“产教融合、校企合作”协同育人创新模式探索--以河北农大动科院为例

“产教融合、校企合作”协同育人在高等教育人才培养过程中发挥极其重要作用。该文列举河北农业大学动科院在校企协同育人模式探索中所采取的一些举措,为校企协同育人模式提供思路。

半胱氨酸、蛋氨酸对体外培养绒山羊次级毛囊生长及毛乳头细胞增殖的影响

旨在探讨半胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)对体外培养燕山绒山羊次级毛囊(SF)生长及毛乳头细胞(DPCs)增殖凋亡的影响。本研究选取1只1周岁左右健康雄性燕山绒山羊皮肤若干,完整分离的次级毛囊随机分成Cys试验组和Met试验组,每组各浓度3个重复,每个重复8根毛囊,Cys试验组添加浓度分别为0、40、80、120、160和200μg·mL^(-1);Met试验组添加浓度分别为0、10、15、20、25和30μg·mL^(-1)。毛囊培养7 d,每隔24 h观察毛囊生长形态并测量毛囊生长长度。从燕山绒山羊次级毛囊中提取、纯化DPCs,细胞计数并绘制DPCs生长曲线,将DPCs随机分为Cys试验组和Met试验组,每组各浓度6个重复,Cys试验组添加浓度分别为0、20、40、60、80、100μg·mL^(-1);Met试验组添加浓度分别为0、2、4、6、8、10μg·mL^(-1)。培养2 h后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,确定燕山绒山羊DPCs中Cys和Met的最适培养浓度,利用qRT-PCR技术检测不同浓度Cys和Met的DPCs增殖相关基因(PCNA、CCND1、CDC42、CDK 4)、凋亡相关基因(P21、P53、Bax、Caspase-3、Bcl-2)、皮肤细胞分化相关基因(IVL)及角蛋白相关基因(K10、K 14)mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,添加80和120μg·mL^(-1) Cys与10、15、20和25μg·mL^(-1) Met均可显著影响次级毛囊生长速率和累计生长长度(P<0.01),且120μg·mL^(-1) Cys和20μg·mL^(-1) Met促生长效果最好;添加20、40和60μg·mL^(-1) Cys可以显著影响DPCs增殖(P<0.05),添加40μg·mL^(-1) Cys显著上调PCNA、CCND1、CDK4、Bcl-2、K10、K 14和IVL基因mRNA表达量(P<0.05);添加6μg·mL^(-1) Met可以显著影响DPCs增殖(P<0.05),并显著上调PCNA、CCND1、CDK4、P21、Bcl-2、K 10和K 14基因mRNA表达量(P<0.05)。综上,添加Cys和Met可以显著促进长绒期燕山绒山羊次级毛囊生长,最适添加量分别为120μg·mL^(-1)和20μg·mL^(-1);添加Cys和Met可通过上调细胞增殖、分化、角蛋白等基因mRNA、下调细胞凋亡基因mRNA表达,促进乳头细胞增殖、抑制细胞凋亡进而促进燕山绒山羊次级毛囊生长。

瘤胃源粪臭素降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

【目的】旨在从绵羊瘤胃中分离粪臭素降解菌,并评估其粪臭素降解能力和生长性能,以期开发适用于反刍动物降臭的直接饲喂微生物。【方法】以绵羊瘤胃液为分离来源,使用含有粪臭素的MSM培养基进行富集和分离,通过细菌菌落形态观察进行初步分类;应用16S rRNA基因扩增、测序及系统发育分析进行物种鉴定;绘制菌株生长曲线,通过HPLC技术测定粪臭素降解曲线。【结果】从绵羊瘤胃液中分离出25株粪臭素降解菌,经菌落形态鉴定选出11株代表菌株进行后续研究。物种鉴定结果显示,MSML2和MSML6属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),MSML4、MSML5、MSML7和MSML10属于阿氏普里斯特氏菌(Priestia aryabhattai),MSML3和MSML11属于污染伯克霍尔德氏菌(Burkholderia contaminans),MSML1、MSML8和MSML9属于成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)。其中,MSML5生长速度最快,在约12 h后进入稳定期,稳定期菌体浓度最高;MSML3和MSML8在前16 h生长缓慢,32 h后进入稳定期。在粪臭素降解方面,MSML2粪臭素降解效率最高,48 h内的降解率达到23.03%,其次是MSML7、MSML8和MSML10,降解率均超过20%。【结论】成功从绵羊瘤胃中分离获得25株粪臭素降解菌,涉及4个物种,首次报道了具备粪臭素降解能力的枯草芽孢杆菌、阿氏普里斯特氏菌和成都假单胞菌,为直接饲喂反刍动物的菌剂开发提供了宝贵的菌株资源。

