以科研促进教学改革 提升中医药人才培养质量

加强高等中医院校创新型人才的培养,是高等中医院校教育研究永恒的课题。人才培养与科学研究是高校的2个基本职能,二者互为依托、互为动力、互为一体,协调发展。高等中医院校应有效促进科教融合,提高中医中药人才培养质量。

中医类院校大学生思想政治教育内容探析

立德树人是高校的根本任务,能否培养出政治立场坚定、道德品质高尚、勇于担当、有所作为的新时代青年是高校思想政治教育的重要使命。中医院校大学生既是高校大学生中的重要群体,也是医学生的重要组成部分。对当前医学生的思想教育现状进行分析,剖析了当前医学院校大学生思想政治教育面临的机遇和挑战,对中医院校大学生思想政治教育内容的要素进行了设计和研究,为完善医学院校大学生的思想政治教育工作体系和构建“大思政”工作格局提供了借鉴。

L-精氨酸和天然抗氧化剂对缺血性脑卒中防治作用的细胞和动物模型研究

目的探讨L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)和天然抗氧化剂搭配组合对脑卒中的防治作用。方法分别建立细胞的氧糖剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)模型和小鼠的大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型来模拟脑缺血,通过L-Arg和天然抗氧化剂搭配预处理之后分别检测细胞内活性氧(scavenge reactive oxygen species,ROS)水平、细胞凋亡及信号分子的表达。结果低浓度L-Arg对细胞活力没有影响,但高浓度L-Arg能损伤细胞并影响Bcl-2和Bax表达。L-Arg和天然抗氧化剂搭配组合能够减轻OGD诱导细胞的损伤,对细胞活力有明显保护作用,清除OGD引起的细胞内产生的ROS增加,减少细胞凋亡和线粒体膜损伤并调节Bcl-2、Bax、caspase3的表达;在小鼠的MCAO模型中研究进一步发现,这个组合可以减轻局灶性脑缺血引起的脑组织损伤和脑组织细胞凋亡,调节Bcl-2和Bax的表达。结论 L-Arg和天然抗氧化剂搭配可以减少缺氧和缺血诱导的神经细胞和动物脑组织的损伤,可能对脑卒中有一定的防治作用。

中华绒螯蟹组蛋白H2A基因的克隆及其在精子发生中的定位

精子发生是指由精原细胞发育为成熟精子的过程。在大多数的物种中,此过程涉及到与DNA结合的碱性蛋白的变化。体细胞类型的组蛋白全部或者部分被过渡蛋白替代,随后又被碱性更强的鱼精蛋白替代,伴随蛋白的逐级替换,此类动物精子核为浓缩的,染色质包装紧密。中华绒螯蟹的精子染色质呈松散的结构,其具体机制尚不明确。本实验利用PCR技术克隆了中华绒螯蟹组蛋白H2A基因的编码区,制备了其多克隆抗体,通过免疫荧光检测了组蛋白H2A在精子发生中的变化特征。结果显示,中华绒螯蟹组蛋白H2A基因编码区为369bp,编码123个氨基酸,预测蛋白分子量为13.1ku。氨基酸序列比对发现,H2A与凡纳滨对虾和斑节对虾的同源性极高,均为99.19%。免疫荧光显示,H2A存在于中华绒螯蟹精子发生的整个过程,精原细胞和精母细胞的H2A在细胞核和细胞质均有表达,在精细胞和成熟的精子中的H2A主要存在于细胞核。中华绒螯蟹成熟精子核内组蛋白H2A的保留可能与其非浓缩核有一定关联。

国医大师李士懋“平脉辨证思辨体系”传承教学法研究

国医大师李士懋教授在教学和临床中坚持仲景"平脉辨证思辨体系",并且有具体的七步走传承带教法。分别为:读经典与导师著作相结合,求其本源;PBL教学法——以问为先导;CBL教学法——以案例为核心;TBL教学法——以团队为基础;总结归纳,形成成果;临床带教和授课,实现再传承;科研方法阐释现代机理。该七部走是中医传承教育的良好范例。

三七总皂苷对金黄地鼠PCSK9-LDLR表达及血脂水平的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对金黄地鼠实验性高脂血症的调节机制。方法:30只金黄地鼠随机分为正常组、模型组和PNS组3组,每组10只。正常组地鼠饲喂普通饲料,其余2组地鼠饲喂高脂饲料;4周后高血脂症模型已经建成,PNS组腹腔注射血塞通注射液(50 mg/kg),正常组和模型组给予同体积生理盐水。给药12周后,处死地鼠,收集血液,全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;取肝组织,采用real-time PCR、免疫组织化学和Western blot检测肝脏前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)和低密度脂蛋白受体(LDLR)在mRNA和蛋白水平的表达。结果:成功建立高脂血症地鼠模型。与正常对照组相比,高脂模型组地鼠血清TC、TG、LDL-C和ALT水平显著增高(P<0.05),PNS干预组地鼠TC、TG、LDL-C和ALT水平显著下降(P<0.05),各组地鼠血清中HDL-C和AST水平无显著变化(P>0.05)。与对照组相比,高脂模型组地鼠肝脏中PCSK9的mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05),LDLR的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与高脂模型组相比,PNS组地鼠肝脏组织PCSK9的蛋白表达水平显著降低,LDLR的蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PCSK9和LDLR mRNA变化不明显。结论:PNS对高脂血症金黄地鼠具有显著降脂作用,其机制可能与调节PCSK9-LDLR信号通路有关。

