有机磷类杀虫剂存在其他作用靶分子

目的:研究有机磷类杀虫剂对大鼠脑G蛋白偶联受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响,揭示有机磷类杀虫剂存在的其他作用靶分子或作用途径。方法:制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱m2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果。结果:氧毒死蜱完全抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为(IC50)70μmol/L;对氧磷不抑制m2受体的磷酸化;氧毒死蜱和对氧磷都不抑制β-肾上腺素受体的磷酸化。结论:氧毒死蜱有选择性地抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,说明某些有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他靶分子或作用途径。

有机磷类杀虫剂对毒蕈碱乙酰胆碱M_2受体磷酸化的影响

目的:研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响,进一步揭示有机磷类杀虫剂可能存在的其他作用途径。方法:利用亲和层析方法从猪脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p32]标记的ATP与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。之后将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化M2受体蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数。结果:氧毒死蜱(CPO)完全抑制毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化,其IC50为70μM;毒死蜱(CPF)也抑制M2受体的磷酸化,而对氧磷(PO)与对硫磷(parath ion)不抑制M2受体的磷酸化。结论:不同的OPs对GRK2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断M2受体的磷酸化,提示OPs的毒性作用存在其他的可能作用途径。

Aroclor1254对雄性大鼠的生殖毒性效应

目的探讨Aroclor1254对成年雄性大鼠的生殖毒性效应。方法将90 d的成年雄性SD大鼠(体质量250~300 g)随机分为溶剂对照组和Aroclor1254低、中、高剂量(1、3、5 mg/kg)组,每组8只。采用腹腔注射法连续给药,制备SD大鼠生精障碍模型,溶剂对照组给予等体积玉米油,给药30 d后麻醉处死大鼠,记录各组大鼠体质量、睾丸和附睾质量,计算睾丸和附睾器官系数并检测各组大鼠给药后精子数。采用苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理学变化。结果与溶剂对照组比较,Aroclor1254低、中、高剂量组大鼠的体质量、睾丸和附睾质量、睾丸和附睾器官系数、精子计数均随剂量升高而降低,以高剂量组降低最多〔体质量(g):278.32±5.60比301.05±4.35,睾丸质量(g):1.39±0.08比1.66±0.04,附睾质量(g):0.35±0.07比0.54±0.05,睾丸器官系数:(5.00±0.25)%比(5.51±0.10)%,附睾器官系数:(1.20±0.24)%比(1.80±0.22)%,精子计数(×10^(6)个):11.50±1.06比19.50±2.92,均P<0.05〕。Aroclor1254处理组大鼠生精小管结构破坏、排列紊乱、两生精小管间质细胞减少,且随剂量升高症状加重。结论Aroclor1254暴露可能通过破坏血睾屏障的完整性损伤大鼠生殖功能。

有机磷杀虫剂体外对乙酰胆碱M2受体磷酸化抑制的研究

目的研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK-2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体(mAChR2)磷酸化的影响,进一步揭示OPs可能存在的其他作用途径。方法利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化mAChR2；将纯化的大鼠脑mAChR2、GRK-2、同位素磷32标记的三磷酸腺苷([γ-^(32)P] ATP)与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)和毒死蜱(CPF)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测mAChR2磷酸化结果。将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化mAChR2蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数。结果CPO抑制大鼠脑mAChR2的磷酸化,其IC_(50)为70μmol/L；CPF也抑制mAChR2的磷酸化,而PO与对硫磷(PT)不抑制mAChR2的磷酸化。CPO和CPF并不抑制同样由GRK2介导的β_2肾上腺素受体(β_2-AR)的磷酸化。结论CPO和CPF选择性地抑制GRK-2介导的mAChR2磷酸化,而PO和PT无此效应。