单宁对断奶前犊牛瘤胃发酵参数与菌群结构的影响

本试验旨在研究开食料中添加单宁对断奶前犊牛瘤胃发酵参数与菌群结构的影响。选取60头健康且初生重[(39.9±1.9)kg]相近的1日龄中国荷斯坦母犊牛,随机分为4组,每组15头,每头单栏饲养。对照组(CON组)饲喂开食料,试验组在对照组开食料基础上添加由白坚木单宁提取物(缩合单宁)和栗木单宁提取物(水解单宁)按照2∶1比例混合制成的白坚木单宁与栗木单宁混合物(QTE,单宁总含量≥73%),添加量分别为0.30%(QTE1组)、0.45%(QTE2组)、0.60%(QTE3组)。试验期63 d,试验期间所有犊牛统一断奶,试验最后1天采集瘤胃液。结果显示:1)各QTE添加组的终末体重均显著高于CON组(P<0.05)。2)开食料中添加不同水平的QTE对瘤胃液pH、微生物蛋白浓度、总挥发性脂肪酸浓度、乙酸摩尔比例、戊酸摩尔比例以及乙酸/丙酸比值均无显著影响(P>0.05);随着QTE添加量的增加,瘤胃液中氨态氮浓度呈二次降低趋势(P=0.05),丙酸摩尔比例有线性升高趋势(P=0.10),丁酸摩尔比例呈二次升高(P=0.03),异丁酸和异戊酸摩尔比例有线性降低趋势(P=0.08和P=0.05)。氨态氮浓度以QTE2组最低,丙酸摩尔比例以QTE2组最高;QTE2组丁酸摩尔比例显著高于CON组和QTE3组(P<0.05);QTE2组异戊酸摩尔比例显著低于CON组和QTE3组(P<0.05)。3)QTE1组、QTE2组和QTE3组的Shannon指数显著高于CON组(P<0.05),且以QTE2组最高。4)在门水平上,随着QTE添加量的增加,放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度线性升高(P=0.01),且QTE2组和QTE3组显著高于CON组和QTE1组(P<0.05);厚壁菌门/拟杆菌门比值线性降低(P=0.01),且QTE1组、QTE2组和QTE3组均显著低于CON组(P<0.05)。在属水平上,随着QTE添加量的增加,普雷沃氏菌属的相对丰度线性升高(P=0.01),且QTE2组和QTE3组显著高于CON组(P<0.05);丁酸弧菌属的相对丰度线性降低(P=0.01);欧陆森氏菌属(Olsenella)的相对丰度呈线性升高趋势(P=0.05)。综上所述,单宁可通过提高瘤胃菌群多样性和有益菌相对丰度,优化瘤胃菌群结构,改善瘤胃发酵模式,促进断奶前犊牛的生长。在本试验条件下,犊牛开食料中QTE的适宜添加量为0.45%。

玉米-杂粕型饲粮中添加复合纤维素酶对蛋鸡生产性能、肝脏糖代谢、内源消化酶活性和肠道中葡萄糖转运载体基因表达的影响

本试验旨在研究玉米-杂粕型饲粮中添加不同水平的复合纤维素酶对蛋鸡生产性能、蛋品质、肝脏中糖代谢相关酶活性、内源消化酶活性以及肠道中葡萄糖转运载体基因表达的影响,并筛选出复合纤维素酶的适宜添加量。选取288只健康状况良好的53周龄海兰褐蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂玉米-杂粕(豆粕-棉籽粕-菜籽粕)型饲粮,3个试验组在玉米-杂粕型饲粮中分别添加200、400、600 mg/kg复合纤维素酶(主要成分为纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶和蛋白酶)。预试期7 d,正试期84 d。结果显示:1)与对照组相比,400 mg/kg组产蛋率显著提高(P<0.05),料蛋比和平均日采食量显著降低(P<0.05)。2)玉米-杂粕型饲粮中添加不同水平复合纤维素酶对蛋鸡蛋品质各项指标均无显著影响(P>0.05)。3)与对照组相比,玉米-杂粕型饲粮中添加400或600 mg/kg复合纤维素酶可以显著提高蛋鸡肝脏中丙酮酸激酶活性(P<0.05)。4)与对照组相比,400 mg/kg组蛋鸡空肠中淀粉酶与胰蛋白酶活性显著提高(P<0.05)。5)与对照组相比,玉米-杂粕型饲粮中添加400或600 mg/kg复合纤维素酶均可以显著提高蛋鸡空肠中钠-葡萄糖协同转运蛋白-1(SGLT-1)mRNA相对表达量(P<0.05)。综上可知,在玉米-杂粕型饲粮中添加复合纤维素酶可以通过提高饲粮中营养物质的释放量而增强蛋鸡小肠消化酶活性及肝脏中糖代谢相关酶活性,还能提高空肠中SGLT-1 mRNA相对表达量,进而改善生产性能。在本试验条件下,蛋鸡玉米-杂粕型饲粮中复合纤维素酶的最适添加量为400 mg/kg。

