糖尿病早期大鼠坐骨神经形态学的实验研究

目的:研究糖尿病早期大鼠周围神经形态学变化,为糖尿病周围神经病变动物模型的确立提供客观依据。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠建立糖尿病模型(DM),光镜及电镜下观察大鼠6周末坐骨神经病理形态学变化,并对坐骨神经横切面进行定量分析。结果:DM大鼠6周时坐骨神经出现明显的病理损害。光镜下见坐骨神经有髓鞘神经纤维空泡样变性、轴索肿胀。电镜下见严重脱鞘改变。病理图像分析结果与电镜结果相符。结论:STZ诱导大鼠早期已出现明显的周围神经损害,符合糖尿病周围神经病变(DPN)的病理特点,说明DPN模型建立成功。

大鼠肌卫星细胞移植失神经骨骼肌的形态学观测

目的探讨大鼠肌卫星细胞移植能否延缓失神经骨骼肌萎缩。方法将16只成年Wistar大鼠分为实验组与对照组,两组均切断大鼠右后肢胫神经,建立腓肠肌失神经动物模型。实验组:将体外培养的同种异体肌卫星细胞悬液0.2 mL缓慢注射到失神经腓肠肌内、外侧头中;对照组:则缓慢注射等量的生理盐水于相同部位。术后第4周,采用肌湿重、肌纤维横截面积形态学观测的方法,检测失神经骨骼肌的萎缩变化情况。结果成功地对成年大鼠肌卫星细胞进行了分离、纯化、鉴定、培养和移植。发现实验组与对照组相比,失神经腓肠肌湿重残存率(由手术侧与自身健侧的肌湿重测定值之比得出):实验组为0.48±0.050,对照组为0.33±0.059,二者存在显著性差异(P<0.01);腓肠肌纤维横截面积残存率(由手术侧与自身健侧的肌纤维横截面积测定值之比得出):实验组为0.58±0.011,对照组为0.50±0.018,二者存在显著性差异(P<0.01)。结论本实验表明将肌卫星细胞异体移植到失神经骨骼肌内可明显延缓骨骼肌的萎缩进程,为再生神经到达靶器官提供较多的时间,进而为解决再生神经延伸到靶器官前,靶器官已发生不可逆性萎缩,严重制约再生神经效果的临床难题提供一个新的研究思路。

缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在前列腺增生和癌变组织中的表达及对判断预后的意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及血管内皮生长因子(vascular endothekial-growth factor,VEGF)在前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和前列腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测40例BPH及40例前列腺癌中HIF-1α、VEGF表达情况。结果:HIF-1α在正常组织中不表达,在BPH中表达率为60%,在前列腺癌中的表达率为75%,且与前列腺癌的分期有关(P<0.01)。VEGF在正常组织中不表达,在BPH中表达率为20%,在前列腺癌中的表达率为80%,且与前列腺癌的分期有关(P<0.01)。前列腺癌组织中HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.654,P<0.01)。结论:HIF-1α、VEGF的异常表达在BPH和癌变的发病中起重要的作用,可以作为判断前列腺癌临床分期和预后的重要指标。

缺氧诱导因子-1α及P53蛋白在前列腺增生和癌变组织中的表达及对判断预后的意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及P53蛋白在前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)及前列腺癌中的表达情况及两者在前列腺癌发病中的作用及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例BPH、40例前列腺癌及10例正常前列腺组织中P53及HIF-1α表达情况。结果:P53在正常前列腺组织中不表达,在BPH、癌性前列腺组织中阳性表达率分别为10%(4/40)、80%(32/40),其在BPH组织中表达率高于正常前列腺组织(P<0.05),前列腺癌组织中表达率高于BPH组织(P<0.05)。HIF-1α在正常前列腺组织中不表达,在BPH、癌性前列腺组织中的阳性表达率分别为40%(16/40)、75%(30/40),在BPH组织中表达率高于正常前列腺组织(P<0.05),前列腺癌组织中表达率高于BPH组织(P<0.05)。P53、HIF-1α与前列腺癌的分期有关(P<0.01)。前列腺癌组织中HIF-1α与P53表达呈正相关(r=0.648)。结论:HIF-1α、P53的异常表达在BPH和癌变的发病中起重要的作用。它们可以作为判断前列腺癌临床分期和预后的重要指标。

碱性成纤维细胞生长因子调节脑缺血再灌注大鼠海马及顶叶皮质神经元β-Catenin的表达

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元β-Catenin的调节作用及机制。方法:应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h再灌注损伤24h,采用TUNEL法、免疫组织化学SABC法及显微图像分析检测海马及顶叶皮质内神经元凋亡和β-Catenin的表达。结果:大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加而β-Catenin免疫阳性反应产物较正常组增加,注射bFGF后神经元凋亡数减少,β-Catenin免疫阳性反应产物明显多于缺血再灌注组。结论:bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与β-Catenin的调节,对缺血神经元有保护作用。

中西医结合脱毒治疗的分析研究

目的评价中西医结合脱毒治疗的临床疗效。方法通过计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、维普科技期刊全文数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM),收集国内有关中西医结合脱毒治疗试验的相关研究。在严格进行评价质量的基础上,使用Rev Man4.2软件对符合条件的研究进行数据分析。结果经过筛选后,共有6篇文献,1078例患者满足纳入标准。与对照组比较,治疗组有效率的合并检验分析结果为:Z=6.91,P<0.01,合并后的OR值为5.29,95%CI为(3.30,8.48)。结论分析结果显示中西医结合脱毒治疗是一种有效的治疗药物依赖的方法。

