藏红花素抑制音猬因子信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探究藏红花素抑制音猬因子(Shh)信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 2021年1月至2022年7月体外培养人结直肠癌细胞SW620,使用不同浓度(5、10、20、40、60、80 mg/L)的藏红花素处理SW620细胞24 h后,CCK-8法检测藏红花素对SW620细胞的细胞毒性作用。将SW620细胞分别用不同剂量藏红花素(10、20、40 mg/L,藏红花素L/M/H组)、40 mg/L藏红花素+1μmol/L Purmorphamine(藏红花素H+Shh通路激活剂组)、1μmol/L Purmorphamine(Shh通路激活剂组)处理,另设置未经处理的对照(Control)组,检测SW620细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力以及Shh信号通路相关蛋白Shh、平滑蛋白(Smo)、神经胶质瘤相关癌基因-1(Gli-1)表达。结果 藏红花素以剂量依赖性方式降低SW620细胞活力。与对照组相比,Shh通路激活剂组SW620细胞活力升高,克隆形成数、划痕面积愈合率、侵袭数、Shh(1.47±0.09比1.27±0.08)、Smo(1.38±0.12比1.15±0.09)、Gli-1(1.25±0.09比0.98±0.07)蛋白表达增加,细胞凋亡率减少(P<0.05),藏红花素L组、藏红花素M组、藏红花素H组SW620细胞活力下降,克隆形成数、划痕面积愈合率、侵袭数减少,凋亡率增加,Shh(1.07±0.12、0.85±0.11、0.52±0.08比1.32±0.14)、Smo(0.96±0.11、0.72±0.08、0.43±0.06比1.19±0.12)、Gli-1(0.76±0.09、0.61±0.09、0.37±0.06比0.96±0.11)蛋白表达减少(P<0.05);与藏红花素H组相比,藏红花素H+Shh通路激活剂组SW620细胞活力升高,克隆形成数、划痕面积愈合率、侵袭数增加,凋亡率减少,Shh(0.84±0.08比0.52±0.08)、Smo(0.81±0.09比0.43±0.06)、Gli-1(0.70±0.08比0.37±0.06)蛋白表达增加(P<0.05)。结论 藏红花素可抑制SW620细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,可能与抑制Shh信号通路有关。

circDUSP16调节miR-126-5p/SHH轴对结直肠癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的:探究circDUSP16对结直肠癌(CRC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测circDUSP16、miR-126-5p、SHH表达水平,CCK-8法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测SHH、PCNA、Bcl-2、Bax、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达,荧光素酶实验检测circDUSP16和miR-126-5p/SHH的靶向关系。结果:沉默circDUSP16组SW480细胞circDUSP16、SHH mRNA表达、OD450值(24 h、48 h、72 h)、Bcl-2和N-cadherin蛋白表达降低,miR-126-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05);下调miR-126-5p减弱了沉默circDUSP16对SW480细胞的增殖、EMT发生的抑制,降低了细胞的凋亡能力;circDUSP16靶向负调控miR-126-5p表达,miR-126-5p靶向负调控SHH表达。结论:沉默circDUSP16可能通过上调miR-126-5p并下调SHH抑制SW480细胞增殖和EMT发生,促进凋亡。