单宁提取物对西门塔尔育肥牛生长性能、营养物质表观消化率、血清生化和抗氧化指标的影响

本试验旨在探究饲粮中添加单宁提取物对西门塔尔育肥牛生长性能、营养物质表观消化率、血清生化和抗氧化指标的影响。选择膘情正常、体重[(543.13±13.54)kg]相近、健康无病的西门塔尔杂交牛60头,按年龄、体重、膘情、毛色均等的原则随机分为4组,每组15头。对照组(C组)饲喂基础饲粮,试验组(Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组)分别在基础饲粮中添加10、20和30 g/(头·d)的单宁提取物。预试期7 d,正试期120 d。结果表明:1)Ⅱ组的平均日增重显著高于C组(P≤0.05),料重比显著低于C组(P≤0.05)。2)第120天时,Ⅲ组的干物质表观消化率显著低于C组(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组的粗蛋白质表观消化率显著低于C组(P<0.05)。3)第60天时,Ⅰ组、Ⅱ组的血清尿素氮含量显著低于C组(P<0.05)。第120天时,Ⅱ组的血清尿素氮含量显著低于C组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组的血清总蛋白含量显著高于C组(P<0.05)。4)第60天时,Ⅰ组、Ⅱ组的血清丙二醛含量显著低于C组(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组的血清总抗氧化能力显著高于C组(P<0.05)。第120天时,Ⅰ组、Ⅱ组的血清丙二醛含量显著低于C组(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组的血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于C组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组的血清总抗氧化能力显著高于C组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加单宁提取物可提高西门塔尔育肥牛的生长性能,改善氮代谢和抗氧化性能。本试验条件下,西门塔尔育肥牛饲粮中单宁提取物的适宜添加水平为20 g/(头·d)。

低聚木糖和牛磺酸对犊牛生长性能、腹泻率和营养物质表观消化率的影响

本试验旨在探究低聚木糖(XOS)和牛磺酸(Tau)对犊牛生长性能、腹泻率和营养物质表观消化率的影响。选取健康状况良好的45日龄左右的荷斯坦公犊牛60头,按照体重[(80±1)kg]相近原则,分为4组(每组15个重复,每个重复1头),分别为对照组(C组)、10 g/(d·头)XOS组(X组)、4 g/(d·头)Tau组(T组)、10 g/(d·头)XOS+4 g/(d·头)Tau组(XT组)。添加剂饲喂至犊牛77日龄。每天记录犊牛采食量和腹泻情况,在犊牛45、63、77和93日龄晨饲前称重并测量体尺,在犊牛63、77和93日龄分别连续3 d采集粪便,测定营养物质表观消化率。结果表明:1)4组间犊牛始重无显著差异(P>0.05),T组犊牛末重显著高于C组和XT组(P<0.05)。犊牛45~63日龄时,4组间犊牛平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)差异不显著(P>0.05),X、T、XT组料重比(F/G)与C组相比显著降低(P<0.05)。犊牛64~77日龄时,4组间犊牛ADG、ADFI、F/G均差异不显著(P>0.05)。犊牛78~93日龄时,T组犊牛ADG显著高于C、X、XT组犊牛(P<0.05),ADFI显著高于C组(P<0.05),但与X、XT组差异不显著(P>0.05);4组间F/G无显著差异(P>0.05)。日龄对犊牛生长性能有显著影响(P<0.05),随着日龄的增长,犊牛的ADG、ADFI显著提高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05)。处理和日龄的互作效应对生长性能无显著影响(P>0.05)。2)X、T和XT组犊牛45~63日龄腹泻率和粪便评分显著低于C组(P<0.05),与C组相比,X、T和XT组犊牛45~63日龄腹泻率分别降低30.11%、32.69%、34.62%。日龄对犊牛腹泻率具有显著影响(P<0.05),各组腹泻率随着日龄的增长逐渐降低。处理和日龄之间的互作效应对腹泻率无显著影响(P>0.05)。3)添加XOS和Tau对犊牛各日龄体尺指标和体尺指数无显著影响(P>0.05)。日龄对犊牛体尺指标和体尺指数有显著影响(P<0.05),随着日龄的增长,犊牛的体尺指标显著提高(P<0.05),体长指数、体躯指数、胸围指数显著提高(P<0.05),管围指数显著降低(P<0.05)。处理和日龄的互作效应对体尺指标和体尺指数均无显著影响(P>0.05)。4)犊牛63、77日龄时,各组间犊牛干物质(DM)、粗脂肪(EE)、粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率无显著差异(P>0.05)。犊牛93日龄时,T组犊牛CP、NDF表观消化率显著高于C组和XT组(P<0.05);各组间DM、EE、ADF表观消化率无显著差异(P>0.05)。日龄对犊牛营养物质表观消化率有显著影响(P<0.05),随着日龄的增长,犊牛的营养物质表观消化率显著提高(P<0.05)。处理和日龄的互作效应对营养物质表观消化率无显著影响(P>0.05)。综上所述,添加4 g/(d·头)Tau对犊牛生长性能、腹泻率、CP及NDF表观消化率改善效果最好。

