JAK2/STAT3信号转导通路在子宫内膜异位症发病过程中的作用

目的研究JAK2/STAT3信号转导通路在子宫内膜异位症(EMS)发展过程中的作用。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、JAK2/STAT3通路抑制剂组(AG组),每组20只。模型组、AG组大鼠通过自身子宫内膜移植建立EMS模型。AG组造模前给予AG490 1 mg/kg,手术后给予AG490 4 mg/kg,每周2次,连续4周;模型组给予生理盐水。处理结束后记录各组大鼠异位内膜体积,计算异位内膜生长抑制率,HE染色观察病理改变;蛋白质印迹法(Western blot)检测内膜组织中p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果治疗后AG组异位内膜组织生长发育不良,异位内膜体积明显小于模型组,异位内膜生长的抑制率为65.66%。Western blot结果显示,EMS模型大鼠异位内膜病灶中JAK2、STAT3总蛋白及其磷酸化水平(p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3)明显高于假手术组;而AG组大鼠异位内膜病灶中JAK2、STAT3总蛋白及其磷酸化水平明显低于模型组。结论 JAK2/STAT3通路在EMS发病过程中可能发挥了重要作用,而抑制JAK2/STAT3信号通路则能够对EMS的治疗产生积极作用。

靛氰绿在D－半乳糖胺急性肝炎大鼠体内动态变化及房室模型解析

本实验系统地研究了不向组织分布，原形经胆汁排泄的染料指示剂靛氰绿在Ｄ－半乳糖胺急性肝损伤大鼠体内动态变化及房室模型解析。结果表明，Ｄ－半乳糖胺所致急性肝损伤可引起肝血流量减少，使药物在体内消除速度减慢，根据开放性四房室模型计算各有关药动学参数，发现Ｄ－半乳糖胺所致急性肝损伤，主要影响药物自血液进入肝细胞的过程。

西红花苷对人胚肾细胞293延迟整流钾电流的作用研究

目的:研究西红花苷对人胚肾细胞(human embryonic kidney 293cell,HEK293)上表达的延迟整流钾电流的作用。方法:运用脂质体转染法,将人心肌细胞上的延迟整流钾电流通道蛋白基因转染到HEK293细胞上,采用穿孔膜片钳法记录西红花苷对快激活延迟整流钾电流(The rapidly activating delayed rectifier potassium current,IKr)和慢激活延迟整流钾电流(The slowly activating delayed rectifier potassium current,IKs)的影响。结果:西红花苷对表达在HEK293上的IKr和IKs均无明显作用。结论:西红花苷不影响延迟整流钾电流,临床使用不易诱发QT间期延长和心律失常。

二神丸对溃疡性结肠炎大鼠炎性反应及血小板的影响

目的通过观察二神丸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠炎性反应及血小板的影响,探讨其对UC的治疗作用及相关作用机制。方法在70只SD大鼠中随机取10只作为正常对照组,其余60只采用2,4,6-三硝基苯磺酸钠(TNBS)-乙醇灌肠法建立UC模型,再将造模成功的大鼠随机分为模型组(10只)、阳性药物组(8只)、二神丸低剂量组(10只)、二神丸高剂量组(10只),其中阳性药物组予美沙拉秦缓释颗粒混悬液0.5 g/(kg·d)灌胃,二神丸低剂量组予二神丸水煎液1.575 g/(kg·d)灌胃,二神丸高剂量组予二神丸水煎液6.3 g/(kg·d)灌胃,正常对照组与模型组给予等容积蒸馏水10 mL/(kg·d)灌胃,各组均连续灌胃14 d。比较各组灌胃结束后全血血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)水平情况,血清P-选择素(P-selectin)、一氧化氮(NO)水平情况,结肠组织白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠灌胃后全血PLT增加(P<0.05),MPV降低(P<0.05);与模型组比较,二神丸低、高剂量组大鼠全血PLT均降低(P<0.05),二神丸低剂量组MPV增加(P<0.05),阳性药物组大鼠全血PLT、MPV和二神丸高剂量组MPV与模型组比较差异均无统计学意义(P>0.05);二神丸低、高剂量组全血PLT、MPV组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组血清P-selectin、NO水平均增加(P<0.05);与模型组比较,阳性药物组、二神丸低剂量组、二神丸高剂量组血清NO水平和二神丸高剂量组P-selectin水平均降低(P<0.05),阳性药物组和二神丸低剂量组P-selectin水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);二神丸低、高剂量组大鼠血清P-selectin、NO水平组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织IL-1β、TNF-α水平均升高(P<0.05);与模型组比较,阳性药物组、二神丸低剂量组、二神丸高剂量组大鼠结肠组织IL-1β、TNF-α水平均降低(P<0.05);二神丸低、高剂量组大鼠结肠组织IL-1β、TNF-α水平组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论二神丸对UC大鼠具有确切的保护和修复作用,其作用机制可能是通过减少炎症因子表达,降低局部炎性反应,降低PLT并抑制PLT活化,改善血液的高凝状态,从而改善结肠黏膜组织的炎性损伤,而起到治疗作用。

