高原鼠兔和血液生化正常值测定

报道了驯化的高原鼠兔部分血液生化指标，并与实验家兔，大鼠和人的相应指标作了比较。高原鼠兔的血清白蛋白的百分含量高于人、大鼠及实验家兔；血清胆固醇明显低于人、大鼠及实验家兔。

NRDRiso酶cDNA的序列测定及生物信息学分析

通过鉴定分析人肝组织中辅酶II依赖性视黄醇脱氢酶不同剪接体全长cDNA核苷酸序列与氨基酸序列的结构特征 ,为今后进一步研究体内维甲酸的代谢情况奠定基础。根据人、小鼠NRDR编码区的一致性序列 ,设计一对引物 ,应用RT PCR方法从人肝组织中得到一条 377bp的新的cDNA片段。采用RACE法得到了NRDR新亚型cDNA ,并以生物信息学软件分析其生物学特征。测序得知该cDNA长为 1 0 0 3bp ,以NADP dependentretinoldehydroge nase reductaseshortisoform(NRDRiso)登录GenBank。其读码框为 5 2 5bp ,拟编码 1

Frankia与链霉菌融合子特性的研究

将Frankia菌株CcOl与金色链霉菌GL原生质体融合,得到3株融合子,均具有GL生长快的特性与CcOl的结瘤固氮能力.固体培养时,3株融合子呈现出与GL不同的颜色;且均具有Frankia菌的顶囊形态,以及链霉菌的链状孢子丝结构.与两亲本相同,3株融合子均对大肠杆菌有抗性,其中F4与GL的抗菌谱基本相同.在传10代之后,它们仍具有结瘤与固氮能力.血清学分析表明,F1与F6兼具两亲本的特异抗原,而F4仅具有GL的特异抗原,融合子F1、F6较F4在遗传上更为稳定.

五加皮、茜草、白芷对毒激素—L诱导的恶病质样表现抑制作用的实验研究

为探索抑制毒激素-L所诱导的恶病质样表现的有效方法,观察了毒激素-L对大鼠体内的FFA释放量、血糖、蛋白质、微量元素的水平及摄入行为的影响,同时对文献报道具抗瘤作用的50余味中药进行筛选,对作用明显的五加皮、白芷、茜草进行实验研究,并确定了中药五加皮、白芷及茜草的有效成分。实验结果表明毒激素-L组的FFA释放量明显高于正常组及中药组,而中药组与毒激素-L组的FFA释放量显著低于毒激素-L组(P<O.01);毒激素-L组的血糖水平显著低于正常组及中药组,而毒激素-L与中药组的血糖水平显著高于毒激素-L组(P<0.01);毒激素-L组的血锌及血铜水平与正常组及中药组相比明显下降及升高,而毒激素-L组与中药组的血锌及血铜明显升高及降低(P<0.01);毒激素-L组的大鼠摄食、摄水量与正常组及中药组比显著减少,而毒激素-L与中药组的大鼠的摄食摄水量与毒激素-L组比明显升高(P<0.01)。中药组与正常组比差异不显著(P>0.05)。由此提示中药对毒激素-L所致的恶病质样表现有明显抑制作用。

bFGF诱导人晶状体上皮细胞增殖过程中细胞外信号调节激酶的作用

目的:检测细胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)在碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导的人晶状体上皮细胞增殖过程中的表达与活化;检测ERK1/2特异性阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞增殖的影响。方法:人晶状体上皮细胞系SRA01/04体外培养,采用MTT比色法和[3H]-TdR掺入法检测ERK阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞活力和DNA合成的影响;Westernblot法测定bFGF对培养的人晶状体上皮细胞ERK,c-Jun氨基末端激酶(JNK),P38蛋白表达及PD98059对环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。结果:10μg/LbFGF能显著刺激人晶状体上皮细胞增生,1μmol/LPD98059即能显著抑制bFGF启动的HLEC增殖,其效应呈浓度依赖性(P<0.01)。10μg/LbFGF可激活ERK信号通路,诱导COX-2蛋白表达,其效应在30min内达到高峰,6h后逐渐减弱,此作用可被10μmol/LPD98059阻断;10μg/LbFGF对非磷酸化ERK,磷酸化和非磷酸化JNK及P38表达无明显影响。结论:有丝分裂原活性蛋白激酶信号传导通路中ERK磷酸化对bFGF启动的人晶状体上皮细胞增殖具有重要的调节作用。

