miR-146b-3p通过靶向结合LCN1抑制肺鳞癌生物学行为

目的探讨miR-146b-3p通过靶向结合脂质运载蛋白1(LCN1)抑制肺鳞癌生物学行为的效果。方法构建稳定过表达miR-146b-3p和稳定敲低LCN1的NCI-H2170和NCI-H226细胞系,CCK-8法和克隆实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。生物信息学分析miR-146b-3p和LCN1与肺鳞癌临床病理特征的关系,并预测两者之间的靶向关系。双荧光素酶报告实验验证miR-146b-3p和LCN1的靶向关系。RT-PCR检测miR-146b-3p在肺鳞癌细胞中的表达。裸鼠成瘤实验检测肿瘤体质量、体积和肺鳞癌组织中miR-146b-3p的表达。Western blot检测细胞蛋白表达。结果miR-146b-3p在肺鳞癌组织中低表达,肺鳞癌细胞miR-146b-3p过表达后,细胞增殖能力降低,克隆数减少,细胞周期受到阻滞,细胞凋亡率增加,裸鼠移植瘤生长受到抑制,BCL2、CCNB1和CDK2蛋白减少,BAX蛋白增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。LCN1在肺鳞癌组织中高表达,敲低LCN1表达可抑制肺鳞癌细胞增殖,影响细胞周期,促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析显示,LCN1是miR-146b-3p的靶基因;双荧光素酶报告实验显示miR-146b-3p mimic与LCN1-WT共转染使荧光素酶活性降低(P<0.05)。肺鳞癌细胞共转染miR-146b-3p和LCN1后,可以逆转miR-146b-3p抑制细胞增殖和克隆、促凋亡的作用。结论miR-146b-3p可能是通过下调LCN1表达抑制肺鳞癌细胞增殖,影响细胞周期,促进细胞凋亡。