育的一些常规添加成分的发展现状作了比较全面的概括,并指出了体外培养体系的研究价值和意义。

昆明小鼠胚胎移植技术的研究

目的研究不同时期胚胎对胚胎移植成功率的影响,以提高胚胎移植率。方法采用经超数排卵的KM雌鼠与正常615雄鼠交配,取受精卵,分别将1-细胞胚、2-细胞胚和桑椹胚、囊胚分别移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管和子宫中,妊娠产仔。结果移入1-细胞胚、2-细胞胚、桑椹胚和囊胚的假孕母鼠妊娠率分别为36.36%、42.86%、10%、27.27%,产仔率分别为46.58%、38.46%、58.33%、60%。结论2-细胞胚的移植可提高小鼠的胚胎移植成功率,子宫移植可提高小鼠的产仔率。

牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活及其胚胎体外培养方法的研究

本试验比较了在SOFaa培养体系下化学激活(5μmol/L离子霉素5min,2mmol/L 6-DMAP 4h)与电激活(1.3 kv/cm,60μs,1次脉冲)方法对囊胚率的影响,结果表明化学激活囊胚率显著高于电激活(12.30%vs 2.4%,p<0.01),而二者的卵裂率(90.61%vs 94.40%)和囊胚细胞数(48.24±13.12vs 38±3.56)均没有显著性差异(p>0.05);同时比较了在SOFaa培养体系下第4天更换添加10%FBS的SOFaa液与在SOFaa液中连续培养7天对囊胚率的影响,结果更换添加FBS的培养液使囊胚率显著降低(3.69%vs 11.64%,p<0.01)。

不同蔗糖浓度、供体细胞保存温度和融合温度对小鼠体细胞克隆胚胎发育的影响

以昆明小鼠为实验动物,经过超数排卵后得到卵丘卵母细胞复合体(COCs),以卵丘细胞为核供体细胞,卵母细胞为核受体细胞进行核移植,分析比较了不同蔗糖浓度对小鼠卵母细胞去核时间、去核率及重构胚体外发育的影响,并探讨了供体细胞的保存温度和融合温度对重构胚体外发育的影响。结果表明,各蔗糖浓度组的去核率均达到100%,但3%、4%、5%蔗糖浓度组的平均显微操作时间明显短于0%、1%、2%蔗糖浓度组,而4%和5%蔗糖浓度组的重构胚发育率均显著低于1%、2%、3%蔗糖浓度组;卵丘细胞保存在室温组的细胞融合率和体外发育率均显著高于高温组、低温组及温度变化组;25℃组细胞融合率显著高于37℃组。由此可见,显微操作液中添加3%蔗糖不仅使卵子的核明显,而且大大缩短卵子在体外操作时间,有利于重构胚的体外发育。卵丘细胞的室温保存和室温融合温度更有利于重构胚的体外发育。

动物乳腺生物反应器的研究进展

动物乳腺生物反应器(Mammary Bioreactor)是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中表达多肽药物、工业酶、疫苗和抗体等蛋白的技术。该技术具有低投入高产出的特点,其效率是利用以大肠杆菌和动物细胞培养技术的100倍,是一种非常有潜力的高新技术。本文综述了牛乳腺生物反应器的原理、研究进展及其应用。

动物乳腺生物反应器的研究进展

动物乳腺生物反应器(Mammary Bioreactor)是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中表达多肽药物、工业酶、疫苗和抗体等蛋白的技术。该技术具有低投入高产出的特点,其效率是利用以大肠杆菌和动物细胞培养技术的100倍,是一种非常有潜力的高新技术。本文综述了牛乳腺生物反应器的原理、研究进展及其应用。

哺乳动物克隆技术的研究进展

本文针对近年来的哺乳动物克隆技术的研究热点,分别从体细胞克隆方法,克隆动物的细胞核重编程,异种克隆及治疗性克隆等方面进行了分析,最后就克隆技术在转基因中的应用进行了总结。

标记辅助选择在动物育种中的研究进展

随着生物科学的不断发展,遗传标记辅助选择(MAS)已经在动物改良中获得了较大的遗传进展,其中最关键的环节是识别有效的遗传标记,即这一标记应与控制这些数量性状的基因(QTL)处于连锁不平衡(linkagedise-quilibrium)状态。目前遗传标记技术在动物遗传育种中的研究已取得一定进展。

钙离子载体对牛精子体外受精及胚胎发育的影响

在牛精子获能液中添加不同浓度的钙离子载体,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育作了研究。通过对顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率的观察,筛选出获能液中最适的钙离子载体浓度,作用时间及其有利于早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明:钙离子载体在诱导牛精子获能上存在一个浓度-时间阈值,其最佳浓度和时间组合是0.1μM处理2min或者0.15μM处理0.5min,此时的囊胚率最高;钙离子载体的添加不能诱导牛精子获能的发生。

动物乳腺生物反应器的研究进展

动物乳腺生物反应器(Mammary Bioreactor)是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中表达多肽药物、工业酶、疫苗和抗体等蛋白的技术。该技术具有低投入高产出的特点,其效率是利用以大肠杆菌和动物细胞培养技术的100倍,是一种非常有潜力的高新技术。本文综述了牛乳腺生物反应器的原理、研究进展及其应用。

大豆黄酮在动物营养中的研究与应用

大豆黄酮属异黄酮类植物雌激素,具有弱雌激素样活性,在畜牧生产中作为饲料添加剂,可促进动物生长、增强免疫力和繁殖性能等。本文就大豆黄酮的生理功能及其应用加以综述。

体细胞克隆的小鼠胚胎在附植前后发育的研究

采用成年小鼠的卵丘细胞核、胎儿成纤维细胞作核供体细胞来进行核移植,研究小鼠卵母细胞的去核程序和影响重构胚附植前发育的激活条件;随后将重构胚与供体细胞系共培养后获得囊胚阶段的小鼠重构胚,并将其移植到受体鼠体内后获得了24%克隆胚胎。结果表明,小鼠卵母细胞质能够进行重编程来支持早期的胚胎发育。

供体细胞核在小鼠重构胚胎重编程中的变化

将所观察的细胞固定后,用电子显微镜观察获得微型图片,再利用三维模拟处理器对所采集的图片进行分析,获得了注入的卵丘细胞核的一系列发育图像。从卵丘细胞中的三维模拟图像和核物质中的核仁图像中,发现在这些细胞表面上出现胞质微绒毛,在细胞膜附近存在有细胞骨架的功能性活动。卵丘细胞正处于细胞分裂间期,90%以上的卵丘细胞在排卵时正处于G0/G1期。卵丘细胞中的核物质和染色体在注入到核卵母细胞中后,核物质重编是一个动态的,全部的和显著的过程。

哺乳动物克隆技术的研究进展

本文针对近年来的哺乳动物克隆技术的研究热点,分别从体细胞克隆方法,克隆动物的细胞核重编程,异种克隆及其治疗性克隆等方面进行了分析,并且对克隆技术在转基因中的应用进行了总结。