长链非编码RNA通过调控上皮-间充质转化参与胶质瘤侵袭和转移的研究进展

胶质瘤是发病率和病死率均较高的恶性肿瘤之一,治疗后易复发且患者中位生存期短。上皮-间充质转化(EMT)在胶质瘤的侵袭、转移过程中具有重要作用。长链非编码RNA(lncRNA)通过多种信号通路参与胶质瘤细胞的EMT过程,EMT可增强肿瘤细胞的运动和迁移能力,促进肿瘤细胞进入血液或淋巴循环,进而发生转移。EMT的调控机制十分复杂,多种生长因子、激酶、转录因子、非编码RNA等参与其中。本文对lncRNA通过调控EMT参与胶质瘤侵袭和转移的研究进展做一综述。

景天三七醇提物体外抗菌作用的研究

目的研究景天三七醇提物的体外抗菌作用.方法采用试管稀释法测定景天三七醇提物对14种常见病原菌的最低抑菌浓度(MIC).结果景天三七醇提物对11种细菌有不同程度的抗菌作用,而对3种真菌的抑菌效果较差.结论景天三七醇提物有体外抗菌作用.

泌尿生殖道感染沙眼衣原体PmpF基因多态性及分布特征

目的探讨泌尿生殖道感染沙眼衣原体PmpF基因的多态性及与临床感染的关系。方法收集2013年1月到2014年12月于解放军252医院就诊患者送检的泌尿生殖道分泌物标本,标本处理后使用沙眼衣原体核酸检测试剂盒筛选阳性标本,然后以巢式PCR扩增PmpF基因,扩增得到的PmpF基因选用4种内切酶进行酶切及RFLP分析并确定其基因型,根据PmpF-RFLP结果,选择代表菌株测定PmpF基因序列进行系统发育分析,进一步验证PmpF-RFLP结果,同时测定代表菌株的Omp1基因序列并与参考菌株进行比较,从而确定代表菌株的血清型。通过χ~2检验探讨沙眼衣原体PmpF基因型与患者性别、年龄的关系以反映其临床分布特征。结果 2年间从妇科、泌尿科和皮肤科3个科室获得阳性标本178份,117份标本扩增得到PmpF基因,PmpF-RFLP将117份标本分为3个Type型,占比分别为2.6%、36.8%、60.7%,挑选26株菌株进行Omp1序列测定,结果显示26株菌株属于D、Da、E、F、G、H、J 7种血清型,统计学分析表明PmpF基因型与患者性别、年龄的Fisher精确检验值分别为0.167、0.008。结论本地区引起泌尿生殖道感染的沙眼衣原体可以根据PmpF基因分成3个基因型,包括D、Da、E、F、G、H、J 7种血清型,血清型与PmpF基因型无对应关系,PmpF基因型与患者年龄有关,与性别无关。

外源性高糖对脾切除小鼠血糖的影响及其机制探讨

目的探讨持续外源性葡萄糖干预是否影响胰岛β细胞的内分泌功能,以及脾脏是否也参与该过程。方法外科手术切除小鼠全脾。将实验小鼠分为8组,分别以不含葡萄糖的纯水及10%、15%和20%葡萄糖饮水喂养正常(4组)和脾切除小鼠(4组)3周。测定小鼠空腹血糖和胰岛素水平,计算各组小鼠高血糖发生率;进行胰岛素释放试验、胰岛组织免疫组织化学双染色、胰腺组织活性氧簇(ROS)测定及胰岛β细胞葡萄糖转运体-2(GLUT-2)表达分析。结果 20%葡萄糖饮水喂养的正常组和脾切除组小鼠出现高血糖,发生率分别为60%和75%;所有高血糖小鼠胰岛素释放能力降低,出现胰岛β细胞凋亡。脾切除组高血糖小鼠,胰岛β细胞ROS水平升高,GLUT-2表达水平降低更加显著。结论脾脏参与外源性高糖对胰岛内分泌功能损伤的保护作用涉及胰岛β细胞ROS和GLUT-2表达水平的改变。

豚鼠衣原体GPIC0474多克隆抗体制备

目的对GPIC0474进行克隆、重组、表达并制备GPIC0474的多克隆抗体,鉴定GPIC0474是否与其相似基因肺炎衣原体包涵体膜蛋白CPn0308具有相似的定位。方法通过PCR扩增GPIC0474,构建pGEX-6P2-GPIC0474重组质粒并转化,筛选阳性克隆提取质粒进行测序分析。对重组质粒进行诱导表达,以GST-GPIC0474为免疫原,对Balb/C小鼠进行常规免疫,分离血清获得多克隆抗体。结果成功制备了GPIC0474的多克隆抗体。结论试验所制备的GPIC0474的多克隆抗体为研究GPIC0474的定位提供了材料,进而为以后研究GPIC0474的功能奠定了基础。

