创新实验装置,提高机能学实验成功率

根据机能实验学“蟾蜍心脏功能实验”的原理，选用适当材料研制由固定构件、灌流系统、描记装置、手术板等组成的、四位一体的“在体蟾蜍心脏恒压灌流实验装置”，并使其具有性能稳定，功能齐全、经济实用、美观大方、环保安全、节省空间等特点，提高实验成功率，填补国内空白。

人参保心片抗应激性及对脑缺血作用的实验研究

目的:观察人参保心片对小鼠应激性反应及大鼠脑缺血低氧保护作用的影响。方法:采用常压耐低氧、抗疲劳游泳和脑缺血低氧实验检测小鼠存活时间,用双侧颈总动脉结扎法分别检测对大鼠实验性脑缺血的影响。结果:人参保心片能显著提高小鼠的抗低氧能力,延长游泳时间,降低脑缺血大鼠的脑指数。结论:人参保心片可提高机体抗应激反应能力,对脑缺血低氧具有保护作用。

血脉舒颗粒剂对小鼠抗炎镇痛作用的实验研究

目的:观察血脉舒颗粒剂对小鼠的抗炎及镇痛作用。方法:将昆明种小鼠随机分为5组,分别为空白对照组,血脉舒颗粒剂高、中、低剂量组和阿司匹林组。给小鼠灌胃(ig)给药5 d后,采用二甲苯致小鼠急性耳肿胀试验观察血脉舒颗粒剂的抗炎作用;采用醋酸扭体法和热板镇痛法观察血脉舒颗粒剂对小鼠的镇痛作用。结果:血脉舒颗粒剂中、高剂量组对于二甲苯所致的小鼠急性耳肿胀和有显著的抑制作用,对小鼠醋酸所致的扭体及热板法致痛反应有较好的止痛作用,镇痛疗效呈剂量依赖关系。结论:血脉舒颗粒剂具有显著的抗炎、止痛疗效。

阿魏酸川芎嗪抗血栓形成作用及其对血小板中性粒细胞黏附的影响

目的观察阿魏酸川芎嗪(LF)的抗血栓作用及其对血小板中性粒细胞黏附的影响,并探讨其可能机制。方法采用电刺激大鼠颈动脉血栓形成法和动静脉旁路法血栓形成法评价LF对血栓形成的对抗作用;运用玫瑰花结黏附试验观察LF对血小板中性粒细胞黏附的影响;采用流式细胞术法检测LF对血小板P-选择素(CD62p)表达的影响。结果 LF能明显抑制大鼠电刺激颈动脉法和动静脉旁路法引起的血栓形成;减少CD62p的表达;抑制血小板与中性粒细胞的黏附,其半数抑制浓度(IC50)为64.3μmol.L-1。结论 LF具有明显的抗血栓形成作用,减少CD62p的表达,从而阻抑血小板中性粒细胞黏附有关。

手术截断尾末端对小鼠疼痛反应昼夜节律的影响

将72只雌性小鼠尾末端2.5cm截断。随机将72只正常小鼠和72只断尾小鼠分别平均分成6组(每组12只),置于标准的明-暗周期下饲养2周后,用热板法分别于昼夜6个时间点测小鼠的痛反应,研究手术截断尾末端对小鼠疼痛反应昼夜节律的影响。结果发现,正常小鼠与断尾2周后小鼠对热板刺激的痛反应都存在明显的昼夜节律,与正常小鼠相比,断尾2周后小鼠痛觉敏感性存在明显的升高趋势。

CNQX对伤害性电刺激隐神经引起大鼠扣带回前部多巴胺含量变化的影响

目的研究谷氨酸AMPA/Kainate受体拮抗剂CNQX对伤害性电刺激隐神经引起大鼠扣带回前部(ACG)多巴胺含量变化的影响。方法用高效液相色谱-电化学检测技术研究伤害性电刺激隐神经后不同时间,ACG多巴胺含量的变化,以及静脉注射CNQX对多巴胺含量变化的影响。结果伤害性电刺激隐神经后15 min,ACG多巴胺含量显著增高,30 min后增高最明显,1 h后开始恢复,2 h后逐渐恢复接近对照水平;静脉注射CNQX拮抗了伤害性电刺激隐神经引起的ACG多巴胺含量的显著增高。结论伤害性电刺激隐神经能够引起ACG多巴胺含量呈时间依赖性增高,提示ACG接受隐神经伤害性信息的传入,引起ACG多巴胺能神经元功能活动增强。CNQX能拮抗伤害性电刺激隐神经引起的ACG多巴胺含量的增高,提示AMPA/Kainate受体参与隐神经伤害性信息传入引起的ACG多巴胺含量增高的过程。

