补肾助孕方调节线粒体功能对子宫内膜血管生成的影响

目的观察补肾助孕方调节线粒体功能对子宫内膜血管生成的影响,探讨其改善子宫内膜容受性的作用机制。方法建立控制性超促排卵(COH)小鼠模型,将小鼠随机分为正常组、模型组和补肾组,每组20只,补肾组予补肾助孕方灌胃11 d,正常组和模型组予生理盐水灌胃,统计小鼠胚胎种植数,HE染色观察小鼠子宫内膜形态,免疫荧光染色观察子宫内膜组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。体外培养子宫内膜微血管内皮细胞(HEMECs),将细胞分为对照组、VEGFA组、补肾组和VEGFA+补肾组,分别予血管内皮生长因子A(VEGFA)和/或补肾助孕方含药血清干预,检测细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ~Ⅳ活性,ATP含量及增殖细胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶(Caspase-3)蛋白表达。结果动物实验显示,与正常组比较,模型组小鼠胚胎种植数显著降低(P<0.05),子宫内膜组织α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,补肾组小鼠胚胎种植数显著增加(P<0.05),子宫内膜组织α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05)。细胞实验显示,补肾助孕方含药血清可以提高HEMECs线粒体呼吸链复合物Ⅰ~Ⅳ活性及ATP含量,促进PCNA蛋白表达、抑制Caspase-3蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论补肾助孕方促进子宫内膜血管生成可能与改善线粒体功能有关。

寿胎丸调控组蛋白修饰对复发性流产小鼠子宫内膜蜕膜化的影响

目的观察寿胎丸对复发性流产(RSA)小鼠子宫内膜蜕膜化的影响,基于组蛋白修饰探讨其治疗RSA的可能作用机制。方法将40只雌性CBA/J小鼠分为正常组、模型组、寿胎丸低剂量组(7.5 g/kg)、寿胎丸高剂量组(15 g/kg)和地屈孕酮组(3 mg/kg),正常组与BALB/C雄性小鼠合笼饲养,其余各组与DBA/2雄性小鼠合笼饲养建立RSA小鼠模型,造模后各给药组灌胃相应药液,正常组和模型组灌胃等体积纯水,连续10 d。观察胚胎情况,计算胚胎丢失率,ELISA检测血清泌乳素(PRL)含量,HE染色观察蜕膜组织形态,RT-PCR检测蜕膜组织PRL mRNA表达,Western blot检测蜕膜组织PRL、H4乙酰化(H4ac)、H3K27乙酰化(H3K27ac)、H3K27三甲基化(H3K27me3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠胚胎丢失率明显升高,血清PRL含量明显减少,蜕膜细胞排列紊乱,出现大面积出血坏死;蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显降低,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显降低,H3K27me3蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,寿胎丸低、高剂量组和地屈孕酮组小鼠胚胎丢失率明显降低,血清PRL含量明显增加,蜕膜细胞排列紧密,坏死减少,腺体完整;寿胎丸高剂量组和地屈孕酮组小鼠蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显升高,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显升高,H3K27me3蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论寿胎丸可促进RSA小鼠子宫内膜蜕膜化,其机制与调节子宫内膜基质细胞组蛋白修饰有关。