微RNA-582-5p与音猬因子在结直肠癌病理诊断和预后评估中的价值

目的探讨微RNA-582-5p(miR-582-5p)和音猬因子(SHH)在结直肠癌病人病理诊断和预后评估中的价值。方法选择2017年6月至2018年12月沧州市人民医院收治的125例结直肠癌病人及97例结直肠息肉病人作为观察对象,收集癌旁组织、结直肠息肉组织、结直肠癌组织标本,实时萤光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各标本中miR-582-5p、SHH mRNA表达水平,免疫组织化学法检测SHH蛋白表达,Pearson法分析结直肠癌组织中miR-582-5p与SHH mRNA表达水平的相关性,双萤光素酶报告基因实验验证miR-582-5p和SHH的靶向关系,受试者操作特征(ROC)曲线分析miR-582-5p、SHH mRNA对结直肠癌的诊断价值。结果在癌旁组织、结直肠息肉组织、结直肠癌组织中miR-582-5p表达水平[(1.05±0.15)、(0.83±0.12)、(0.65±0.09)]依次降低(P<0.05),SHH mRNA表达水平[(1.03±0.12)、(1.78±0.34)、(2.47±0.41)]及蛋白阳性表达率依次升高(P<0.05);相关性分析显示,结直肠癌组织中miR-582-5p与SHH mRNA表达呈负相关性(r=−0.63,P<0.05),双萤光素酶报告基因实验结果证实miR-582-5p和SHH存在靶向关系;miR-582-5p在肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管侵犯和有淋巴转移的结直肠癌组织中表达水平显著低于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管侵犯和无淋巴转移结直肠癌组织中的表达水平(P<0.05),SHH在肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管侵犯和有淋巴转移的结直肠癌组织中阳性表达率显著高于于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管侵犯和无淋巴转移结直肠癌组织中的阳性表达率(P<0.05);miR-582-5p、SHH mRNA联合诊断结直肠癌的AUC为0.92,95%CI:(0.88,0.95),P<0.05,灵敏度为86.40%,特异度85.57%;miR-582-5p低表达和SHH阳性表达病人无进展生存期和总生存期显著低于miR-582-5p高表达和SHH阴性表达病人(P<0.05)。结论结直肠癌组织中miR-582-5p低表达、SHH高表达,且与结直肠癌病人临床病理特征和预后有关,对结直肠癌的病理诊断和预后评估具有一定价值意义。

结直肠癌患者血清微小RNA-615-5p和音猬因子表达与临床病理特征及预后的关系

目的:探究血清微小RNA(miR)-615-5p、音猬因子(SHH)表达与结直肠癌(CRC)患者临床病理特征及预后的关系。方法:以本院136例CRC患者为CRC组,同时段体检健康者(100例)为健康组;分析两组血清miR-615-5p、SHH表达水平差异,比较miR-615-5p、SHH不同表达水平与患者临床病理特征的关系,并分析影响CRC预后的相关因素;Pearson法分析miR-615-5p与SHH的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-615-5p、SHH表达与CRC患者预后的关系。结果:CRC组血清miR-615-5p表达水平(0.57±0.13)低于健康组(1.02±0.05),SHH表达水平(1.85±0.31)高于健康组(0.98±0.10)(P<0.05);miR-615-5p与SHH呈负相关(r=-0.631,P<0.05);血清miR-615-5p、SHH表达水平与肿瘤T分期、N分期相关(P<0.05);T分期高、SHH高表达是CRC预后的独立危险因素,miR-615-5p高表达是CRC预后的保护因素。生存分析显示miR-615-5p高表达组累积生存率高于miR-615-5p低表达组,SHH低表达组累积生存率高于SHH高表达组(P<0.05)。结论:CRC患者血清中miR-615-5p表达降低,而SHH表达增加,二者均与T分期、N分期有关,miR-615-5p低表达或SHH高表达的CRC患者预后较差。