L-半胱氨酸对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素分泌的影响

旨在探讨L-半胱氨酸(L-Cys)对体外培养绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)增殖、凋亡和类固醇分泌的影响。本研究采集1~1.5岁龄体重相近饲养条件相同的30只健康性成熟小尾寒羊母羊新鲜卵巢,从优势卵泡(2~8 mm)中收集GCs,随机分为5组,每组6个重复,各组添加L-Cys浓度分别为0、100、300、500和700μmol·L^(-1),培养48 h后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测GCs的凋亡情况,采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平并采用实时荧光定量PCR和Western blot分析L-Cys对绵羊颗粒细胞增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB 1)、凋亡相关基因(BAX、Caspase-3、Bcl-2)和类固醇分泌相关基因的(STAR、3β-HSD、CYP 11A1、CYP 19A1)mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,100、300和500μmol·L^(-1)组的L-Cys均可显著促进绵羊GCs的增殖活力(P<0.05),并显著抑制其凋亡率(P<0.05)。添加300μmol·L^(-1)的L-Cys显著抑制了孕酮(P 4,P<0.05)的分泌。进一步研究发现,300μmol·L^(-1)和500μmol·L^(-1)组的L-Cys可以上调增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB 1)mRNA表达水平,其中300μmol·L^(-1)组的增殖蛋白(PCNA、CCND2、CCNB1)表达量显著上升(P<0.05);100μmol·L^(-1)和300μmol·L^(-1)组显著下调凋亡相关基因(BAX、Caspase-3)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。添加300μmol·L^(-1)L-Cys显著降低了类固醇相关基因(STAR、3β-HSD)mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),添加100μmol·L^(-1)和300μmol·L^(-1)L-Cys显著升高了类固醇相关基因(CYP 11A1、CYP 19A1)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。综上,L-Cys通过上调基因PCNA、CCNB1、CCND2、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达、下调基因BAX、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达,促进绵羊GCs增殖,抑制其凋亡;L-Cys通过下调基因STAR、3β-HSD mRNA及其蛋白表达以及上调基因CYP 11A1 mRNA及其蛋白表达抑制P 4的分泌。

包被γ-氨基丁酸对断奶应激期羔羊血清生化指标、营养物质表观消化率及瘤胃发酵功能的影响

本试验旨在研究饲粮中添加包被γ-氨基丁酸(GABA)对断奶应激期羔羊血清生化指标、营养物质表观消化率及瘤胃发酵功能的影响。选择48只健康、体重[(26.14±1.40)kg]相近的45日龄湖羊羔羊,随机分为4组,每组4个重复,每个重复3只羊。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础饲粮中添加100、140、180 mg/d包被GABA。羔羊48日龄断奶(记为第1天),在第-3、1、3、7天采集血液测定相关指标,第-3、1、3、7、14天采集瘤胃液,第14天进行消化代谢试验。试验期为21 d。结果表明:1)与对照组相比,添加包被GABA显著降低了羔羊血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P<0.05),显著升高了血清白细胞介素-4(IL-4)含量(P<0.05)。时间显著影响了血清IFN-γ、IL-4、IL-6、TNF-α含量(P<0.05),随着时间延长,血清中IFN-γ、IL-4、IL-6、TNF-α含量先增加后降低。2)与对照组相比,添加包被GABA显著降低了羔羊血清D-乳酸(D-LA)含量、二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组羔羊血清中DAO活性显著低于对照组、Ⅰ组(P<0.05)。时间显著影响了羔羊血清中D-LA含量、DAO活性(P<0.05),随着时间延长,血清D-LA含量先增加后降低,对照组、Ⅰ组血清DAO活性先增加后降低。3)Ⅱ组干物质(DM)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率显著高于其他3组(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ组间无显著差异(P>0.05);Ⅱ组酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅰ组显著高于Ⅲ组(P<0.05);Ⅱ组、Ⅲ组粗蛋白质(CP)和粗脂肪(EE)表观消化率显著高于Ⅰ组和对照组(P<0.05)。4)添加包被GABA对羔羊瘤胃发酵参数无显著影响(P>0.05);时间显著影响了羔羊瘤胃pH,氨态氮(NH 3-N)、总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸、丙酸含量及乙丙比(P<0.05),pH先增加后降低,NH 3-N、TVFA、乙酸、丙酸含量先增加后短暂降低又增加,乙丙比逐渐降低。综上所述,在饲粮中添加包被GABA可降低断奶应激期内羔羊血清炎症因子含量,缓解肠道应激损伤,改善瘤胃发酵功能,提高营养物质表观消化率。在本试验条件下,包被GABA的最佳添加量为140 mg/d。

