体外非接触性共培养对MSC向软骨细胞诱导分化的实验观察

目的:探讨骨髓基质干细胞(MSCs)与软骨细胞体外非接触性共培养成软骨的可行性。方法:分离、培养、扩传兔MSCs及软骨细胞,MSCs以1×105个/ml接种于共培养板内孔,第1代软骨细胞以1×104个/ml接种于共培养板外空板。48h后将内孔插如外孔中,补充全培养基覆盖于MSC细胞层上。以相同密度MSC单独培养为空白对照,观察共培养7d和14d流式细胞仪观察MSC的Ⅱ型胶原蛋白变化情况。结果:实验空白组在7d和14d,Ⅱ型胶原蛋白均阴性表达,符合MSC特性。非接触共培养1周后,Ⅱ型胶原蛋白阳性表达,与空白对照比较,P<0.01,具有统计学意义;非接触共培养2周后,Ⅱ型胶原蛋白也阳性表达,与空白对照比较,P<0.01,同样具有统计学意义;实验14d组与实验7d组比较,P<0.01,具有非常显著性差异。结论:软骨微环境在MSCs成软骨分化及体内软骨形成中具有重要作用,软骨细胞能有效地诱导MSCs向软骨细胞分化并促进MSCs体内软骨形成。

兔骨髓间充质干细胞定向诱导移植修复关节软骨的实验研究

目的:通过诱导兔骨髓间充质干细胞(MSCs),观察干细胞向软骨细胞的分化效果。方法:纯化兔骨髓间充质干细胞;用含转化生长因子β1的诱导液培养骨髓间充质干细胞;以MTT测定诱导细胞的增殖活性;免疫组化检测Ⅱ型胶原蛋白的表达;诱导后的细胞移植于白兔膝关节内,X线摄片观察软骨修复形成情况。结果:诱导液可有效诱导MSCs向软骨细胞表型转化,且骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化所需的特异性细胞外基质——Ⅱ型胶原明显升高,移植后效果明显。结论:兔骨髓间充质干细胞定向诱导后移植修复关节软骨是有效的。因此骨髓间充质干细胞有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源。

人工髋关节置换后的深静脉血栓形成:发生因素及其预防策略

目的:近年来有关人工髋关节置换后深静脉血栓形成的研究很多。文章总结人工髋关节置换后深静脉血栓形成的因素及预防措施。方法:由第一作者应用计算机检索维普数据库(http://www.cqvip.com/)与髋关节置换后深静脉血栓发生有关的文献,检索时限为1994-01/2009-10。检索关键词:髋关节置换,深静脉血栓。纳入标准:①髋关节置换后深静脉血栓形成因素。②深静脉血栓形成的诊断标准及诊断方法。③预防人工髋关节置换后深静脉血栓发生的措施。排除标准:重复研究或较陈旧文章。依据纳入排除标准共保留相关文献25篇。结果:目前国内外对于人工髋关节置换后下肢深静脉血栓形成的发病机制与危险因素基本已达成一致意见,发病机制主要有:血液高凝状态、静脉血流缓慢(或郁滞)、血管壁的损伤。高龄、心脑血管病、静脉曲张或静脉手术是并发深静脉血栓的危险因素。人工髋关节置换后深静脉血栓的预防性治疗主要有机械性和药物性预防两种方法,机械性疗法无药物不良反应,易被患者接受,但对高风险患者治疗效果尚不能肯定,需结合药物预防性治疗以获得较确切的治疗效果。低分子肝素已成为人们预防术后深静脉血栓形成的首选药物,是目前最常用、效果最可靠的手段。结论:对人工关节置换后深静脉血栓的影响因素和预防性治疗已受到医务界的极大关注,掌握人工髋关节置换后发生深静脉血栓的发生机制、相关因素以及预防措施等知识,对降低深静脉血栓的发生率有重要意义。