大鼠肌卫星细胞移植对失神经骨骼肌张力的影响

目的探讨大鼠肌卫星细胞移植能否延缓失神经骨骼肌萎缩。方法将16只成年Wistar大鼠分为实验组与对照组,两组均切断大鼠右后肢胫神经,建立腓肠肌失神经动物模型。实验组:将体外培养的同种异体肌卫星细胞悬液注射到失神经腓肠肌内;对照组:则注射等量的生理盐水于相同部位。术后第4周,采用电刺激方法,检测失神经骨骼肌的张力变化情况。结果实验组与对照组相比,失神经腓肠肌收缩张力的差异有统计学意义。结论本实验表明将肌卫星细胞异体移植到失神经骨骼肌内可明显延缓骨骼肌的萎缩进程,为再生神经到达靶器官提供较多的时间,进而为解决再生神经延伸到靶器官前,靶器官已发生不可逆性萎缩,严重制约再生神经效果的临床难题提供一个新的研究思路。

从石蜡包埋组织中提取DNA的方法探讨

目的探讨从石蜡包埋组织中提取DNA的方法。方法选取2010年10月至2011年4月于沈阳医学院沈洲医院采集的160例活检组织标本,提取出组织的DNA,石蜡包埋,然后进行PCR扩增,对扩增的例数行统计分析。结果从160例活检组织标本提取的DNA,成功检出154例,未检出6例,分别为膀胱癌检出率100%,淋巴瘤成功率为95.8%,胃癌成功率为97.8%,宫颈癌成功率为90.9%,胃炎成功率为87.5%。检出例数明显高于未检出例数,P<0.05,有显著性差异。结论采取从石蜡包埋组织中是一种临床常用的提取DNA的方法,严格按照规定操作可以提高其检出率。

离心漂浮物石蜡切片法在肺泡灌洗液中的应用

肺泡灌洗液脱落细胞检查是诊断肺内恶性肿瘤和肺泡蛋白沉积症最简便、直接的方法之一。但由于送检的肺泡灌洗液量少、清亮,离心后的沉淀物很少,制成的传统涂片或石蜡切片在显微镜下常常找不到细胞,而阳性率很低,

G蛋白β、γ亚基对M2受体的磷酸化的影响

目的:探讨G蛋白β、γ亚基在调节G蛋白偶联受体激酶活性的重要作用和G蛋白β、γ亚基影响M2受体磷酸化新的作用机制。方法:利用四个柱层析分离G蛋白α亚基与G蛋白β、γ亚基;将纯化的G蛋白β、γ亚基、GRK-2,[γ-P32]标记的ATP与mAChR2,共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。结果:G蛋白β、γ亚基在没有激动剂存在的情况下明显增强M2受体的磷酸化。氨甲酰胆碱明显增强M2受体的磷酸化,阿托品或肝素(GRK2抑制剂)完全阻断M2受体的磷酸化。M2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,这种依赖关系呈明显的剂量关系。结论:G蛋白β、γ亚基是通过上调GRK2活性增强M2受体的磷酸化的。说明Gβγ同Gα一样均可引起效应蛋白的激活,在细胞信号转导中起同样重要作用,共同介导一系列的生物学效应。

有机磷类杀虫剂与毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化

目的探讨有机磷类杀虫剂对大鼠脑G蛋白偶联受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响。方法采用亲和层析法从大鼠脑组织纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体或β-肾上腺素受体、G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p^（32）]ATP与对氧磷（PO）、氧毒死蜱（CPO）共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。结果氧毒死蜱完全抑制大鼠脑M2受体的磷酸化,其半数抑制浓度（IC_（50））为70μmol/L;对氧磷不抑制M2受体的磷酸化;氧毒死蜱和对氧磷都不抑制β-肾上腺素受体的磷酸化。结论氧毒死蜱可选择性地抑制大鼠脑M2受体的磷酸化;某些有机磷杀虫剂存在其他靶分子或作用途径。

改良的脑卒中后抑郁大鼠模型的建立

脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）约占脑卒中患者的1／3，是指脑卒中后出现以快感缺失为核心症状的不同程度的抑郁状态，且症状持续14d以上，患者中5—25％表现为忧郁（melancholia）。75～95％表现为抑郁（depression。PSD轻者可见食欲丧失、体重偏轻、信心缺乏、睡眠紊乱和早醒；

先天性马蹄内翻足患儿的功能训练

先天性马蹄足也叫做“垂足”、或者“尖足”，是一种发育性过程中的畸形，一出生的孩子就可能发现，是脑瘫的一种表现形式。大多是脑发育不全造成的，往往提示新生儿缺氧缺血性脑病、宫内发育异常、早产等多种因素引起的运动及姿势异常。马蹄足是单删发生或双删发生，发育过程中，部分韧带或肌腱的发育不正常，未能与整个足的发育保持平衡。而且它们导致足骨处于异常的位置。使足的后内侧被向下牵拉、扭转，最终足部僵硬，且不能回到正常位置。如能早期适当处理，大多可获较好的畸形矫治，如不治疗，则将终生残疾，影响生沂和工作。先天性马蹄内翻畸形的真正病因迄今不清。