HPLC测定匹多莫德口腔崩解片的含量

采用DiamonsilC18色谱柱(250×46mm5μ),流动相为0.01mol/L磷酸二氢钠-甲醇-异丙醇(97∶2∶1),检测波长210nm,HPLC法测定匹多莫德口腔崩解片含量。匹多莫德口腔崩解片检测量在2—3μg范围内,峰面积与检测量呈良好的线性关系(r=1),平均回收率为98.5%。本法简便,专属性及重复性好,可用于匹多莫德口腔崩解片的含量测定。

依昔苯酮的药效学研究

目的 :观察依昔苯酮 (exifone ,Exf)对实验动物的药效学作用。方法 :双线结扎大鼠双侧颈总动脉 ,检测急性不完全性脑缺血大鼠的脑指数 ,脑含水量 ;比色测定大鼠脑内伊文思蓝含量 ;观察Exf对大鼠脑毛细血管通透性的影响 ;跳台试验观察Exf对小鼠学习记忆的影响。结果 :Exf能明显减轻大鼠实验性脑缺血所引起的脑指数 ,脑含水量和脑毛细血管通透性增高的病理改变。并增强小鼠学习记忆功能。结论 :Exf具有增加脑血流量 。

小鼠皮肤损伤修复过程中白细胞介素1α和白细胞介素1β变化与损伤时间的关系

目的：研究表明，细胞因子在各种炎症反应、损伤修复及细胞突变过程中发挥着重要作用，并且有望成为推断损伤时间新的有效指标。实验拟验证皮肤损伤后损伤区组织内不同时间白细胞介素1α和白细胞介素1β基因表达的变化及其与损伤时间的关系。方法：实验于2006-03／2007-12在中国刑警学院法医系实验室完成。①实验材料：清洁级BALB／c纯系雄性小白鼠35只，体质量25～27g。②实验方法：建立动物皮肤损伤模型，在脊柱两侧1．0cm处，左右对称各做一处皮肤缺损损伤，损伤不伤及肌肉，每只鼠做3对损伤。损伤后分别在0，3，6，12h，1，3，6d（0h作为对照）取5只动物麻醉断头处死。③实验评估：免疫组织化学染色后，显微镜下观察不同时间点白细胞的变化，实时定量聚合酶链反应检测白细胞介素1α和白细胞介素1β两种炎症因子的基因表达。结果：纳入BALB／c纯系雄性小白鼠35只，均进入结果分析。①伤后0-5h，皮肤创缘呈弱阳性反应；伤后6-24h，表皮阳性反应减弱，创伤局部以巨噬细胞为主的阳性细胞逐渐增多。伤后1d可见嗜中性白细胞大量浸润及少量单核细胞；伤后2～4d，单核细胞数目逐渐增加，3d达高峰。对照组皮肤表皮、毛囊、皮脂腺和汗腺均呈弱阳性反应。②皮肤损伤后在早期可诱导白细胞介素1α和白细胞介素1β的基因表达，6h达第一次高峰，24h下降，第3天再次出现高峰，第6天下降至正常水平。结论：损伤组织中白细胞介素1α和白细胞介素1β的基因表达随伤后不同时间呈现一定规律性变化，可为法医学案例早期损伤时间的推断提供参考。

有机磷杀虫剂对M2受体磷酸化的影响

目的研究有机磷类杀虫剂对G蛋白结合受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响和可能存在的其他作用途径。方法将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果。结果氧毒死蜱完全抑制m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为(IC50)70μmol/L;毒死蜱也抑制m2受体的磷酸化,而对氧磷与对硫磷不抑制m2受体的磷酸化。结论不同的有机磷杀虫剂对m2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断m2受体的磷酸化,提示有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他途径。

自行构建人类白细胞抗原DQA1位点基因分型寡核苷酸芯片性能评价:100例样本与PCR-SSP法的比较

背景:人类白细胞抗原等位基因分型对器官移植和法医鉴定等有重要意义。目前的分型方法难以实现高通量和集成化,准确性和重复性也不理想。目的:比较自行构建的寡核苷酸芯片与序列特异性引物-聚合酶链反应(polymerase chain reaction with sequence-specific primers,PCR-SSP)两种方法用于人类白细胞抗原DQA1基因分型的结果,以评价寡核苷酸芯片的性能。方法:纳入2006-01/2009-03于中国医科大学附属第一医院血液科门诊就诊的患者100例。分别用等位基因特异的PCR-SSP和自行构建的寡核苷酸芯片对患者的人类白细胞抗原DQA1进行分型。寡核苷酸芯片分型采用荧光标记的组间特异性引物扩增基因组DNA,扩增后的产物与分型芯片的探针杂交,由杂交产生的荧光信号确定人类白细胞抗原DQA1位点基因型。比较两种方法分型所获得的结果,不吻合的样本经第三方测序验证。结果与结论:100例临床样本经寡核苷酸芯片和PCR-SSP分型全部成功。分型结果的吻合率为94%。不吻合样本6例,其中4例PCR-SSP定型为杂合子,芯片分型全部为纯合子。经第三方验证,证实芯片的分型全部正确。另外2例不吻合的样本经测序,证实SSP分型错误1例,芯片分型错误1例。芯片的重复率为95%。说明自行构建的寡核苷酸芯片的特异性和灵敏度都能满足基因分型的需要,且稳定性较好。

HPLC法测定利福昔明干混悬剂的含量

采用Kromasil-C8色谱柱(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0mol/L枸橼酸溶液(60∶26∶4),检测波长254nm,HPLC法测定利福昔明干混悬剂含量。利福昔明干混悬剂在0.048—0.160(mg/mL)浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.9%。本法简便,专属性及重复性好,可用于利福昔明干混悬剂的含量测定。

依昔苯酮对大鼠血液流变性的影响

目的：观察依昔苯酮（Ｅｘｉｆｏｎｅ，Ｅｘｆ）对大鼠血栓形成及血液流变学各 项指标的影响。方法：用颈动、静脉旁路法观察Ｅｘｆ对大鼠实验性血栓形成的作用； 用肾上腺素加冰水法观察了Ｅｘｆ对大鼠血液流变学１０项指标的影响。结果： Ｅｘｆ ５４ｍｇ／ｋｇ灌胃给药后对大鼠血栓形成有明显抑制作用。与空白对照组比有显著差 异（Ｐ＜０．０１）。而对血液流变学１０项指标也有不同的改善作用，与血瘀模型组比 较有较显著差异（Ｐ＜０．０５－０．０１）。结论：Ｅｘｆ具有抗大鼠实验性血栓形成作用，并 能改善血液流变学多项指标。