结直肠癌组织中lncRNA TUSC7与miR-1270表达的相关性及临床病理意义

目的:探究结直肠癌(CRC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤抑制候选基因7(TUSC7)与微小RNA-1270(miR-1270)的相关性及二者与CRC患者预后的关系。方法:lnCAR数据库检索lncRNA TUSC7在CRC和正常结直肠组织中的表达情况。选取2018年6月至2019年1月本院收治的130例CRC患者为研究对象,收集手术切除的CRC和癌旁组织,检测CRC和癌旁组织中lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平;分析CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平与miR-1270相关性;分析CRC组织lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平与CRC临床病理特征和预后关系。生物信息学网站预测lncRNA TUSC7与miR-1270的关系。结果:lnCAR数据库分析显示,lncRNA TUSC7在CRC组织中的表达水平低于正常结直肠组织(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平低于癌旁组织(P<0.05),miR-1270表达水平高于癌旁组织(P<0.05);CRC组织lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平与分化程度、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期相关(P<0.05);生物信息学分析显示,lncRNA TUSC7与miR-1270存在靶向结合位点;CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平与miR-1270呈负相关(r=-0.578,P<0.05);lncRNA TUSC7低表达组、miR-1270高表达组CRC患者累积生存率低于lncRNA TUSC7高表达组、miR-1270低表达组(P<0.05)。结论:CRC组织中lncRNA TUSC7表达下调,miR-1270表达上调,二者呈负相关,为临床诊治CRC、评估CRC患者预后提供新标志物。

食管空肠改良π形吻合在全腹腔镜下全胃切除术中的应用

目的:探讨食管空肠改良π形吻合在全腹腔镜下全胃切除术中的安全性及近期疗效。方法:收集2017年1月至2019年11月施行腹腔镜下全胃D2根治术的67例胃体、胃底、贲门腺癌患者的临床资料,其中观察组(n=26)行全腹腔镜下食管空肠改良π吻合术,对照组(n=41)行辅助小切口腹腔镜食管空肠端侧吻合术。结果:两组患者性别、年龄、BMI、病理学特征(肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移、淋巴结清扫数量、肿瘤分化程度、神经浸润、脉管浸润)差异均无统计学意义(P>0.05);观察组围手术期无死亡病例及吻合口相关并发症发生,对照组术后发生大出血死亡1例,吻合口漏、腹腔感染1例,切口感染1例,中转开腹1例;观察组手术时间、术中出血量、手术切口长度、术后排气时间、术后下床活动时间、术后进食时间、术后拔胃管时间、术后拔除腹腔引流管时间、术后住院时间均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全腹腔镜下食管空肠改良π吻合安全、可行,较传统辅助小切口腹腔镜食管空肠端侧吻合术创伤更小,术后康复更快。

结直肠癌术后发生肠梗阻的影响因素分析及预测模型的构建

目的分析结直肠癌术后发生肠梗阻的影响因素并构建预测模型。方法选取2020年3月至2023年3月我院收治的300例结直肠癌患者进行回顾性分析,根据术后是否发生肠梗阻,分为观察组(发生肠梗阻,n=28)和对照组(未发生肠梗阻,n=272)。比较两组一般资料,围手术期相关指标,术前、术后当天、术后第3、第5天的C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)及白介素6(IL6)水平。采用LASSO回归分析筛选结直肠癌术后发生肠梗阻的变量,多因素Logistic回归分析探讨结直肠癌术后发生肠梗阻的独立危险因素。绘制结直肠癌术后发生肠梗阻的列线图预测模型。绘制受试者工作特征曲线(ROC)和校准曲线,评估模型的预测能力和拟合度。结果观察组肿瘤位置在直肠、肿瘤分期Ⅲ期、术前肠梗阻、开腹手术和中转开腹的患者比例及肿瘤直径大于对照组(P<0.05)。观察组术后当天、术后第3天、术后第5天的CRP、PCT及IL6高于对照组(P<0.05),且测量时间对术后CRP、PCT及IL6水平没有影响(P>0.05)。LASSO回归分析显示,肿瘤分期、术前肠梗阻、手术类型、术后第5天的CRP、PCT及IL6水平是结直肠癌术后发生肠梗阻的变量。多因素Logistic回归分析显示,肿瘤分期Ⅲ期、术前肠梗阻、开腹手术和中转开腹、术后第5天的CRP、PCT及IL6水平是结直肠癌术后发生肠梗阻的独立危险因素(P<0.05)。列线图预测模型的C-index为0.865,ROC曲线下面积(AUC)为0.865(95%CI:0.799~0.902),校准曲线的C-index为0.814,模型与实际观测结果有较好的一致性。结论肿瘤分期Ⅲ期、术前肠梗阻、开腹手术和中转开腹、术后第5天的CRP、PCT及IL6水平是结直肠癌术后发生肠梗阻的独立危险因素。基于上述因素构建的列线图模型具有良好的预测能力,可以为临床预测结直肠癌术后是否发生肠梗阻提供重要的参考依据。