藿香提取物对夏季蛋种鸡产蛋性能、内分泌激素、抗应激能力、抗氧化能力及繁殖性能的影响

本试验旨在探究藿香提取物(ARE)对夏季蛋种鸡产蛋性能、蛋品质、内分泌激素水平、抗应激能力、抗氧化能力和繁殖性能的影响。选取288只65周龄、健康且产蛋率相近的大午金凤蛋种鸡,随机分成4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加0.05%(0.05%ARE组)、0.10%(0.10%ARE组)和0.15%(0.15%ARE组)藿香提取物的试验饲粮。预试期7 d,正试期49 d。结果显示:1)与对照组相比,0.15%ARE组蛋种鸡第1~49天产蛋率极显著提高(P<0.01),各试验组第1~49天平均日采食量均极显著提高(P<0.01);0.15%ARE组第1~28天料蛋比显著低于0.05%、0.10%ARE组(P<0.05)。2)饲粮添加不同水平藿香提取物对蛋种鸡蛋品质相关指标无显著影响(P>0.05)。3)0.15%ARE组第49天血清中促性腺激素释放激素(GnRH)、雌二醇(E_(2))含量和促卵泡素(FSH)活性极显著高于其他组(P<0.01);0.10%ARE组第28天血清中FSH、促黄体生成素(LH)活性极显著高于对照组和0.05%ARE组(P<0.01)。4)与对照组相比,0.15%ARE组第49天血清中三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、四碘甲状腺原氨酸(T_(4))含量显著提高(P<0.05),第28天血清中瘦素(LEP)含量极显著降低(P<0.01)。5)0.15%ARE组第28天血清中皮质酮(CorT)含量极显著低于对照组和0.10%ARE组(P<0.01),各试验组第49天血清中CorT含量极显著低于对照组(P<0.01);0.15%ARE组第28天和第49天血清中热休克蛋白70(HSP70)含量显著降低(P<0.05)。6)0.10%ARE组第28天血浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于其他组(P<0.01);与对照组相比,各试验组第49天血浆中T-SOD活性极显著提高(P<0.01),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。7)0.05%ARE组种蛋受精率显著高于对照组和0.10%ARE组(P<0.05);与对照组和0.05%ARE组相比,0.15%ARE组种蛋死胚率显著降低(P<0.05),母鸡提供的健雏率显著提高(P<0.05)。综上所述,在饲粮中添加藿香提取物可以通过提高夏季蛋种鸡的抗应激能力和抗氧化能力来提高机体健康水平,同时可以调整机体内分泌,进而提高夏季蛋种鸡的产蛋性能和繁殖性能,并且本试验中以0.15%藿香提取物的应用效果最佳。

线粒体tRNA-Lys(T7719G)基因变异影响绵羊颗粒细胞凋亡生理机制研究

本团队前期研究发现小尾寒羊线粒体tRNA-Lys基因(T7719G)变异与产羔数显著相关,并降低了颗粒细胞凋亡率,为此,开展了该变异影响颗粒细胞凋亡生理机制的研究。本研究选取G、T基因型绵羊各3只,屠宰后取卵巢组织培养颗粒细胞,颗粒细胞生理指标检测试验分为两组,每组3个重复,分别检测线粒体基因组拷贝数,线粒体呼吸酶复合物Ⅰ、复合物Ⅱ、复合物Ⅲ、复合物Ⅳ、复合物Ⅴ活性,线粒体耗氧量和胞外产酸能力、ROS产量、ATP水平和膜电位,以及tRNA-Lys总量和氨酰化水平,13个mtDNA编码多肽蛋白表达水平。结果表明,G基因型颗粒细胞线粒体拷贝数与T基因型差异极显著(P<0.01),为T基因型的1.78倍。G基因型细胞线粒体复合物Ⅲ活性是T型细胞的1.25倍(P<0.05),表明G基因型细胞氧化呼吸功能增强。G基因型颗粒细胞线粒体耗氧量、ATP偶联耗氧量比T基因型细胞分别提高了6.84%(P<0.05)和15.46%(P<0.01),G基因型细胞糖酵解能力显著降低(P<0.01),活性氧含量水平显著降低了34%,ATP含量明显上升,为T基因型的1.25倍(P<0.05),线粒体膜电位显著上升,为T基因型的1.24倍(P<0.01);G基因型细胞tRNA-Lys总量显著提高50%(P<0.01),氨酰化tRNA-Lys比例较T型细胞提高33.4%(P<0.01)。线粒体基因组编码的13个多肽(ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5、ND6、CtyB、COⅠ、COⅡ、COⅢ、ATP6、ATP8)表达水平均显著提高(P<0.05)。初步解析了线粒体tRNA-Lys(T7719G)变异影响绵羊颗粒细胞凋亡的生理机制,即tRNA-Lys(T7719G)变异影响tRNA-Lys稳态和氨酰化水平,影响mtDNA编码的多肽翻译效率,同时引起拷贝数、ATP水平、ROS含量和部分酶活性变化,进而改变线粒体能量代谢功能和细胞凋亡。

