辽宁省保护地蔬菜根结线虫发生规律及防治对策

2008-2009年,对辽宁省蔬菜主产区保护地蔬菜根结线虫病的危害程度进行调查,以辽宁省的辽中、辽西、辽南、辽东4个地区的黄瓜大棚为对象,对棚内土壤中根结线虫的发生规律进行系统研究。结果表明:辽宁省保护地蔬菜根结线虫病为南方根结线虫危害。该病在辽宁省保护地蔬菜上发生已相当普遍,其中以连作7年以上的黄瓜、番茄、苦瓜易感寄主为主的老菜棚的发病率达到100%,病情指数达到80以上。4个地区大棚土壤中根结线虫数量普遍随土层的加深呈明显减少的趋势;并且根结线虫数量普遍随着大棚前边缘向内的距离加大呈明显增加的趋势。结合辽宁省根结线虫发病特点,提出相应的防治措施。

灰皮支黑豆抗大豆胞囊线虫3号生理小种的生化机制研究

以抗感大豆胞囊线虫3号生理小种品种灰皮支黑豆和辽豆15为研究对象,三叶期后室内人工接种大豆胞囊线虫,接种后5,10,15,20,25,30 d取样,测定抗感品种接种与未接种根内多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的动态变化,以及根内次生代谢物质总酚和类黄酮含量的动态变化,进而揭示灰皮支黑豆抗大豆胞囊线虫3号生理小种的生化机制。试验结果表明,大豆受大豆胞囊线虫侵染后,抗感品种根内PPO、POD、PAL酶活性均表现升高,并且在抗病品种灰皮支黑豆中酶活性高峰出现的早,根内总酚和类黄酮含量都表现增加。

毒杀南方根结线虫的木霉种类鉴定及活性研究

木霉是国际上研究与应用非常普遍的生防真菌之一,具有重要的科研价值和广阔的应用前景。本研究采用形态学鉴定、ITS和β-tubulin序列分析法对4株具有杀线虫活性的木霉菌株进行种类鉴定,结果显示FT311和FT312为绿色木霉（Trichoderma viride）,FT1937和FT85为哈茨木霉（T.harzianum）。利用贝氏皿浸没法测定,4株木霉发酵滤液均能显著降低南方根结线虫卵的孵化和2龄幼虫（J2）的活性,其中FT1937和FT85对卵孵化抑制率和J2致死率均达到85%~92%,而FT311能够达到80%~85%,但FT312毒性较低,仅达40%~60%;2株哈茨木霉的活性好于2株绿色木霉;同时观察到发酵液对线虫卵和幼虫体壁有消解作用、抑制和延迟卵孵化,并使幼虫体内空泡化。本研究为根结线虫病害的生防防治提供了更多的木霉资源信息。

我国大豆主产区大豆胞囊线虫群体分布及致病性分化研究

为了明确我国大豆主产区大豆胞囊线虫群体的发生分布及致病性分化情况,同时也为我国大豆胞囊线虫防治及抗病育种工作提供依据,本研究在全国范围内开展大豆胞囊线虫种群监测工作,对2012-2014年国家大豆产业体系的29个大豆试验站所辖150个示范县进行大豆胞囊线虫的种群密度检测,并在国际统一的鉴别寄主上进行生理小种鉴定。明确了大豆胞囊线虫在我国20个省(市/自治区)发生分布,总检出率达69.4%。并对其中11个群体进行生理小种鉴定,共鉴定出生理小种5个,即1、2、3、4和14号生理小种。其中安徽宿州、甘肃镇原、内蒙古赤峰、陕西延安和宁夏银川的鉴定此前未见报道。2012-2014年我国大豆胞囊线虫病害的发生比较严重,平均胞囊量高达99个·L^(-1),我国大豆胞囊线虫致病性分化并无明显变化,鉴定结果中1、3和4号生理小种出现频率较高,为72.7%。