基于生物信息学筛选结直肠癌关键长链非编码RNA及LINC00174的作用机制

目的应用生物信息学技术筛选结直肠癌(CRC)关键长链非编码RNA(lncRNA),并对筛选出的LINC00174在CRC中的作用机制进行初步分析。方法对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中638例CRC和51例癌旁组织的RNA数据分析,应用Wilcoxon检验识别筛选差异表达明显的RNA;Pearson相关性检验确定lncRNA-mRNA关系对;在Starbase v3.0数据库中确定与lncRNA-mRNA关系对中RNA分子存在互作关系的微小RNA(miRNA,miR)。对TCGA数据库中CRC临床数据使用R软件包的"survival"和"survminer"方法进行生存分析,探讨lncRNA-mRNA关系对预测预后的价值。用STRING数据库及metascape平台对mRNA编码蛋白(ZNF692)的功能进行分析。收集40例新鲜的CRC及癌旁组织,应用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)对筛选出的RNA检测,验证生物信息学结果。符合正态分布的计量资料采用均数±标准差(±s)表示,各指标间关系采用t检验及Person相关分析。结果与癌旁组织比较,CRC组织中上调的LncRNA为820,下调的为951;上调的mRNA为1628,下调为3127。分析后确定2775对候选lncRNA-mRNA,其中501对与患者生存有关。进一步通过功能分析发现LINC00174-ZNF692对可能在CRC进展中有重要作用。结果显示,LINC00174、ZNF692在CRC组织中表达水平(14.52±0.97、17.12±0.72)高于癌旁组织(13.50±0.60、15.53±0.44,W=26747、31438,P<0.01);LINC00174与ZNF692呈正相关(r=0.58,P<0.01)。生存分析结果显示,LINC00174-ZNF692对高表达是CRC患者预后差的标志(χ^(2)=5.52,P<0.05),其风险比(HR)为1.51(1.05~2.20)(P<0.05)。对Starbase v3.0数据库分析显示,ZNF692通过海绵吸附miR-200b-3p与LINC00174形成内源性竞争RNA(ceRNA)机制发挥作用。富集分析显示,ZNF692蛋白在泛素介导的蛋白降解、mRNA监控、核苷酸切除修复等过程。组织验证结果显示,LINC00174、ZNF692在CRC水平(2.65±1.23、1.19±0.33)明显高于癌旁组织(0.83±0.39、0.42±0.17,t=8.92、13.12,P<0.01);miR-200b-3p在CRC水平(0.35±0.13)明显低于癌旁组织(0.82±0.22,t=-11.63,P<0.01)。Pearson分析显示,CRC组织中LINC00174与ZNF692呈正相关(r=0.81,P<0.01);LINC00174与miR-200b-3p、ZNF692与miR-200b-3p均呈负相关(r=-0.75、-0.53,P<0.01)。结论LINC00174可能通过海绵吸附机制调控miR-200b-3p/ZNF692轴在CRC进展中发挥重要作用。