CNQX对截断尾末端后小鼠痛反应变化的影响

目的研究谷氨酸受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(CNQX)对截断尾末端后小鼠痛反应变化的影响,为深入研究截肢后中枢的可塑性变化及幻肢痛产生机制提供理论依据。方法采用热板法分别于截断小鼠尾末端2.5cm前及截断后0.5h、1h、2h、3h、24h、168h(1周)测量断尾小鼠的痛阈,并观察尾静脉注射CNQX对断尾后小鼠痛阈变化的影响。结果与对照组及断尾前比较,小鼠断尾后0.5h、1h,痛阈无明显变化;小鼠断尾后2h,痛阈显著升高(P<0.01);断尾后3h,升高的痛阈开始恢复(P<0.05);断尾后24h、168h,小鼠痛阈基本恢复正常。CNQX拮抗了断尾诱发小鼠痛阈升高的反应。结论断尾后2～3h,小鼠后肢皮肤对温热性伤害刺激产生痛反应的阈值提高;谷氨酸AMPA/Kainate受体参与该痛阈提高的过程。

吗啡对电刺激隐神经诱发大鼠扣带回前部神经元c-fos基因表达的影响

目的观察躯体伤害性刺激能否引起大鼠扣带回前部(ACG)神经元c-fos基因表达的改变,探讨吗啡对该变化的影响。方法用免疫组化方法研究伤害性电刺激隐神经(SN)后不同时间ACG神经元c-fos基因表达的变化以及皮下注射吗啡对该变化的影响。结果伤害性电刺激SN后30minACG神经元Fos蛋白表达明显增加,60min增加最明显,120min后开始消退;皮下注射吗啡抑制了伤害性电刺激SN引起的ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加。结论伤害性电刺激SN能够引起ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加,这种表达呈时间依赖性;吗啡抑制了伤害性电刺激SN引起的ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加。提示ACG存有SN代表区,能够感受SN传入的伤害性信息。

断尾对小鼠血清褪黑素含量昼夜节律的影响

目的观察断尾对小鼠血清褪黑素含量昼夜节律的影响。方法分别随机将72只正常雌性小鼠和72只断尾(尾末端2.5 cm截断)雌性小鼠分成6组,每组12只,置于标准的明-暗周期下饲养2周后,分别于4:00,8:00,12:00,16:00,20:00及24:00迅速断头取血,用ELISA法测定血清中褪黑素含量。结果正常小鼠血清褪黑素含量存在明显的昼夜节律,明期褪黑素含量低,暗期褪黑素含量高,大约是明期的2.5倍。断尾2周后小鼠血清褪黑素含量也存在明显的昼夜节律,明期褪黑素含量低,暗期褪黑素含量高,大约是明期的1.8倍。结论正常小鼠与断尾2周后小鼠血清褪黑素含量都存在明显的昼夜节律,与正常小鼠相比,断尾2周后小鼠明期血清褪黑素含量明显升高,并且波动较大。

Caspase-3抑制药对甲基苯丙胺依赖大鼠脑组织NO和SOD及MDA的影响

目的观察Caspase-3抑制药对甲基苯丙胺(MA)慢性依赖大鼠脑组织损伤的干预与保护作用。方法建立MA慢性依赖大鼠实验动物模型,侧脑室注射Caspase-3抑制药(z-DEVD-fmk),检测各组大鼠脑组织海马区一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化及三者之间的关系。结果 MA慢性依赖组脑组织海马区NO、MDA明显升高,SOD含量减少;MA+z-DEVD-fmk干预组NO、MDA含量升高减少,SOD活性下降减弱,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Caspase-3抑制药能够降低MA慢性依赖大鼠脑组织海马区NO、MDA含量,并使SOD含量升高,对大鼠脑组织损伤有一定的干预与保护作用。