γ-氨基丁酸对绵羊卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇激素分泌的影响

【目的】该文章旨在探究γ-氨基丁酸(GABA)对绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡及类固醇激素分泌的影响。【方法】卵巢GCs培养液中分别添加0、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)和10^(-5)mol/L的GABA处理24 h后,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测GCs增殖及凋亡情况,筛选出GABA适宜培养浓度用于后续试验,采用ELISA检测GABA对GCs雌激素(E_(2))及孕酮(P_(4))分泌的影响,RT-q PCR及Western blot技术检测促GCs增殖(PCNA、CCNB1、CCND1)、促凋亡(Caspase-3、Bax)、抗凋亡(Bcl-2)和类固醇激素合成相关基因(CYP11A1、St AR、3β-HSD、CYP19A1)m RNA及蛋白的表达。【结果】添加GABA处理绵羊卵巢GCs 24 h,各组均可显著促进GCs增殖(P<0.05),抑制其凋亡(P<0.05)。GABA可显著上调PCNA、CCNB1、CCND1、Bcl-2 m RNA及蛋白表达量(P<0.05),显著下调Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白表达量(P<0.05)和Bax/Bcl-2比值(P<0.05)。GABA可显著促进P_(4)的分泌(P<0.05),显著抑制E_(2)的分泌(P<0.05)。显著上调St AR、3β-HSD、CYP11A1的m RNA及蛋白表达水平(P<0.05),显著下调CYP19A1的m RNA及蛋白水平(P<0.05)。【结论】GABA通过调节CCNB1、CCND1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2、Bax基因表达促进GCs的增殖,抑制其凋亡;通过调节St AR、3β-HSD、CYP11A1、CYP19A1基因表达促进GCs的P_(4)分泌,抑制E_(2)生成。

果寡糖对哺乳羔羊生长性能及断奶应激的影响

本试验旨在研究果寡糖对哺乳羔羊生长性能及断奶应激的影响。选择15日龄体重相近的湖羊公羔44只,随机均分为4组,每组11只。对照组开食料中不添加果寡糖,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组开食料中分别添加0.5%、1.0%和1.5%的果寡糖。试验期间记录羔羊采食量和体重,在断奶当天(第0天)、第3天和第7天采集血液样品,测定血清生化指标。羔羊60日龄断奶,断奶后继续饲喂至74日龄,试验期共59 d。结果表明:1)试验Ⅱ组羔羊结束体重和平均日增重(ADG)显著高于对照组(P<0.05)。2)第0天、第3天和第7天,试验Ⅱ、Ⅲ组血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05)。第0天和第7天,试验Ⅱ组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P<0.05)。第0天、第3天和第7天,试验Ⅰ、Ⅲ组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P<0.05)。3)第0天、第3天和第7天,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组血清白细胞介素-4(IL-4)含量显著高于对照组(P<0.05),血清白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于对照组(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著低于对照组(P<0.05),试验Ⅱ组血清干扰素-γ(IFN-γ)含量显著低于对照组(P<0.05)。4)第3天和第7天,试验Ⅱ组血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)和皮质醇(COR)含量显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,在开食料中添加果寡糖可提高哺乳羔羊免疫力,缓解断奶应激,进而提高生长性能。本试验条件下,果寡糖的适宜添加量为1.0%。

淫羊藿提取物对老龄种公鸡精液品质、生殖内分泌激素及繁殖性能的影响

本试验旨在探究不同水平淫羊藿提取物对老龄种公鸡精液品质、生殖内分泌激素及繁殖性能的影响。选取72只体重[(2.94±0.01)kg]相近、健康的65周龄大午金凤父母代种公鸡,随机分成4组,每组6个重复,每个重复3只,单笼饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础饲粮中添加0.05%、0.10%和0.15%的淫羊藿提取物。饲养试验持续7周。试验第4周(69周龄)和第7周(72周龄)收集精液,测定精液品质;试验第4周和第7周采集血液,测定血清生殖内分泌激素水平;试验最后2周收集合格种蛋以重复为单位入孵,用于测定繁殖性能指标。结果显示:与对照组相比,1)试验第4周时,各试验组种公鸡精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组有效精子数显著增加(P<0.05);试验Ⅱ组精子密度显著提高(P<0.05)。试验第7周时,试验Ⅱ、Ⅲ组种公鸡精液量显著增加(P<0.05);试验Ⅲ组精子活力显著提高(P<0.05)。2)试验第4周时,试验Ⅱ、Ⅲ组精浆谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)活性显著降低(P<0.05);试验第7周时,试验Ⅲ组精浆GOT、GPT活性显著降低(P<0.05)。3)试验第4周时,各试验组精浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著提高(P<0.01);试验Ⅱ、Ⅲ组精浆总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05)。试验第7周时,各试验组精浆总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著提高(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组精浆丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);试验Ⅱ组精浆T-AOC显著提高(P<0.05)。4)试验第4周时,各试验组血清促性腺激素释放激素(GnRH)水平显著降低(P<0.05),血清促黄体素(LH)和睾酮(T)水平显著提高(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组血清促卵泡素(FSH)水平显著提高(P<0.05)。试验第7周时,各试验组血清GnRH水平极显著降低(P<0.01);试验Ⅱ、Ⅲ组血清FSH、LH水平显著提高(P<0.05);试验Ⅲ组血清T水平显著提高(P<0.05)。5)试验Ⅱ、Ⅲ组受精率和入孵蛋孵化率显著提高(P<0.05);试验Ⅲ组受精蛋孵化率和入孵蛋健雏率显著提高(P<0.05),死胚率显著降低(P<0.05)。综上所述,淫羊藿提取物可以通过调控生殖内分泌激素,提高精浆抗氧化能力,减少精子损伤,从而改善精液品质,提高老龄种公鸡的繁殖性能,且其在饲粮中的适宜添加量为0.15%。