河北省沧州城乡居民肛周疾病的流行病学调查

目的通过对沧州城乡某区域内居民进行问卷调查,了解本地区居民肛周疾病的患病情况。方法选择沧州市某居委会和某中学统一发放,规定时间内填写完成,统一收回。发放9 000张,收回有效问卷8 659张,有效回收调查问卷率96.2%。按实际所填写内容进行Excel表统计。结果本组调查人群肛周疾病患病率51.87%;女性患病率54.79%,男性患病率48.70%,女性高于男性。患病率高低与工作性质、生活紧张程度、休息情况、居住、饮食、妊娠等相关。结论肛周疾病患病率与工作性质、生活紧张程度密切相关,体力劳动者高于脑力劳动者,生活紧张、有压力、睡眠差者高于轻松、无压力睡眠好者;城市居住者高于乡村居住者;饮食以细粮为主的高于以粗粮为主者;女性高于男性。妊娠女性肛周疾病患病率高于非妊娠女性。

明矾压缩配合痔核动脉结扎治疗三期内痔、混合痔的经验体会

明矾压缩配合痔核动脉结扎治疗三期内痔、混合痔的经验体会沧州市人民医院肛肠外科（河北０６１０００）任潼生，任志田，张洪收自中西医结合治疗肛肠疾患以来，三期内痔、混合痔的手术方法也大大改进。操作简单、痛苦小、不留后遗症。１临床资料与手术方法１．１从１９８...

长非编码RNA TUSC7在结肠癌组织中的表达及其意义

本研究分析了40例结肠癌组织中长非编码RNA TUSC7表达的意义。结果发现TUSC7在结肠癌组织中低表达,与结肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,TUSC7高表达的患者预后较好。TUSC7可能通过调控上皮-间充质转化相关基因参与结肠癌的进展。

长非编码RNA TUSC7对结直肠癌细胞奥沙利铂耐药性的影响及其机制

目的探讨长非编码RNA TUSC7(TUSC7)对调控结直肠癌多药耐药细胞株LOVO/奥沙利铂(L-OHP)细胞的影响及分子机制。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测TUSC7、miR-10a在结直肠癌多药耐药细胞株LOVO/L-OHP、亲本细胞株LOVO中的表达。利用脂质体Lipofectamine^(TM)2000将pcDNA-TUSC7质粒和(或)miR-10a mimic转染LOVO/L-OHP细胞,构建过表达TUSC7和(或)miR-10a细胞。Real-time PCR检测转染后LOVO细胞中TUSC7、miR-10a表达量。Real-time PCR、蛋白质印迹法(Western blot)、噻唑蓝(MTT)、Transwell小室实验、细胞划痕实验检测过表达TUSC7对LOVO/L-OHP细胞miR-10a及其下游靶基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)、EphA8蛋白表达、增殖能力、侵袭能力、迁移能力及化疗敏感性的影响。应用SPSS 13.0软件对结果进行统计分析。结果LOVO/L-OHP细胞中TUSC7表达水平(0.238±0.048)显著低于LOVO细胞(0.628±0.041,t=10.103,P<0.01),miR-10a表达水平(4.758±0.275)显著高于LOVO细胞(2.258±0.327,t=-34.179,P<0.01)。转染后TUSC7组TUSC7及PTEN、EphA8蛋白表达水平(9.358±1.348、4.252±0.213、5.002±0.313)显著高于对照组(0.206±0.037、0.588±0.101、0.728±0.114,t=-11.755、-26.921、-22.223,P<0.01),miR-10a表达水平(2.114±0.218)明显低于对照组(4.914±0.412,t=10.405,P<0.01);TUSC7组细胞活性、穿膜细胞数、伤口愈合率、半数抑制浓度(IC50)值(1.642±0.120、103.000±23.763、32.014±3.479、3.316±0.579)均显著低于对照组(2.760±0.173、538.250±38.922、63.816±4.650、9.842±2.141,t=13.007、19.089、10.103、6.579,P<0.01)。TUSC7+mimic组miR-10a表达水平(3.648±0.288)明显高于TUSC7组(2.114±0.218,t=-7.356,P<0.01),PTEN、EphA8蛋白表达水平(2.888±0.315、3.544±0.351)显著低于TUSC7组(4.252±0.213、5.002±0.313,t=6.213、5.370,P<0.01);细胞活性、穿膜细胞数、伤口愈合率、IC50值(2.166±0.140、283.750±28.802、44.148±5.517、5.624±0.668)显著高于TUSC7组(1.642±0.120、103.000±23.763、32.014±3.479、3.316±0.579,t=-6.961、-9.681、12.245、5.838,P<0.01)。结论过表达TUSC7通过靶向调控miR-10a的表达降低LOVO/L-OHP细胞的增殖和侵袭转移能力,从而提高LOVO/L-OHP细胞对L-OHP的敏感性。