对高校研究室开放的实践与思考

实验教学是培养创新人才的一个重要实践环节,实验室开放是高校实验教学改革的重大举措,研究室开放是实验室开放的一部分,研究室开放具有较强的综合性和实践性,研究室开放对培养学生创新精神和实践能力起着不可替代的作用。随着教育体制改革的进一步深化,研究室全面开放也越来越受到人们的关注,但研究室开放真正做得好的高校并不多,整体水平不高,许多高校还处于探索和尝试阶段,在研究室开放过程中还面临很多的实际问题。本文结合沈阳医学院研究室的现状与近年来实施研究室开放的具体实践,阐述研究室开放的意义、研究室开放的模式、存在的问题及对策,并就如何培养学生的创新实践能力作进一步探讨。

剪切力对血管内皮细胞形态学变化的作用

目的:介绍血管内皮细胞在剪切力的作用下发生了形态学的变化,可直接影响内皮细胞的生理功能,并与血栓形成等疾病有一定关系。资料来源:应用计算机检索Medline1993-01/2004-01期间的关于剪切力的相关文章,检索词:“Deformability”和“endothelialcell”,限定文章语种类为英文;检索维普数据库1995-01/2004-01期间剪切力相关文章,检索词“剪切力”、“内皮细胞”和“细胞骨架”,限定语言种类为中文。资料选择:选择剪切力、血管内皮细胞、细胞骨架蛋白血液流变学的相关文献38篇。资料提炼:在38篇文献中,按剪切力与血管内皮细胞相关性研究的新观点进行提炼,对文献进行分类整理,用于综述,其中10篇选用为参考文献。资料综合:剪切力可使血管内皮细胞发生形态学改变。而这种变化影响细胞损伤后的再生。同时剪切力可改变内皮细胞生理功能,激活内皮细胞Ca2+通道、K通道,引起力化学信号转导。+结论:剪切力通过力化学信号转导途径,实现力化学转换,从而调节细胞的生理功能。这一生理功能改变可引起机体某些病理变化,最终导致血栓形成,从生物物理学观点阐明了剪切力与血栓形成的关系。

电刺激隐神经对大鼠脊髓c-fos基因表达的影响

目的:观察躯体伤害性刺激能否引起脊髓神经元细胞内c-fos基因表达的改变。方法:用免疫组化方法研究躯体伤害性电刺激隐神经后不同时间,脊髓神经元细胞内c-fos基因表达的变化。结果:伤害性电刺激隐神经能够引起脊髓神经元Fos蛋白表达的显著增加;伤害性电刺激隐神经后30min明显增加,60min增加最明显,120min后开始消退。结论:本研究证明伤害性电刺激隐神经能够引起脊髓神经元Fos蛋白表达的显著增加,这种表达呈时间依赖性。

止嗽立效颗粒对哮喘豚鼠气道变应性炎症的影响

目的:制备豚鼠哮喘模型,观察止嗽立效颗粒抗气道变应性炎症作用。方法:以卵蛋白致敏豚鼠为哮喘模型动物,灌胃给予不同剂量的止嗽立效颗粒,观察治疗后各组豚鼠外周血和肺胞灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞(EOS)计数和白细胞介素-5(IL-5)含量。结果:外周血中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量均比模型组显著降低(P<0.01);BALF中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量也均比模型组显著降低(P<0.01)。结论:止嗽立效颗粒具有抗哮喘豚鼠气道变应性炎症作用,其机制可能是降低机体IL-5的表达,并减少血液中EOS的数量。

MK-801及CNQX对尾末端截断后小鼠血清褪黑素含量变化的影响

目的观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)、α-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸(AMPA/Kainate)受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(CNQX)对尾末端截断后小鼠血清褪黑素(MLT)含量变化的影响,为进一步研究截肢后中枢的可塑性变化提供依据。方法用ELISA法测定尾末端2.5 cm截断后2 h小鼠血清MLT含量,并观察静脉注射MK-801、CNQX对断尾后小鼠血清MLT含量变化的影响。结果与对照组比较,断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;MK-801、CNQX分别拮抗断尾引起的小鼠血清MLT含量的降低。结论断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;NMDA受体、AMPA/Kainate受体参与断尾引起小鼠血清MLT含量降低的过程。