人表皮细胞体外培养方法的改进

人表皮细胞体外培养方法的改进张慧敏郝振林＊王东霞＊（沈阳医学院附属中心医院医学实验科，烧伤科＊沈阳１１００２４）张志芬王连璞＊＊（沈阳医学院生化教研室，解剖教研室＊＊沈阳１１００３１）表皮细胞体外培养技术的建立和发展对于烧伤治疗、皮肤病学研究等方面，...

多媒体及网络技术在基础化学教学改革中的应用

将多媒体及网络技术应用于基础化学教学中,制作了部分教学多媒体课件,改变了传统的教学模式,教学形式多样化,特别是在学生利用文献知识方面有一定的探索,取得了一定的教学效果,并对未来进行了展望.

阿司匹林对体外培养的人晶状体上皮细胞凋亡调节基因表达的影响

目的:研究阿司匹林(Asp)对培养的人晶状体上皮细胞(humanlens epithelial cells,hLEC)Bax,Bcl-2,caspase-3表达的影响。方法:人晶状体上皮细胞系SRA01/04传代培养,MTT比色法检测Asp对bFGF诱导的hLEC增殖的影响;Western-blot方法检测Asp作用1,3,6,12,24h后凋亡相关因子Bcl-2,Bax,caspses-3蛋白的表达。结果:Asp5mmol/L可明显抑制bFGF诱导的hLEC增殖(P<0.01),且抑制作用呈浓度依赖性。Western-blot结果显示,10mmol/LAsp作用1h后Bax蛋白表达增强,随着时间的延长,表达逐渐增加,6h达到高峰,24h后恢复至基础水平;而Bcl-2的表达与其相反,Asp作用1h后Bcl-2蛋白表达明显下降,6h降到最低点,然后有上升趋势。caspase-3的表达与Bax相似,Asp作用1h后caspase-3表达增加,6h达到高峰,持续24h仍有较高的表达。结论:凋亡因子Bcl-2,Bax,caspase-3参与了Asp诱导的人晶状体上皮细胞凋亡途径。Asp通过调节凋亡基因蛋白产物的表达,诱导hLEC的凋亡。

阿司匹林对人晶状体上皮细胞增殖及环氧合酶-2表达的影响

目的检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)增殖过程中的表达,以及阿司匹林对COX-2表达及细胞增殖的抑制作用。方法HLEC系SRA01/04传代培养,MTT比色和[3H]-TdR掺入实验检测阿司匹林对bFGF诱导的HLEC增殖和DNA合成的影响;采用逆转录聚合酶链反应和Westernblot法检测阿司匹林对COX-2mRNA和蛋白表达的影响。结果显微镜下可见,随着阿司匹林浓度增加,细胞形态学的改变逐渐明显。5mmol.L-1、10mmol.L-1、20mmol.L-1阿司匹林可明显抑制bFGF诱导的HLEC增殖,吸光度值分别是0.3662±0.0644、0.2378±0.0295、0.1898±0.0198,对照组为0.5200±0.0184,3组与对照组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001),抑制作用呈浓度依赖性。[3H]-TdR掺入实验结果显示,阿司匹林对晶状体上皮细胞DNA合成具有抑制作用,药物浓度与[3H]-TdR掺入量呈负相关。逆转录聚合酶链反应及Westernblot结果提示10μg.L-1bFGF组电泳COX-2mRNA及蛋白呈阳性表达,10mmol.L-1阿司匹林与10μg.L-1bFGF共同作用组电泳未见有相应条带出现。结论阿司匹林能有效抑制bFGF诱导的HLEC的生长,这种作用可能是通过抑制COX-2的表达而实现的。