提取-共沸精馏耦合技术提取白术、桂枝挥发油工艺优化

目的优化提取-共沸精馏耦合技术提取白术、桂枝挥发油工艺。方法以浸泡时间、提取时间、加水量为影响因素,挥发油提取率及桂皮醛、白术内酯Ⅰ总量的综合评分为评价指标,正交试验优化提取工艺。结果最佳条件为浸泡时间3 h,提取时间6 h,加水量10倍,挥发油提取率为0.96%,桂皮醛、白术内酯Ⅰ总量分别为7 072、3.03 mg,综合评分为1.02。结论该方法稳定可靠,可用于提取-共沸精馏耦合技术提取白术、桂枝挥发油。

乳腺增生中药复方授权专利用药规律分析

目的通过探讨治疗乳腺增生的中药复方授权专利组方的用药规律,为乳腺增生中药复方新药开发及专利申报工作提供思路。方法以国家知识产权局官网于2000年至2020年收录的获得授权的乳腺增生中药复方专利为数据来源,采用古今医案云平台(V2.2.3版)进行频次统计、关联规则、聚类分析、复杂网络分析。结果内服组方纳入133项专利,高频中药有柴胡、夏枯草、当归、郁金、香附;四气以温、寒、微寒为主;五味以苦、辛为主;归经以肝、脾、胃为主;常用的药对有柴胡-当归、郁金-柴胡、夏枯草-柴胡等;聚类分析结果可分为7类组合;专利核心药物有柴胡、香附、郁金、白芍、当归、夏枯草、瓜蒌、青皮、丹参。外用组方纳入34项专利,使用频次较高的中药有冰片、莪术、没药、当归、穿山甲、乳香等;四气、五味与内服组方使用情况相似,归经方面,外用组方使用归心经药比例略高;高频药对有乳香-没药、三棱-莪术、赤芍-当归等;聚类分析结果可分为3类组合;核心药物有赤芍、没药、莪术、当归、乳香、三棱。内服专利组方与经方、验方用药规律相似,验证了中药复方专利较多源自于经方、验方。结论乳腺增生中药复方专利新药开发可参考古方、经方进行配伍。目前治疗冲任失调型专利较少,可作为重点方向进行研发。

提取-共沸精馏耦合技术与水蒸气蒸馏法提取中药挥发油比较研究

目的:考察提取-共沸精馏耦合技术(WER)与水蒸气蒸馏法(SD)对白术、桂枝混合挥发油得率的影响,确定最佳方法和工艺条件。方法:分别以正交试验法优选WER与SD提取中药挥发油的最佳工艺,采用配对T检验法评价两种提取方法对混合挥发油得率是否有显著差异,并对两种方法所提挥发油进行GC、HPLC分析和比较。结果:WER最佳提取工艺为浸泡3 h、提取6 h、加水量10倍; SD最佳提取工艺为浸泡3 h、提取6 h、加水量8倍。WER比SD提取白术、桂枝混合挥发油得率显著提高,桂皮醛与白术内酯Ⅰ含量也明显提高。结论:WER提取挥发油显著优于SD。优选的提取方法及工艺可为葶苈生脉组方中白术、桂枝挥发油的提取提供依据。

羟基红花黄色素A通过激活自噬抑制ANGⅡ诱导的VAFs迁移

目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的作用。方法组织法培养SD大鼠VAFs,细胞分为正常组、AngⅡ组、HSYA组、HSYA与自噬抑制剂Bafilomycin A1共处理组、Bafilomycin A1组;采用免疫荧光实验鉴定VAFs;CCK-8法分别建立AngⅡ和HSYA的量效时效曲线;划痕实验检测细胞迁移;采用MDC法检测各组细胞自噬小体数量;Western blot实验检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达。结果培养的细胞鉴定为VAFs;AngⅡ呈剂量、时间依赖性增强VAFs细胞活力,HSYA呈剂量、时间依赖性抑制VAFs细胞活力;AngⅡ明显促进VAFs迁移,HSYA以及HSYA和Baf共处理均可抑制AngⅡ诱导的VAFs迁移,而Baf处理则促进VAFs迁移;HSYA明显增加了自噬斑点数量,并促进自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1的表达,抑制p62蛋白表达。结论HSYA通过激活自噬抑制AngⅡ诱导的VAFs迁移,改善血管重构。