三棱总黄酮对大鼠子宫平滑肌收缩的调节作用研究

目的观察三棱总黄酮对大鼠子宫平滑肌收缩的调控作用及其机制。方法取雌性SD大鼠20只,分离子宫平滑肌段,置于装有洛氏液的恒温浴槽中,施加1.0 g负荷,观察终浓度为0.5、5、50、500、5000μmol/L的三棱总黄酮对子宫平滑肌自主收缩以及诱导剂[前列腺素F 2α(PGF 2α)、乙酰胆碱(Ach)、BayK8644和缩宫素(OT)]引起的痉挛收缩幅度和频率的影响。原代分离大鼠子宫平滑肌细胞,观察三棱总黄酮对OT引起的胞浆中钙离子浓度变化和钙离子衰退时间的影响,以及对细胞中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和肌球蛋白轻链20(MLC20)的蛋白磷酸化水平的影响。结果终浓度为5、50、500和5000μmol/L的三棱总黄酮均能够显著降低子宫平滑肌自主收缩幅度(P<0.05),且随着浓度的增大,收缩幅度缩小,但对收缩频率没有明显的影响(P>0.05);终浓度为50μmol/L的三棱总黄酮对PGF 2α、Ach、BayK8644和OT引起的子宫平滑肌痉挛收缩有抑制作用,可使子宫平滑肌收缩幅度明显减小(P<0.05),收缩频率降低(P<0.05);0.5和5μmol/L的三棱总黄酮对OT引起的子宫平滑肌细胞内钙荧光强度的变化率有显著的抑制作用(P<0.05),可使细胞内钙离子衰退的时间延长(P<0.05),并使CaMKⅡ和MLC20的蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。结论三棱总黄酮能够抑制子宫平滑肌的痉挛性收缩,其作用机制与阻断钙通道,抑制并减慢胞浆中钙离子浓度变化,进而下调钙调控相关蛋白磷酸化的水平有关。

莪术对子宫内膜异位症大鼠的改善作用

目的研究莪术水煎液对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠体内蛋白酪氨酸激酶2和信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法以自体移植法建立EMS模型大鼠。按照异位内膜面积均衡原则将大鼠随机分为5组:模型组、阳性对照组[腹腔注射AG 490(JAK选择性抑制剂)4 mg·kg-1]和低、中、高3个剂量实验组(灌胃莪术水煎液:5,10,20 g·kg-1),每组10只;另设假手术组大鼠10只。除阳性对照组每周给药2次外,其余各组大鼠每日给药(或蒸馏水)1次,连续30 d。末次给药后,测量并计算大鼠的异位内膜面积和生长率;用免疫印迹法检测异位内膜组织中JAK 2、STAT 3的磷酸化和蛋白表达水平。结果模型组、阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组的异位内膜生长率分别为(1.34±0.85)%,(0.04±0.22)%,(0.78±0.39)%,(0.43±0.36)%和(0.28±0.26)%;阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。假手术组、模型组、阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组的p-JAK2/JAK2的相对表达量分别为0.61±0.13,0.97±0.12,0.55±0.03,0.99±0.07,0.64±0.06和0.59±0.08;模型组与假手术组相比,差异有统计学意义(P<0.01);阳性对照组和中、高2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);上述这6组的p-STAT 3/STAT 3的相对表达量分别为0.25±0.05,0.77±0.02,0.47±0.02,0.75±0.12,0.68±0.11和0.46±0.05;模型组与假手术组相比,差异有统计学意义(P<0.01);阳性对照组和高剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论莪术水煎液对实验性EMS大鼠有改善作用,其机制与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。

基于Notch1信号通路研究通心络胶囊对糖尿病小鼠主动脉的保护作用

目的观察通心络胶囊对糖尿病(DM)小鼠胸主动脉血管内皮细胞损伤的保护作用。方法构建DM小鼠模型并检测空腹血糖、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平;ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的水平;HE染色和TUNEL法观察胸主动脉病理学特征及细胞凋亡情况;real-time PCR法及Western-Blot法检测胸主动脉Notch1、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达或蛋白表达。结果与对照组比较,模型组血糖、TG、TC、HDL及LDL均显著升高(P<0.01);且通心络组LDL较模型组显著降低(P<0.05)。与模型组比较通心络组血清IL-1β、IL-18和TNF-α显著降低(P<0.05)。TUNEL染色可见通心络组内皮细胞凋亡水平相比模型组有明显改善(P<0.05)。通心络组Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05),Notch1、Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论通心络胶囊可能是通过抑制炎症反应,并通过激活Notch1通路抑制细胞凋亡,改善血管内皮功能,从而发挥对糖尿病小鼠胸主动脉的保护作用。