RPS12基因表达与胃癌进展及淋巴结转移的研究

目的探讨核糖体蛋白S12(RPS12)基因表达与胃癌进展及淋巴结转移的关系。方法采用原位杂交方法检测39例进展期胃癌组织、17例正常胃黏膜中RPS12mRNA表达。结果胃癌中RPS12mRNA表达阳性表达率(87.2%)显著高于正常胃黏膜(17.6%),P<0.01;淋巴结转移阳性的胃癌中RPS12mRNA表达阳性率(96.2%)显著高于淋巴结转移阴性者(69.2%),P<0.05。结论RPS12基因高表达与胃癌进展及淋巴结转移有关。

人胎肝细胞生长刺激物质与酪氨酸蛋白激酶的关系

利用从人胎肝提取的肝细胞生长刺激物质（ｈＨｓｓ），以小鼠肝细胞质膜蛋白作为受体及内源性底物，以Ｐｏｌｙ（ＧｌｕＮａ，Ｔｙｒ）４：１作为外源性底物，通过磷酸化实验，对ｈＨＳＳ的作用及其与酪氨酸蛋白激酶活性之间的关系进行了研究。利用抗酪氨酸磷酸酯抗体免疫沉淀法，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显形及液体闪烁计数等方法进行测定。结果证明：ｈＨＳＳ可刺激并增强肝细胞膜受体的酪氨酸蛋白激酶的活性，后者可使膜蛋白某些组分及外源性底物磷酸化增强；ｈＨＳＳ的作用与酪氨酸蛋白激酶的活性密切相关。

双胸蚓溶栓酶对体外培养的WISTAR胎鼠大脑神经元突起生长的影响

目的：探讨双胸蚓溶栓酶对神经元突起的影响及其作用机制。方法：应用神经元细胞体外培养技术观察了１～１０ ｄ内在不同剂量双胸蚓溶栓酶作用下的 Ｗｉｓｔａｒ胎鼠大脑神经元突起的生长发育过程。结果：不同剂量双胸蚓溶栓酶对神经元突起的数量和长度以及轴索的形态与增长均有影响。结论：双胸蚓溶栓酶对体外培养的胎鼠大脑神经元突起的生长发育有促进作用。

激光虹膜光凝术联合粘弹剂在新生血管性青光眼治疗中的应用

目的:探讨532nm激光行虹膜新生血管光凝术联合粘弹剂在小梁切除术中治疗新生血管性青光眼的作用。方法:对18例新生血管性青光眼先用532nm激光封闭虹膜表面血管,1wk后行小梁切除术,术中应用粘弹剂,观察降眼压效果,观察前房和滤过泡,随诊10mo。结果:术中18例前房均无大量出血,术后滤泡均呈弥散隆起。眼压:第1wk内1～5mmHg。2～4wk2～10mmHg,随诊期间眼压为6～12mmHg。结论:采用532nm激光直接封闭虹膜新生血管后再行小梁切除术,同时术中应用粘弹剂能避免发生前房大量出血,避免出血阻塞滤过口。提高了新生血管性青光眼手术治疗的成功率。为新生血管性青光眼治疗提供了一种经济有效的综合治疗方法。

α-苦瓜籽蛋白对体外培养人胚泡滋养层和蜕膜细胞的影响

通过观察α-苦瓜籽蛋白对体外培养的人胚泡滋养层细胞形态、HCG分泌功能的影响,以及对人蜕膜细胞形态改变,探讨了α-苦瓜籽蛋白抗早孕的细胞学作用机理。0.13,0.50,2.00,8.00 μg/mlα-苦瓜籽蛋白对滋养层细胞形态有不同程度的损伤,时间越长、浓度越大则损伤越重;滋养层细胞分泌HCG功能受到明显抑制,同时对蜕膜细胞也有一定的毒性作用。实验证明:α-苦瓜籽蛋白具有直接损伤滋养层细胞以及毒害蜕膜细胞而达到抗早孕的作用。