辽宁果树根围土壤线虫的多样性研究

对辽宁沈阳、海城和旅顺3个地区4种果树根围土壤进行线虫种群多样性的研究,共鉴定出土壤线虫16科26个属,其中食细菌线虫营养类群为根围土壤中的优势类群,相对丰度均超过50%,植物寄生线虫类群次之,食真菌线虫类群数量较少,杂食—捕食性线虫类群数量最少。不同果树根围土壤中的线虫优势属各不相同。调查的果园在0～60cm土层都有土壤线虫的分布,但主要以20～30cm土层的土壤线虫总量为最多。土壤线虫的消长动态与果树根系的生长发育活动一致,在每年8—9月份果实膨大期线虫的繁殖数量达到最大。对不同果树根围线虫的生态指数分析表明,在树龄较小的果树根围,线虫群落的多样性指数和均匀度指数均高于树龄较高的果树,而优势度指数正相反;同时在树龄较小的果树根围鉴定到短体线虫属和矮化线虫属等植物病原线虫,而高龄树则无,说明植物线虫更易于侵袭幼龄果树,树龄较小的果树能够为比较多的线虫种类的繁殖提供营养。

大豆胞囊线虫病生物防治研究进展

大豆胞囊线虫病的生物防治是有效控制大豆胞囊线虫群体的重要措施。通过对各种生物防治方法的逐渐深入研究,生物防治这一措施将在大豆生产上有效控制大豆胞囊线虫的发生与为害发挥重要作用。对近年来沈阳农业大学植物线虫研究室及部分国内外的线虫研究室在大豆胞囊线虫病生物防治方面的研究进展进行了综述,研讨过去生防措施的利弊,探索大豆胞囊线虫病生物防治的新方法,为有效控制大豆胞囊线虫病开辟新的途径。

无机化合物对南方根结线虫作用方式的研究

利用体外生物测定方法检测碳酸氢铵、硫酸铜和氯化铁在供试浓度下对南方根结线虫2龄幼虫(Meloidogyne incognitaJ2)存活的影响,以及药剂对其运动行为、个体发育、呼吸及体液外渗等的影响。结果表明,3种化合物在LC90浓度下使南方根结线虫2龄幼虫50%致死时间不超过10.14 h,90%致死时间不超过22.66 h,离体条件下均对南方根结线虫2龄幼虫存活有强烈的抑制作用,显著降低了其运动行为,使其体长缩短、透明尾变长。并且,药剂处理均降低了线虫的呼吸作用,线虫悬浮液的电导率明显高于对照。

大豆品种(系)抗大豆胞囊线虫14号生理小种的抗性鉴定研究

2011和2012年分别采用田间自然病圃和病土盆栽方法对167份大豆品种(系)进行了大豆胞囊线虫14号生理小种(SCN14)的抗性鉴定。田间鉴定结果表明:高抗病材料3份,占参试材料的1.8%;中抗材料20份,占参试材料的11.98%。对这23份材料进行盆栽鉴定,结果表明:23份种质均抗SCN14号小种。参试167份材料中绝大部分对SCN14号小种表现为感病或高感,表现抗病的品种基本是小黑豆或小黑豆改良的后代材料。

放线菌Snea253代谢产物杀线虫谱研究

采用稀释分离法室内测定了放线菌Snea253的发酵代谢产物对北方根结线虫、南方根结线虫、水稻干尖线虫和小杆线虫的毒力作用。结果表明:菌株Snea253的代谢物对北方根结线虫和南方根结线虫表现出较高的生物活性,对水稻干尖线虫毒力较弱,对小杆线虫毒力最弱,即对不同种类线虫存在选择性毒力差异,而且随稀释倍数增加毒力减弱。