果寡糖对哺乳羔羊营养物质表观消化率及粪便微生物菌群的影响

本试验旨在研究果寡糖对哺乳羔羊营养物质表观消化率及粪便微生物菌群的影响。选择15日龄、体重相近的湖羊羔羊44只,随机分为4组:对照组开食料中不添加果寡糖,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组开食料中分别添加0.5%、1.0%和1.5%果寡糖。所有羔羊60日龄断奶,记为第0天。羔羊第-7、7天进行消化代谢试验。试验期间记录羔羊腹泻情况并采集直肠粪样。断奶后继续饲喂至74日龄,试验期共59 d。结果表明:1)处理显著影响哺乳羔羊腹泻率以及腹泻频率(P<0.05),对照组哺乳羔羊腹泻率和腹泻频率显著高于各试验组(P<0.05)。时间、处理×时间对羔羊腹泻率和腹泻频率无显著影响(P>0.05)。2)处理对羔羊干物质采食量(DMI)及粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率影响显著(P<0.05),对干物质(DM)和粗脂肪(EE)的表观消化率无显著影响(P>0.05)。Ⅱ组DMI显著高于对照组(P<0.05),与Ⅰ、Ⅲ组无显著差异(P>0.05)。对照组羔羊CP表观消化率显著低于各试验组(P<0.05)。时间显著影响了DMI、CP、EE、NDF、ADF表观消化率(P<0.05),断奶后各组DMI高于断奶前,断奶后各组CP、EE、NDF、ADF表观消化率较断奶前降低。处理×时间对哺乳羔羊DMI、DM、CP、EE、NDF、ADF表观消化率无显著影响(P>0.05)。3)处理、时间均显著影响了羔羊粪便乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量(P<0.05)。随着试验时间的延长,各试验组羔羊乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著高于对照组(P<0.05),大肠杆菌和沙门氏菌数量显著低于对照组(P<0.05)。处理×时间显著影响了乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量(P<0.05)。综上所述,在开食料中添加果寡糖可提高哺乳羔羊营养物质表观消化率,并可通过增加肠道有益菌数量、抑制有害菌生长,减少羔羊腹泻。本试验条件下,在哺乳羔羊饲粮中果寡糖的适宜添加量为1.0%。

3种羊源益生菌对瘤胃体外发酵参数和养分降解率的影响

本试验旨在研究3种羊源益生菌[海氏肠球菌(K2)、枯草芽孢杆菌(Ha)和酿酒酵母菌(Ma)]对瘤胃体外发酵参数及养分降解率的影响。采用瘤胃体外发酵方法,设8个组(每组6个重复),其中7个组分别添加K2、Ha、Ma、K2+Ha、Ha+Ma、K2+Ma和K2+Ha+Ma,K2、Ha和Ma添加浓度分别为1×10^(8)、1×10^(7)和1×10^(7)CFU/g,另设不加菌的对照组,测定发酵2~48 h的产气量以及挥发性脂肪酸、微生物蛋白含量等发酵参数和养分降解率。结果表明:发酵48 h时K2+Ma和K2+Ha+Ma组的产气量均达最高,较对照组分别显著增加了9.54%和6.32%(P<0.05),且快速降解部分产气量和慢速降解部分产气量均显著升高(P<0.05)。与对照组比较,K2+Ma组的微生物蛋白、总挥发性脂肪酸和丙酸含量均显著增加(P<0.05)。另外,不同单菌和复配对养分降解率的影响不同,K2+Ma组的干物质、粗蛋白质和总能降解率最高,而K2+Ha+Ma组的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维降解率最高,均显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,K2+Ha+Ma和K2+Ma组合体外发酵效果较好,可为饲用益生菌的开发提供借鉴。