甲磺酸甲酯对酵母DNA损伤及端粒酶活性的影响

观察甲磺酸甲酯 (MMS)对酿酒酵母S2 88C细胞染色体DNA的损伤及端粒酶活性的调节。结果表明 ,甲磺酸甲酯引起酵母细胞DNA损伤 ,随着MMS浓度的增加及作用时间的延长 ,DNA损伤程度加重 ,同时明显提高酵母细胞端粒酶活性。当用 0 .4mmol/LMMS作用 72h后 ,端粒酶活性最高 (是对照组的1.4 7倍 ) ,在作用 96h及 12 0h后端粒酶活性逐渐下降 ,但均高于对照组。甲磺酸甲酯对酿酒酵母S2 88C细胞端粒酶活性的上调作用可能与其DNA损伤有关 ,断裂DNA的损伤后修复可能是端粒酶介导的。

纳络酮治疗肝性脑病的临床疗效观察

目的探讨纳络酮治疗肝性脑病的临床疗效。方法选择本院2007年1月～2009年4月间收治的肝性脑病患者113例,随机分为治疗组和对照组。两组病例均用基础护肝、降氨、纠正氨基酸代谢失衡等疗法。治疗组每天另加用纳络酮4mg,加入500ml10%葡萄糖注射液中静脉滴注,患者清醒后或连用3d无效时停用。治疗前后测定外周血苯二氮卓和血氨含量,并观察纳络酮对肝性脑病转归的影响,包括清醒时间和临床有效率。结果纳络酮治疗后苯二氮卓含量明显下降(P<0.01),与治疗前相比有显著性差异(P<0.01);血氨浓度在纳络酮治疗后明显下降,与治疗前相比,亦具统计学意义(P<0.05);与对照组相比,治疗组清醒时间明显缩短,平均(28.47±10.2)h,临床有效率提高,达61.40%,两组间差异有统计学意义(P<0.01);疗程中未见纳络酮毒性反应。结论纳络酮具有较好地促进清醒,加快脑功能恢复的作用。做为一种催醒剂,纳络酮疗效好、安全毒副作用小,具有较高的临床推广价值。

新型谷胱甘肽过氧化物酶模拟物——SeHA的合成及体外抗氧化活性研究

用化学修饰法合成了一个新的具有GPX活性的模拟物-硒化透明质酸(SeHA),其GPX活力可达276.88 U/μmol。用红外光谱和核磁共振光谱对模拟酶的结构进行研究,证明硒的修饰位点位于透明质酸的N-乙酰氨基葡萄糖的-CH2OH。为进一步研究SeHA的抗氧化活性,建立了Fe2+/Vc诱导的牛心线粒体损伤体系,对SeHA的体外生物活性进行研究。结果显示SeHA能够有效抑制损伤线粒体的膜膨胀、脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)的生成及线粒体细胞色素氧化酶(CCO)活力的降低;同时在与另一种GPX模拟物-PZ51的比较中SeHA也表现出了更为明显的体外抗氧化活性。

RNA干扰抑制肝癌细胞KDR基因表达的实验研究

目的通过研究RNA干扰(RNAi)对肝癌细胞激酶功能区受体(kinase domain receptor,KDR)基因表达的抑制,为肝癌基因治疗提供理论依据。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测KDR在肝癌细胞系HHCC、HepG2、Hep-6及正常肝细胞L-02的表达情况,筛选KDR高表达细胞株。设计构建针对KDR的靶向小干扰RNA(siRNA)质粒载体,通过脂质体转染高表达细胞株HHCC,观察其干扰效果。细胞计数法观察KDR-siRNA对HHCC细胞生长的影响。结果酶切鉴定、DNA测序分析证实重组质粒构建成功,分别命名为KDR-siRNA1、KDR-siRNA2和KDR-siRNA3。荧光定量PCR结果显示:3个KDR-siRNA转染的HHCC细胞株KDR的表达明显受到抑制,抑制率分别为68.86%、82.63%和64.47%,其中KDR-siRNA2抑制作用最为明显;转染阳性和阴性对照组载体的HHCC细胞和未转染的HHCC细胞生长趋势较为一致,且生长速度明显高于转染3种KDR-siRNA表达载体的HHCC。从接种第2天开始,KDR-siRNA转染组与对照组比较,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01)。结论KDR靶向RNAi重组质粒载体能有效抑制肝癌HHCC细胞KDR基因的表达和细胞增殖,为探索KDR介导的肿瘤基因治疗的新途径奠定了实验基础。