全髋关节置换后血清炎性因子表达及深静脉血栓形成57例分析

为观察全髋关节置换后早期肿瘤坏死因子α、白细胞介素1、白细胞介素6水平的变化,及其与深静脉血栓形成的关系,选择2005-01/2007-12行全髋关节置换的57例患者,应用彩色多普勒超声检查下肢深静脉血流通畅情况,采用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1,6的浓度。结果全髋关节置换中超声检查发现25例形成深静脉血栓,32例未发现静脉血栓;置换后1,3d,形成血栓的25例患者血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1,6的表达均明显高于未发现静脉血栓患者(P<0.05或0.01)。提示全髋关节置换后,深静脉血栓形成患者早期相关血浆炎症细胞因子的表达增强,可能与深静脉血栓形成有关。

骨髓间充质干细胞定向诱导移植修复关节软骨(英文)

背景:骨髓间充质干细胞在不同诱导条件下具有向中胚层组织细胞如成骨细胞、成软骨细胞、肌细胞、脂肪细胞等分化的能力。目的:验证用组织工程方法诱导分化骨髓间充质干细胞修复兔关节软骨损伤的效果。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-05-03/2007-12-30在沈阳医学院临床中心实验室完成。材料:20只两三月龄的健康新西兰白兔,雌雄不限。方法:①诱导分化体外培养的兔骨髓间充质干细胞。实验组加入地塞米松、碱性成纤维细胞生长因子、维生素C培养1周,再将转化生长因子β替换碱性成纤维细胞生长因子培养3周;以不加诱导剂细胞做对照。②取20只兔,建立膝关节软骨缺损模型,随机分为3组。实验组10只膝关节内植入经诱导的骨髓间充质干细胞;对照组植入未经诱导的骨髓间充质干细胞;空白对照组植入生理盐水。分别于术后2,4,6,8周时处死实验组处死2只,对照组和空白对照组各处死1只进行各项指标检测。主要观察指标:①细胞形态学。②碱性磷酸酶活性的测定。③大体标本观察。④X射线观察。⑤组织切片观察。结果:①经诱导的骨髓间充质干细胞,细胞形态发生明显变化,逐渐由长梭形变为多角形,类似于软骨细胞样形态。②骨髓间充质干细胞经诱导4周后,其碱性磷酸酶活性明显增强(P<0.05)。③术后8周,实验组标本修复组织表面光滑,与周围软骨间界限模糊不清;X射线表现为关节间隙变宽,软骨下骨质囊变得到改善;组织切片观察显示与正常软骨细胞基本上一致。结论:自体间充质干细胞移植可修复关节软骨损伤。

自体脾移植18例免疫功能监测

选择2006-01/2008-09沈阳医学院奉天医院普通外科收治的脾破裂行脾切除辅加自体脾片移植患者18例,其中车祸伤15例,坠跌伤2例,刺伤1例。移植后0.5～3年随访观察患者上呼吸道感染情况,应用散射比浊法测定IgG,IgM,IgA和C3水平。发生感染8例,感染率44.4%,IgG,IgA,IgM、补体C3从脾切除后低水平状态逐渐上升至正常。说明脾切除后自体脾组织移植能够维持一定的免疫功能,在预防感染方面也有一定作用。

骨髓间充质干细胞在诱导液条件下向软骨细胞的定向诱导分化

背景:骨髓间充质干细胞易于从骨髓中分离,来源取材方便,对供体损伤小,具有强大的增殖能力及多向分化潜能,便于自体移植,如能成功诱导为软骨细胞将是软骨组织工程理想的种子细胞。目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的定向分化,并对分化后细胞进行鉴定。设计、时间及地点:细胞形态学、蛋白质组学的比较观察于2005-05-03/2007-12-30在沈阳医学院临床中心实验室完成。材料:骨髓间充质干细胞来源于二三个月龄新西兰健康大白兔,体质量2～2.5kg。方法:采用全骨髓法分离培养兔骨髓间充质干细胞。取生长良好的细胞第4代细胞消化传代,以1×105密度接种于24孔板中将生长状态良好的细胞在含有地塞米松、碱性成纤维细胞生长因子、维生素C及转化生长因子β的培养液中诱导分化。主要观察指标:采用免疫组化的方法进行细胞鉴定,RT-PCR法检测诱导分化细胞II型胶原的表达。结果:骨髓间充质干细胞经成骨诱导后,由长梭形变为椭圆形及肾形。免疫组织化学方法显示所培养间充质干细胞不表达CD34、CD45,但CD105显阳性。骨髓间充质干细胞在未经诱导时不表达Ⅱ型胶原蛋白,经诱导后在500～750bp之间可见明显条带。结论:骨髓间充质干细胞经含地塞米松、碱性成纤维细胞生长因子维生素C及转化生长因子β等培养液诱导后,可以在体外向软骨细胞转化,高表达Ⅱ型胶原,并经细胞形态学及蛋白质组学RNA水平鉴定验证。