Hsp90基因在南方根结线虫和番茄中的表达研究

Hsp90基因是真核生物中广泛存在且非常保守的热激蛋白基因家族中的重要成员，在生物的抗逆胁迫过程中起重要作用。从番茄基因组扩增Hsp90基因，连接到载体pCAMBIAl302上，构建了表达载体pCAM—Hsp90，利用实时定量荧光技术检测了番茄接种南方根结线虫后Hsp90基因的表达水平，结果表明：在20～25dpi后番茄根部S1一Hsp90基因大量表达。此外，南方根结线虫的雌虫和二龄幼虫J2的Mi—Hsp90基因在高温和低温胁迫时表达量都高于对照，而且在35℃时表达量要高于4℃时的表达量，在J2中的表达量高于雌虫的表达量。说明Hsp90基因在番茄抗线虫侵染以及线虫适应环境方面起到非常重要的作用。南方根结线虫J2在35℃高温下Hsp90的高表达使其能够保持较高的活力并侵染番茄的根部，从而使南方根结线虫更适合在较高温度下生存。本试验进一步证明热激蛋白在番茄抗线虫侵染和线虫对环境的适应性过程中起到重要作用，同时为利用生态控制的方法防治根结线虫病害提供理论依据。

控制大豆孢囊线虫生物种衣剂的研制及沈阳田间小区防效的初步试验

以"辽豆15"为材料,采用田间小区试验,探讨了自行研制的生物种衣剂对大豆孢囊线虫数量的影响。试验结果表明:2007年在沈阳汪家的试验中,处理4(复配菌株F1024,B482,A4+微量元素组合3+助剂)对大豆根外孢囊的抑制率达65.66%,与对照有显著差异。2008年对处理4进行了精细的试验设计,并在2个不同地点布置试验,结果处理5(复配菌株F1024,B482,A4+元素组合+助剂)在汪家和康平2个试验点的根外孢囊数量及根内线虫数量都与对照差异达到显著水平,2个试验点的根外孢囊抑制率分别为62.13%和46.45%,根内线虫抑制率分别为62.50%和81.78%。

水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)人工培养研究

利用真菌培养水稻干尖线虫的结果表明:不同的真菌培养线虫的效果有较大差异。链格孢菌(Alternaria sp.)、镰刀菌(Fusarium sp.)的效果明显优于常用的灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea),可选用于培养水稻干尖线虫。在真菌菌落上,不同的接虫量以及不同的温度和培养时间对水稻干尖线虫的培养均有一定的影响。

连作条件下大庆和安达地区大豆胞囊线虫毒力类型鉴定研究

采用国际通用的鉴别寄主法,鉴定连作条件下大庆和安达大豆胞囊线虫天然育种病圃生理小种和HG毒力类型。结果表明:生产条件下安达地区大豆胞囊线虫优势小种为毒力较强的14号生理小种,大庆地区为3号生理小种。室内盆栽鉴定安达试验基地HG类型为1.3.4.7,大庆试验基地HG类型为7。由于大豆胞囊线虫生理小种和毒力类型的组成日趋多样性,迫切需要发掘新的抗源和加紧培育水平抗性品种。