《宣明论方》方药用量研究

通过对刘完素《宣明论方》中105首方剂的处方进行统计分析,明确其常用药味,最大、最小及平均剂量范围,方剂药味数目,每服剂量,每日剂量等,总结其组方用量规律。结果提示:刘完素临床处方用药并非独主寒凉,而是严格遵守辨证论治原则,攻补兼施、寒热并用。其处方侧重于小方,每服量亦较小,且多采用打散煮服,既可节约药物资源,又便于携带、服用。其组方用量规律可为临床实践提供参考。

乳腺增生外用中药复方专利组方用药规律

目的分证型探讨乳腺增生外用中药复方专利组方用药规律。方法以国家知识产权局官网近二十年收录的治疗乳腺增生的外用中药复方专利为数据来源,采用古今医案云平台(V2.3.5版)进行频次统计、关联规则、聚类分析、复杂网络分析。结果冲任失调型专利共47项,用药频率最高的依次为没药、冰片、乳香、莪术、白芷等;肝郁痰凝型专利共99项,用药频率最高的依次为乳香、红花、当归、莪术、没药。中药外治乳腺增生使用活血化瘀药最多,以肝经论治为先,四气多以温性、平性,五味多以苦、辛,冲任失调型兼有热性药,肝郁痰凝型重于寒性。乳腺增生外用专利中药配伍为临床常用组合。结论中药外治乳腺增生专利以活血化瘀为核心,在开发专利时可参考不同证型用药规律进行组方,充分发挥中医辨证论治优势。

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马BDNF mRNA及受体TrkB mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对血管性痴呆(VD)大鼠脑海马神经元保护机制。方法 70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血高剂量组、补肾活血低剂量组、尼莫地平对照组,每组14只,采用两血管阻断法制备大鼠VD模型,补肾活血高剂量组、低剂量组分别以10.14、5.07 g生药/kg灌服补肾活血方,尼莫地平对照组以11.06 mg/kg灌服尼莫地平,给药30天后,检测各组大鼠水迷宫法行为学、脑海马神经元超微结构及海马组织BDNF mRNA和Trk B mRNA蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力与探索能力下降,表现为逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显减少(P<0.01),海马神经元BDNF mRNA和Tr KB mRNA及蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),脑海马神经元超微结构明显受损;与模型组比较,补肾活血高、低剂量组大鼠空间学习记忆能力与探索能力明显改善,表现为逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显增加(P<0.05,P<0.01),海马神经元BDNF mRNA及受体Trk B mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),改善脑海马神经元超微结构。结论补肾活血方可提高脑海马神经元BDNF及受体Trk B表达,保护脑海马神经元,改善VD大鼠学习与记忆能力。

益气养阴方药结合罐疗对重度直肠前突型便秘术后的疗效观察

[目的]观察在微创闭式修补术后口服益气养阴方药的基础上,进行罐疗结合饮食对重度直肠前突型便秘术后的临床疗效。[方法]纳入60例符合条件的重度直肠前突患者,按随机数字表法分成对照组和治疗组,每组各30例,对照组采用微创闭式修补术后联合益气养阴方药,治疗组在对照组的治疗基础上结合罐疗、饮食法。通过比较2种方法治疗的重度直肠前突患者的近期有效率、远期有效率和排便频次,来评价益气养阴方药结合罐疗对重度直肠前突型便秘术后的临床疗效。[结果]2组的近期有效率比较差异无统计学意义,治疗组的远期有效率要明显高于对照组(P<0.05)。治疗后2组每周的排便次数均较治疗前增加(P<0.05),且治疗组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]临床上用益气养阴方药结合罐疗治疗重度直肠前突型便秘术后的疗效稳定,远期疗效好,简单可行,值得临床推广。

HSYA通过调控TGF-β1/Smad3通路抑制ANG诱导VAFs增殖

本研究旨在探究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)是否通过调控TGF-β1/Smad3通路抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANGⅡ)诱导血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)增殖,从而抑制血管重构,缓解心血管疾病。采用组织贴块法培养SD大鼠VAFs;免疫荧光法鉴定VAFs;细胞随机分为正常组、ANGⅡ组、ANGⅡ+HSYA(低剂量、中剂量、高剂量)组;采用CCK-8法检测不同浓度HSYA对ANGⅡ诱导的VAFs增殖的作用;Western blot实验检测各组细胞中TGF-β1/Smads通路相关蛋白、各组细胞核蛋白p-Smad3的蛋白质表达。通过组织贴块法培养获得的细胞鉴定为VAFs;HSYA呈剂量依赖性抑制ANGⅡ诱导的VAFs增殖;降低了p-Smad3/Smad3蛋白表达,增加了Smad7蛋白表达;抑制了VAFs中核蛋白p-Smad3的蛋白质表达。HSYA通过调控TGF-β1/Smad3通路抑制Smad3磷酸化,增加Smad7蛋白表达,减少p-Smad3蛋白在细胞核内的含量,从而抑制ANGⅡ诱导的VAFs增殖,进而影响血管重构。