嗜酸乳杆菌对不同羽毛损伤程度太行鸡生产性能、啄羽行为和血浆中5-羟色胺水平的影响

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌对不同羽毛损伤程度太行鸡生产性能、啄羽行为和血浆中5-羟色胺(5⁃HT)水平的影响。采用双因素试验设计,因素1为羽毛损伤程度(正常、损伤),因素2为嗜酸乳杆菌添加水平(0、0.1%、0.2%、0.3%)。先选取羽毛正常和羽毛损伤的42周龄太行鸡各240只,再分别随机分为4个组,分别饲喂在基础饲粮中添加0(基础饲粮组)、0.1%、0.2%、0.3%嗜酸乳杆菌的饲粮,每组6个重复,每个重复10只。预试期7 d,正试期56 d。结果显示:1)与基础饲粮组相比,添加0.1%、0.2%、0.3%嗜酸乳杆菌均显著降低了啄羽次数(P<0.05),显著降低了血浆中皮质酮(CORT)水平(P<0.05),显著降低了盲肠菌群中脱硫菌门的相对丰度(P<0.05);添加0.2%、0.3%嗜酸乳杆菌均显著提高了平均蛋重(P<0.05),显著提高了盲肠菌群中乳杆菌属的相对丰度(P<0.05),显著降低了盲肠菌群中巨单胞菌属的相对丰度(P<0.05),显著提高了血浆中5⁃HT水平,并显著降低了血浆中5-羟吲哚乙酸(5⁃HIAA)/5⁃HT比值(P<0.05);此外,添加0.2%嗜酸乳杆菌还显著了提高产蛋率(P<0.05),显著降低了啄物次数(P<0.05),显著提高了血浆中5⁃HIAA水平(P<0.05)。2)与正常组相比,损伤组平均日采食量(ADFI)、啄羽次数及盲肠菌群中脱硫菌门的相对丰度显著增加(P<0.05),啄地和盯物次数显著减少(P<0.05),血浆中色氨酸(Trp)、5⁃HIAA水平及5⁃HIAA/5⁃HT比值显著降低(P<0.05)。综上可知,羽毛损伤会增加太行鸡群内啄羽的发生频率;饲粮中添加0.2%的嗜酸乳杆菌可通过调节肠道菌群以及提高血浆中5⁃HT水平来降低啄羽行为的发生频率,提高动物福利及生产性能。

内蒙古高原东南缘森林-草原交错带节肢动物群落多样性特征

利用人工网捕等方法对内蒙古高原东南缘森林-草原交错带节肢动物群落的多样性进行调查。共记录节肢动物15目77科326种,分属于昆虫纲、蛛形纲和多足纲,其中蜘蛛目、双翅目、同翅目、膜翅目个体数量分别占总数的10%以上,为该地区的优势类群。由森林向草原过渡的过程中,节肢动物的个体数、物种数、物种多样性和均匀度随环境梯度变化而逐渐增多,至交错带森林-草甸区或草甸-草原区达到最大,到草原带降至最低。交错带具有最高的个体数、物种数和物种多样性,且显著高于两侧的森林带和草原带,表明大尺度森林草原交错带具有显著的边缘效应。不同植被地带间节肢动物群落的相似性均较低,表明不同植被地带间节肢动物的群落组成差异很大。森林带与森林-草甸区、草甸-草原区和草原带的相似性逐级减小,这说明随着环境梯度的变化,交错带、草原带节肢动物群落组成已与森林带发生明显分化,且分化越来越大。多元回归分析表明,森林斑块数、森林覆盖率是影响节肢动物物种多样性和均匀度的决定因素,森林斑块数、森林斑块平均面积、森林覆盖率是决定节肢动物个体数和物种数分布的重要因素。不同植被地带天敌个体数百分率为(0.3631±0.0416)%^(0.5249±0.0365)%,天敌物种在维护森林-草原交错带生态系统平衡中起着重要的作用。

硫在反刍动物营养中的作用及其需要量的研究

作者综述了硫在反刍动物营养中所起的重要作用,并对生产中硫的需要量进行了分析研究。

承德无角山羊耳成纤维细胞系的建立与冷冻保存研究

【目的】试验以甜菜碱作为冷冻保护剂对承德无角山羊耳成纤维细胞系进行冷冻保存,旨在优化冷冻保护效果,以期在细胞水平上长期保存这一地方品种家畜的遗传资源。【方法】采用组织块培养法建立承德无角山羊耳成纤维细胞系,利用甜菜碱作为冷冻保护剂对其进行玻璃化冷冻,以不同浓度(5%、10%、15%、20%及25%)甜菜碱为试验组,以不同浓度(10%和20%)二甲基亚砜(DMSO)为对照组,对承德无角山羊耳成纤维细胞进行冷冻,复苏后检测细胞的存活率、增殖活力以及细胞中B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因表达量,同时评估甜菜碱的毒性。【结果】本研究建立的承德无角山羊耳成纤维细胞系生长态势良好,细胞纯度较高,细菌、真菌和支原体3类微生物检测结果均为阴性,生长曲线呈S型,达到了建立成纤维细胞系的要求;当甜菜碱浓度为15%时细胞存活率最高,达90.86%,极显著高于对照组(P<0.01),细胞增殖活力及Bcl-2/Bax基因表达量均显著高于对照组(P<0.05),且甜菜碱的毒性远低于传统冷冻保护剂DMSO(P<0.05)。【结论】试验成功以甜菜碱作为单独的冷冻保护剂对承德无角山羊耳成纤维细胞系进行低温冷冻保存,从而保护了承德无角山羊的遗传资源。