人参保心片对心绞痛患者疗效及血液流变学的影响

目的:观察人参保心片对冠心病心绞痛患者疗效及血液流变学的影响。方法:选择心绞痛患者40例,随机分为治疗组与对照组各20例。治疗组在常规治疗基础上均给予人参保心片,2粒/次,3次/d,4周为一疗程,共用药1个疗程。对照组为常规治疗,所有患者治疗前停用抗血小板聚集药物、抗凝及扩血管药物。于服药前3 d及服药4周后查患者血液流变学。结果:治疗组的临床有效率明显优于对照组,动态心电图心肌缺血时间定量有效率亦优于对照组,治疗组血液流变学指标治疗前后差异有统计学意义P<0.05。结论:人参保心片对冠心病心绞痛患者血液流变学有确切改善作用,值得临床推广应用。

大鼠海马结构CA1位置细胞对感觉错配适应的相关反应

目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法应用微电极细胞外记录方法,记录清醒大鼠在适应视觉-前庭-本体感觉错配条件后海马结构CA1位置细胞神经元放电情况。结果 56个位置细胞中,29个神经元在正向状态中有显著的空间放电(正向相关神经元),19个神经元在反向状态中有显著的空间放电(反向相关神经元)。位置野内放电频率的分布呈现不对称及负偏斜。结论大鼠海马结构位置细胞可编码不能自然发生的新的感觉输入配置,更新海马结构比较器内的信息。

柏连草根冲剂药效学研究

目的:研究柏连草根冲剂的解热、镇痛和抗炎作用。方法:用蛋白胨制备兔发热模型法研究其解热作用;用扭体法和热板法观察其镇痛作用;用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法和二甲苯致小鼠耳肿胀法研究其抗炎作用。结果:柏连草根冲剂能显著抑制蛋白胨所致体温升高;能明显减少小鼠的扭体次数,并显著延长小鼠的痛觉反应时间;能明显减轻小鼠耳肿胀及大鼠足跖肿胀反应。结论:柏连草根冲剂具有解热、镇痛和抗炎作用。

视觉-前庭感觉-本体感觉错配适应大鼠海马CA1区位置细胞的放电特征

目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1区位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法建立视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局,根据对海马结构齿状回θ节律的记录及其电功率的计算,获知大鼠适应该感觉冲突后,应用钨丝微电极细胞外记录方法,记录清醒大鼠在适应视觉-前庭感觉-本体感觉错配条件后海马CA1区位置细胞神经元集群放电情况。结果 56个位置细胞中,14个(25.0%)神经元在感觉正配及错配条件下均有位置稳定的空间放电(双向移动相关经验非依赖神经元),33个(58.9%)神经元在感觉正配及错配条件下依次出现位置不稳的空间放电(双向移动相关经验依赖神经元)。经验非依赖神经元的位置野长度及非对称指数的均值大于经验依赖型神经元,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。此外,位置野内放电频率的分布呈现出不对称及负偏斜。结论动物在适应自然情况下不可能出现的新的感觉配置后,海马结构能编码这一配置并能更新其储存的记忆,接受新的配置作为匹配状态。海马结构可能编码感觉输入的任何组合。

SFRP1基因沉默抑制人胃黏膜上皮GES-1细胞失巢凋亡

目的观察RNA干扰沉默分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)1基因对人胃黏膜上皮细胞(GES)-1失巢凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法应用SFRP1基因小干扰RNA(siRNA)转染处理GES-1后,分别采用Realtime RT-PCR和Western印迹检测SFRP1 mRNA和蛋白表达。细胞悬浮培养应用Poly-HEMA方法。采用流式细胞术和Calcein AM/EthD-1荧光双染法检测细胞失巢凋亡,软琼脂集落实验检测细胞非锚定生长状态,免疫荧光和Western印迹实验检测SFRP1沉默后Wnt通路中β-catenin的定位及表达,Realtime RT-PCR检测β-catenin靶基因c-Myc和CyclinD1 mRNA表达。结果与对照组比较,siRNA-891组中SFRP1 mRNA和蛋白表达明显被抑制。siRNA-891组细胞失巢凋亡率明显下降(P<0.05),EthD-1荧光染色的失巢凋亡细胞数目明显减少(P<0.05),软琼脂集落形成数目明显增多(P<0.05)。siRNA-891组中β-catenin蛋白表达水平明显增加,其靶基因c-Myc mRNA和CyclinD1 mRNA表达明显增高(P<0.01)。结论SFRP1siRNA可抑制GES-1细胞失巢凋亡,使其失巢凋亡敏感性下降,激活Wnt分子通路可能是其机制之一。