沙眼衣原体多态膜蛋白PmpF基因克隆及生物信息学分析

目的克隆沙眼衣原体的多态膜蛋白PmpF基因,分析其生物学特征。方法以沙眼衣原体L2菌株DNA为模板,PCR扩增PmpF基因,克隆后测序,采用生物信息软件、数据库对其进行同源性比对,并分析其编码蛋白的主要化学特征、结构功能以及B细胞抗原表位。结果 PCR扩增实验株沙眼衣原体PmpF基因核苷酸序列长度为3 099bp,该菌株与同一生物型同源性≥99.97%,与不同生物型同源性<89.32%;与同一生物型氨基酸序列同源性≥99.90%,与不同生物型同源性达<89.25%。编码蛋白的分子质量单位为112.538 2ku,等电点为9.15,该蛋白具有信号肽和2个结构域。对蛋白质的二级结构和柔性区、氨基酸的亲水性、抗原指数及表面可及性预测结果分析,推测该蛋白含有14个优势B细胞抗原表位。结论本研究克隆了沙眼衣原体PmpF基因,推测其表达蛋白含B细胞抗原表位。为研究此基因的生物学功能奠定了基础。

泌尿生殖道感染沙眼衣原体PmpH基因多态性分析

目的探讨泌尿生殖道感染沙眼衣原体多态膜蛋白H(PmpH)基因的多态性及与临床感染的关系,为研究PmpH作为候选疫苗在不同人群的应用差异提供理论基础。方法收集泌尿生殖道标本,标本处理后筛选阳性标本,巢式PCR扩增PmpH基因并进行序列测定,比对分析确定多态性位点,构建系统发育树进行基因分型,用卡方检验探讨PmpH基因型与患者性别、年龄的相关性。结果共获得阳性标本86份,70份标本扩增得到PmpH基因。多态性分析共发现21个多态性位点,其中13个位点能引起氨基酸差异。根据系统发育树的结果,将70例标本分为3个基因型。χ^(2)检验结果表明:PmpH基因型与性别没有相关性,与年龄具有相关性,20岁以下患者、30~40岁患者和40岁以上患者中,基因型1型最多,占比57.14%~77.27%;20~30岁患者中,基因型2最多,占比为58.33%。结论本组患者中引起泌尿生殖道感染的沙眼衣原体的PmpH基因共发现21个多态性位点,13个位点能引起氨基酸差异,PmpH基因可以分成3个基因型,基因型与患者年龄具有相关性。

儿童呼吸道流感嗜血杆菌感染128例流行特征分析

目的了解儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,HI)现状及该菌对常用抗生素的耐药情况和流行特征,为流感嗜血杆菌感染的防控提供科学依据。方法收集2010年3月至4月河北北方学院第一附属医院儿科门诊患儿,从6个月至5岁呼吸道感染患儿咽拭子标本中分离鉴定流感嗜血杆菌,采用K-B法测定其对抗生素的敏感性,并用cefinase纸片检测菌株的β-内酰胺酶;对分离菌株进行生物分型,同时用随机扩增多态性(RAPD)技术进行基因同源性分析。结果 128份标本中分离出流感嗜血杆菌49株,分离率为38.3%。分离菌株对亚胺培南、氯霉素、头孢克罗100%敏感,对氨苄西林的耐药率最高(42.9%)。分离株β-内酰胺酶产酶率38.8%。生物学分型以Ⅵ型(38.8%)、Ⅷ型(36.9%)为主。RAPD聚类分析显示菌株分为8型,其中最多的一型有15株,占全部分离株的30.6%,是主要流行株。结论 128份标本中约40%的呼吸道感染患儿可分离出HI,菌株对氨苄西林耐药率高,主要流行菌株为Ⅵ型和Ⅷ型,存在明显克隆传播的克隆。

基于Omp1基因的泌尿生殖道感染沙眼衣原体多样性及分布特征分析

目的基于主要外膜蛋白基因(Omp1)研究泌尿生殖道感染患者沙眼衣原体多态性及分布特征,为该疾病的诊治及疫苗研究奠定基础。方法对泌尿生殖道感染临床标本常规处理后,使用沙眼衣原体核酸检测试剂盒筛选阳性标本,然后以巢式PCR扩增Omp1基因,选择4个限制性内切酶进行RFLP分析确定其基因型,选择代表菌株测定Omp1的DNA序列并与参比菌株比较确定其血清型,最后将基因型及血清型与患者的性别、科室及年龄进行对比分析,研究其分布特征。结果 2013-2014年2年间共筛选得到178份阳性标本,61份标本扩增获得Omp1基因,Omp1-PFLP分析将61份标本分为6个基因型,占比分别为24.59%,24.59%,4.92%,9.84%,3.28%和32.79%,血清型分析表明61份标本属于F,H,J,G,Da,D和E 7种血清型,E型及F型占比最多。结论本地区引起泌尿生殖道感染的沙眼衣原体主要属于F,H,J,G,Da,D和E 7种血清型,E型及F型占比最多,基因型及血清型与患者性别具有相关性,与科室、年龄无相关性。