桔绿木霉Snef1910联合噻唑膦防治根结线虫减施增效研究

根结线虫病是设施蔬菜的主要土传病害之一,随着种植面积的逐年增加,根结线虫病害也日趋严重。噻唑膦是常用化学杀线剂。前期筛选获得1株对南方根结线虫有高毒力的生防真菌桔绿木霉(Trichoderma. citrinovirid)Snef1910。温室田间试验通过改变两者的施用次数和施用顺序,测试桔绿木霉Snef1910联合噻唑膦共同防治根结线虫的效果,以期实现噻唑膦在实际生产中的减施增效。试验共设置6个处理:snef1910仅在定植期施用1次(snef1910-1);噻唑膦仅在定植期施用1次(F-1);snef1910在定植期和30d后各施用1次(snef1910-2);噻唑膦在定植期和30d后各施用1次(F-2);snef1910在定植期施用1次,30d之后施用噻唑膦1次(snef1910+F);噻唑膦在定植期施用1次,30d之后施用1次snef1910(F+snef1910)。温室田间试验结果表明:F-2和F+Snef1910处理的防效最高为68.00%,snef1910-1,F-1,snef1910-2和snef1910+F处理的防效分别为32.00%、56.00%、36.00%和56.00%。F+snef1910处理的增产率为76.50%,显著高于其他处理。snef1910-1、F-1、snef1910-2、F-2和snef1910+F处理的增产率分别为37.56%、50.46%、47.93%、59.68%和58.18%。可见,定植期施用噻唑膦,生长期施用木霉Snef1910的顺序施用模式可以减少噻唑膦的使用次数,同时提高防效和产量,这是噻唑膦减施增效的有效办法。研究结果可为木霉联合其他化学杀线剂实现减施增效提供参考。

保护地西瓜根际线虫种群调查

本文对保护地西瓜根际线虫进行了抽样调查。结果表明,西瓜根际线虫分属8科16个属,其中绝大部分为腐生类线虫,寄生类线虫较少;西瓜根际线虫的时空动态表现为随西瓜根系的生长发育而分布的现象[1];西瓜不同生育期线虫数量呈现先升后降的趋势,抽蔓期线虫数量最多,拔秧期线虫数量下降,降至低于幼苗期;西瓜根际线虫主要集中在10～30cm土层,0～10cm和30～40cm土层线虫数量明显减少。

聚多曲霉Snef210对南方根结线虫毒性的研究

蔬菜根结线虫病在我国乃至世界危害日益严重,安全防控该病害成为目前急需解决的农业生产问题。本研究筛选到一株可毒杀南方根结线虫Meloidogyne incognita的生防真菌Snef210,经形态学和分子生物学鉴定为聚多曲霉Aspergillus sydowii(Bain.et Sart.) Thom et Church。该菌株发酵液对南方根结线虫2龄幼虫(J_2)具有很强的毒杀作用,原液处理24 h后校正死亡率达90.1%,处理3 d后对卵孵化的抑制率达92.8%。盆栽试验中,与对照相比,菌株发酵液10倍稀释液土壤处理对番茄根部的根结减退率为66.7%。聚多曲霉代谢产物丰富,多用于抗菌和抗肿瘤的研究,本文首次发现其对南方根结线虫有效,是一类潜在的控制植物线虫病害的新型生防因子。

日光温室番茄不同生育期根围土壤线虫空间分布研究

番茄在我国日光温室中连作栽培现象非常普遍,其根围土壤线虫的变化尤其是植物病原线虫的积累影响番茄的产量和品质,因此,明确日光温室番茄根围土壤线虫的群落特征和时间空间分布对有效控制番茄线虫病害具有重要意义。对辽宁省铁岭市日光温室番茄土壤线虫群落和时间空间分布进行研究,分别在番茄定植前期、盛果期和成熟期,定点采集0～10,10～20,20～30cm深度土壤样本135份。结果表明:共鉴定土壤线虫14科30属,其中根结线虫属(Meloidogyne)、小杆属(Rhabditis)和原杆属(Protorhabditis)为优势属,植物寄生线虫营养类群在番茄整个生育期都是优势营养类群;利用Graphpad Prism和Canoco的主成分分析和交互分析发现,时间上番茄成熟期为土壤线虫群落数量的高峰期,番茄盛果期和成熟期根结线虫属的线虫数量占据绝对优势。空间上靠近日光温室中心点处,根结线虫属的线虫数量最多;番茄定植前期不同土层深度间香农-威纳多样性指数(H′)和丰富度指数(GR)差异性显著,番茄盛果期不同土层深度间香农-威纳多样性指数(H′)、均匀度指数(J′)、优势度指数(λ)、丰富度指数(GR)、自由生活线虫成熟度指数(MI)、植物寄生线虫成熟度指数(PPI)和瓦斯乐斯卡指数(WI)差异性显著,番茄成熟期只有富集指数(EI)在0～10cm土层中显著高于20～30cm土层,其他生态指数差异不显著,说明番茄定植前期和盛果期土壤线虫群落多样性相对比较丰富,但成熟期由于根结线虫的激增使EI指数差异明显,食物网结构较单一。通过揭示日光温室番茄土壤线虫群落和优势属根结线虫属的时空分布,为番茄根结线虫病害的防控提供理论支持。