结直肠癌竞争性内源RNA网络的建立及C14orf132、GAS1表达关系及其意义

目的通过生物信息学分析建立结直肠癌竞争性内源RNA(ceRNA)网络,对筛选出的ceRNA C14orf132-GAS1的表达及意义进行探讨。方法基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库对结直肠癌数据集进行分析,筛选差异表达的长非编码RNA(lncRNA)和mRNA,采用倍数法(fold change)和t检验识别差异表达基因,校正后P<0.05且|log2 fold change|>1的基因被鉴定为差异表达基因。采用超几何检验方法筛选出lncRNA-mRNA形成的ceRNA对,并对可能的靶微小RNA(miRNA)进行筛选。从TCGA数据库下载结直肠癌临床数据集。使用R包的"survival"和"survminer"进行生存分析。选取30例新鲜的结直肠癌及癌旁组织,应用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对筛选出的ceRNA对和miRNA进行检测,并对这些分子间的相关关系进行Pearson相关分析。结果肿瘤组织中上调的mRNA数量为1731,下调的为3691;上调的lncRNA为1126,下调的为2105;上调的miRNA为14,下调的为190。经过筛选,确定C14orf132-miR-33a-GAS1轴可能为结直肠癌进展中有重要意义的ceRNA。生物信息学结果显示,C14orf132-GAS1作为ceRNA对,在肿瘤中表达水平(13.37±1.76、14.45±4.55)低于正常组织(15.71±0.62、16.00±2.42,t=-9.44、-2.40,P<0.05);miR-33a在肿瘤中表达水平(5.53±1.84)高于正常组织(3.25±0.77,t=4.10,P<0.01)。组织验证结果与生物信息学结果符合。结论由C14orf132-miR-33a-GAS1轴形成的ceRNA机制可能在结直肠癌进展过程中发挥重要作用。

空肠系膜离断食管左侧π形吻合在腹腔镜全胃切除术中应用26例分析

腹腔镜全胃切除术(totally laparoscopic total gastrectomy,TLTG)即全腹腔镜下完成全胃切除、淋巴结清扫、消化道重建。其中消化道重建直接关系到病人术后进食、营养状况等,也是TLTG的技术要点,而食管空肠吻合是TLTG消化道重建操作的难点[1-3]。本研究对胃癌病人行全腹腔镜下全胃切除空肠系膜离断食管左侧π形吻合,并分析疗效。现报告如下。

全腹腔镜全胃切除腔内消化道重建术式研究进展

随着腹腔镜器械的改进及外科腔镜下技术的提高,腹部微创手术得到快速发展,腹腔镜胃癌手术也正逐渐走向成熟。对于胃上部癌、胃体癌、皮革胃患者来说,全腹腔镜全胃切除术(TLTG)作为一种微创术式被广泛应用于临床,更小的手术创伤使患者更快的康复,明显提高了患者围手术期生活质量,已成为治疗胃癌,特别是早期可切除胃癌的主要方式之一。TLTG的技术要点和难点是如何在全腹腔镜视野下完成消化道重建,全腔镜下食管空肠吻合是TLTG消化道重建的难点,因此探讨TLTG消化道重建方式成为临床工作者的研究重点。本文就TLTG消化道常见术式作一综述,以期更好地为临床术式选择提供参考。