补肾调经方改善体外培养小鼠卵母细胞核质成熟同步提高卵母细胞质量的机制研究

目的探讨补肾调经方改善体外培养小鼠卵母细胞核质成熟同步提高卵母细胞质量的作用机制。方法日龄10天的雌性ICR小鼠200只,随机分为补肾组(60只)、血清对照组(60只)和空白对照组(80只)。分别处死小鼠分离窦前卵泡,加入补肾调经方大鼠含药血清、正常大鼠血清和不加大鼠血清进行细胞培养,结束培养后分别收集MⅡ期卵母细胞计算卵母细胞第一极体排出率、活细胞荧光探针观察线粒体分布、实时荧光定量PCR检测卵母细胞线粒体DNA拷贝数(mtDNA)、解偶联蛋白(UCP2)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)mRNA表达;收集卵丘颗粒细胞实时荧光定量PCR检测促凋亡基因Bax、抗凋亡基因Bcl-2以及缝隙连接蛋白Cx43、Cx37 mRNA表达。结果与空白对照组和血清对照组比较,补肾组卵母细胞第一极体排出率升高(P<0.05),线粒体均匀分布于细胞质中,mtDNA、PGC-1α、UCP2 mRNA表达升高(P<0.05),与空白对照组比较,血清对照组Cx37 mRNA表达升高(P<0.05),补肾组Cx43、Bcl-2、Bcl-2/Bax mRNA表达升高(P<0.05);与血清对照组比较,补肾组Cx37 mRNA表达降低(P<0.05),Cx43、Bcl-2、Bcl-2/Bax mRNA表达升高(P<0.05)。结论补肾调经方可促进体外培养小鼠卵母细胞核质成熟同步,提高卵母细胞质量,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡、改善线粒体功能有关。

基于网络药理学探讨逍遥丸对心理应激性不孕免疫调节的可行性和潜在作用机制

目的应用网络药理学探讨逍遥丸对心理应激性不孕免疫调节的可行性和潜在作用机制。方法利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选逍遥丸具有较高活性的化合物成分以及对应的靶标蛋白,通过Universal Protein数据库查询靶标蛋白的基因名称,选择生物物种为Homo sapiens。在Online Mendelian Inheritance in Man和Genecards两个数据库查找相关的基因靶点。使用蛋白质互相作用平台(STRING)构建蛋白相互作用网络(PPI)以筛选重要靶点。使用R语言cluster Profiler软件包,对共同靶点进行GO和KEGG功能富集分析。结果逍遥丸、心理应激性不孕和免疫调节三者交集有53个共同靶点,PPI网络拓扑分析相关靶点有白细胞介素(IL)6、信号转导与转录激活因子3、肿瘤坏死因子(TNF)、IL1β、丝裂原活化蛋白激酶1等共50个。通过富集分析信号通路主要集中在IL17、TNF信号通路等。结论逍遥丸可能通过IL17、TNF信号通路对心理应激性不孕进行免疫调节,为后续的实验研究和临床应用提供理论依据。

基于网络药理学探讨藿香正气方治疗妊娠期新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的采用网络药理学方法分析藿香正气方治疗妊娠期新型冠状病毒肺炎的作用机制,探究其多成分—多靶点—多通路的相关关系。方法运用中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选藿香正气方中的活性成分,SwissTargetPrediction服务器收集成分靶点,人类基因数据库(GeneCards)获取妊娠期新型冠状病毒肺炎靶点,将成分靶点与疾病靶点映射,获取共有靶点。STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络,用Cytoscape3.3.0软件进行拓扑参数分析,得到核心靶点,并构建"药物—成分—靶点—疾病"网络。DAVID数据库对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果筛选得到藿香正气方中84个活性成分,1007个成分靶点,疾病靶点236个,两者交集靶点72个。涉及丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、白细胞介素6(IL-6)、MAPK3、MAPK8、肿瘤坏死因子(TNF)、表皮生长因子受体(EGFR)、IL-2等31个核心靶点。GO富集分析显示448个条目,主要集中于细胞凋亡的调控、氧化应激反应、对细胞因子刺激的反应等过程。KEGG富集分析有52条通路,主要参与Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、ErbB信号通路、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路和癌症、免疫、凋亡等相关通路调控。结论藿香正气方的有效成分可通过作用于MAPK1、IL-6、MAPK3、MAPK8、TNF、EGFR等靶点调节多条信号通路,发挥对妊娠期新型冠状病毒肺炎的治疗作用。