基于情景模拟教学的护生核心能力培养策略研究

目的探讨将情景模拟教学应用在护生核心能力培养中的策略。方法将2019级171名护理本科生作为研究组,2018级174名护理本科生作为对照组,将情景模拟教学法在研究组护生中进行实施,同时将传统教学法在对照组护生中进行实施。对课程的总成绩进行比较,并采用护生核心能力量表进行调查。结果研究组的总成绩、护生核心能力得分均高于对照组(P<0.05)。结论情景模拟教学法优于传统教学法,能够提高学生的成绩及护生核心能力,其教学效果明显提高,可开展应用。

冠状动脉支架材料与置入后炎症因子的变化

目的:总结冠状动脉支架材料及置入后炎症因子变化的关系。方法:以"冠状动脉支架,生物相容性,炎症因子,细胞因子,血栓"为关键词,采用计算机检索万方数据网1998-01/2010-12相关文章。纳入冠状动脉支架置入后炎症因子水平变化方面的文献,排除重复研究或Mata分析类文章。结果:冠状动脉内支架置入有可能会引起冠状动脉血管的损伤,促进体内细胞释放炎症因子,通过炎症因子和细胞因子的表达,能很好的反映支架置入后局部血管损伤程度和炎症水平。药物涂层支架能够显著降低支架置入后再狭窄发生率及靶病变再次血运重建率,但显著增加晚期支架血栓形成。通过凝血系统各因子水平评估,药物涂层支架置入前后充分地抗血小板治疗能够降低支架血栓的发生。结论:支架置入体内后与血液及血管壁接触可产生炎症和致敏反应,因此支架置入前后应充分控制炎症状态和抗凝血治疗。

缬沙坦对特发性心房颤动患者心房重构的影响

目的评价缬沙坦联合小剂量胺碘酮对特发性心房颤动患者P波离散度（Pd）和左房内径（LAD）的影响。方法将96例特发性心房颤动患者随机分为观察组（联合应用缬沙坦和胺碘酮）和对照组（单用胺碘酮），治疗12个月。研究的一级终点为心房颤动复发。比较两组治疗前和治疗后6、12个月的Pd、LAD及窦性心律维持率。结果两组患者治疗前Pd比较差异无统计学意义，治疗后6、12个月两组患者Pd均较治疗前明显减少（P〈0．01）；两组患者治疗后6个月LAD比较差异无统计学意义，治疗后12个月对照组[（37．7±1．6）mm]显著高于观察组[（35．9±1．3）mm]（P〈0．05）；两组患者治疗后6个月窦性心律维持率比较差异无统计学意义，治疗后12个月观察组显著高于对照组（P〈0．05）。结论联合应用缬沙坦和胺碘酮治疗特发性心房颤动较单用胺碘酮能更有效地减少心房颤动复发，此种效应可能与缬沙坦改善心房重构有关。

MSCs定向诱导移植修复关节软骨的实验研究

目的用组织工程方法修复软骨损伤。方法兔骨髓间充质干细胞体外扩增诱导分化后,移植于兔关节损伤区,术后进行大体及x线观察。结果实验组移植8周后,软骨损伤区由透明软骨样组织填充,软骨修复良好。结论自体间充质干细胞移植可修复关节软骨损伤。