辽宁省大豆胞囊线虫生理分化研究

2007～2008年,对采自辽宁省14个市22个县(区)的42份大豆胞囊线虫土样,应用Golden等的方法和鉴别寄主Pickett、Peking、PI88788、PI90763和Lee,于2008年5～9月在室外避雨棚内进行盆栽生理小种鉴定。根据鉴定结果并结合文献资料,绘制出了辽宁省大豆胞囊线虫生理小种分布图。共鉴定了14份土样、3个生理小种,即1号、3号和6号生理小种,其中6号生理小种在辽宁省首次发现。1号生理小种分布在铁岭市昌图县;3号生理小种分布在大连市庄河、盘锦市大洼县、锦州市北镇、本溪满族自治县、葫芦岛市南票区、阜新蒙古族自治县、鞍山市岫岩县、沈阳市东陵区、辽阳市刘二堡镇、丹东市凤城县和抚顺市清原县;6号生理小种分布在朝阳市喀左县和营口市盖州。全省以3号生理小种分布最广,为优势小种。

抑制大豆胞囊线虫的异黄酮种类研究

为明确外源异黄酮类物质对大豆胞囊线虫的毒性,选取黄豆苷元(daidzein)、黄豆苷(daidzin)、染料木素(genistein)、染料木苷(genistin)、黄豆黄苷(glycitin)和黄豆黄素(glycitein)6种大豆异黄酮,采用贝氏皿法离体测定其对大豆胞囊线虫的卵孵化抑制率和对二龄幼虫(J2)的致死率及其田间防效,以明确对线虫有效的异黄酮种类。结果表明:6种大豆异黄酮对胞囊线虫的卵孵化和J2活性均具有一定的抑制作用,其中100μg/m L染料木素效果最好,处理24h后,对J2校正死亡率可达到45.46%,对卵孵化抑制率为43.48%,且50μg/m L染料木素处理种子后的田间防效显示对胞囊抑制率亦达到49.47%。此外,染料木苷和黄豆苷元对J2和卵孵化也有较明显效果但田间防效较其他异黄酮差;黄豆黄苷和黄豆黄素对J2毒杀作用较弱但对卵孵化抑制作用较强;黄豆苷对J2和卵孵化作用效果最弱,但是其田间防效与染料木素无显著性差异。说明供试的6种异黄酮在不同浓度和条件下均对大豆胞囊线虫有抑制作用,以染料木素的综合效果最好。研究结果为解释大豆抗线虫侵染的机制及利用大豆异黄酮防治线虫病害奠定了理论基础。

两种滑刃亚目线虫的ITS-PCR-RFLP研究

采用ITS区通用引物对阿苏里伞滑刃线虫(Bursaphelenchus arthuri)和燕麦滑刃线虫(Aphelenchusavenae)的基因组DNA进行PCR扩增,对其PCR扩增产物进行序列测定分析,同时用5种限制性内切酶(RsaⅠ、HaeⅢ、MspⅠ、HinfⅠ和AluⅠ)对PCR扩增产物进行酶切,得到相应酶切图谱。两种线虫的DNA序列测定分析以及ITS-RFLP酶切图谱得到的鉴定结果与形态鉴定结果一致。试验得到的阿苏里伞滑刃线虫和燕麦滑刃线虫ITS-RFLP酶切图谱可以为线虫的分子鉴定提供参考。