侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达并激活脑内一氧化氮神经元(英文)

本研究利用Fos蛋白和一氧化氮合酶(nNOS)双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠心血管相关核团中c-fos表达及一氧化氮神经元的影响,以探讨ADM在中枢的作用部位并研究其在中枢的作用是否有NO神经元参与。侧脑室注射ADM(1 nmol/kg,3 nmol/kg)诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核和腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。侧脑室注射ADM(3 nmol/kg)引起脑干的孤束核、外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加;ADM(1 nmol/kg)亦可引起室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加,而对孤束核、外侧巨细胞旁核内的Fos-nNOS双标神经元无影响。降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)受体拮抗剂CGRP_(8-37)(30 nmol/kg)可明显减弱此效应。以上结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元并激活室旁核、视上核、孤束核及外侧巨细胞旁核内的一氧化氮神经元,此效应可能部分由CGRP受体介导。

正中隆起室管膜面赘生物及其形成过程的电镜观察

在正常SD雄性大鼠 (2周龄～ 2 7月龄 )第三脑室底正中隆起前缘附近 ,本研究用扫描电镜观察到有呈圆柱状中空赘生物出现。该赘生物可分为基底部、体部及末梢部 ,其直径为 2～ 10 μm ,长度为 2～ 2 30 μm。通过观察该赘生物的形成过程 ,有理由认为它是室管膜细胞过度增生所致 。

大鼠神经干细胞体外生长特性

目的 :观察大鼠神经干细胞的体外生长特性。方法 :利用无血清培养基悬浮培养 ,观察神经干细胞的体外生长过程。并比较不同接种密度 ,不同传代时间对神经干细胞生长的影响。用免疫细胞化学技术检测神经干细胞巢蛋白 (nestin)的表达 ;用吖啶橙 (AO) /溴化乙啶 (EB)检测细胞活性 ;用DAPI荧光染料标记细胞。结果 :神经干细胞聚合成细胞团生长 ,细胞团成分复杂。细胞接种密度以 5× 1 0 5个细胞 /ml组生长较好 ;原代细胞生长 3～ 4d后传代为宜。传代后 4d时可获得大量nestin阳性细胞。DAPI标记率为 1 0 0 %。结论 :细胞团成分复杂。神经干细胞要高密度接种 ,及时传代。

体外培养的神经干细胞聚集体结构分析

观察大鼠神经干细胞聚集体的内部结构并分析其细胞组成。培养神经干细胞 ,分别做HE染色 ;nestin、GFAP、NSE免疫组化 ;细胞超微结构应用扫描电镜和透射电镜观察。结果显示 ,细胞聚集体内有健康细胞和凋亡或坏死细胞 ,后者被前者包裹形成典型的鸟巢状结构。健康细胞分为两大类 ,一种是小细胞 ,电子密度低 ,细胞表面较光滑 ;nestin强阳性和 /或GFAP阳性。另一种细胞较大 ,有突起 ,电子密度高 ,nestin弱阳性。健康细胞间存在粘附连接 ,细胞内可见到吞噬体和板层状膜样结构。推测神经干细胞聚集体内的小细胞是较幼稚的神经干细胞 ,大细胞为处于分化前期的细胞。神经干细胞具有吞噬功能。

脉冲Nd:YAG激光蚀刻后窝沟封闭剂的渗透性、密合性研究

目的 :通过研究脉冲Nd :YAG激光蚀刻 面窝沟后窝沟封闭剂的渗透性和密合性 ,探讨激光蚀刻在窝沟封闭中的应用价值。方法 :将 4 2颗离体前磨牙随机分为 6组 ,激光能量密度 (energydensity ,ED) 5 0J/cm2 组 ;激光ED 10 0J/cm2 组 ;激光ED 2 0 0J/cm2 组 ;激光ED 5 0 0J/cm2 组 ;激光ED 10 0 0J/cm2 组 ;酸蚀组。每组 7颗牙齿。各激光组分别根据各自的ED进行照射 ,酸蚀组用 35 %的磷酸蚀刻 ,然后进行窝沟封闭 ,6组间两两比较其渗透性和密合性。结果 :10 0 0J/cm2 组的宏观渗透性最好 ,与5 0 0J/cm2组比较无差别 (P >0 .0 5 ) ,与其它四组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,优于其它四组。酸蚀组密合性最好 ,与 5 0 0J/cm2 组、10 0 0J/cm2 组无差别 (P >0 .0 5 ) ,与其它三组比较有显著性差异 ,明显优于其它三组 (P <0 .0 1)。结论

抗原诱导免疫耐受的EAE大鼠中枢神经系统中一氧化氮合酶和细胞凋亡的变化

抗原髓鞘素于致敏注射前后给大鼠口服诱导免疫耐受 ,于致敏后第 14天 ,处死动物 ,检测中枢神经系统NADPH d和TUNEL阳性细胞 ,观察NOS表达和细胞凋亡的变化 ,结果为 1 EAE口服组nNOS的表达明显少于非口服组。 2 口服组与非口服组凋亡细胞数的变化趋势一致 ;相同的症状级别 ,凋亡细胞数也近似。提示CNS中 ,nNOS活性的降低可能与口服免疫耐受的形成有关 ,但CNS中的细胞凋亡与口服免疫耐受之间 ,未发现有明确的相关性。

大鼠神经干细胞体外培养

目的:介绍一种较成熟的大鼠神经干细胞体外培养方法。方法:取新生大鼠(1d之内)侧脑室前角周围的脑组织,用EDTA:胰蛋白酶(1:1)消化,制成单细胞悬液,以2-5×105个细胞/ml接种于无血清培养基中。观察其增殖、分化情况,并用nestin、GFAP、NSE免疫细胞化学对细胞进行定性。结果:培养细胞呈悬浮生长,具有增殖能力,倍增时间为2d,nestin阳性。诱导分化后细胞贴壁生长,体积增大,并发出形态各异的突起。可见GFAP和NSE阳性细胞。结论:培养细胞经鉴定为神经干细胞。本方法简单、易操作,可行性强。

家兔SO低位中枢NOS阳性神经元的分布及其在急性重症胆管炎时表达的改变

目的探讨家兔胆道口括约肌(sphincter of Oddi,SO)低位中枢一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元及神经纤维的分布特征及其在急性重症胆管炎时表达的改变。方法将10只家兔随机分为2组,①正常对照组;②急性重症胆管炎组。经灌注固定后,取材腹腔神经节、胸髓及其相应脊神经节、迷走神经下神经节和延髓。以NADPH-d组织化学染色显示NOS阳性神经元及神经纤维。结果对照组结果如下,①腹腔神经节内未见NOS阳性神经元胞体。②迷走神经下神经节和脊神经节内有极少量NOS阳性神经元胞体。③胸髓内,NOS阳性神经元主要分布在整个灰质中间带及后角固有核,NOS阳性神经纤维主要分布在后角胶状质,后角内、外侧边缘,中央管周围区,背外侧索和前索沟缘束。④延髓内,NOS阳性神经元主要分布在孤束外侧核、迷走神经背核、疑核、延髓中缝核及网状结构。急性重症胆管炎组与对照组相比可见阳性标记物显著增多、着色加深。结论①急性重症胆管炎时,SO低位神经中枢的NOS活性上调;②在SO的阳性纤维中,不包括交感性节后纤维。

额前叶与工作记忆研究的若干进展

近10年间,额前叶与工作记忆研究有了飞速发展,代表组为Goldman-Rakic研究组。目前,国内对此研究还较少。额前皮质区(prefrontal cortex,PFC)包括8、9、10、11、12、32、44、45、46、47区,PFC在进化上很新,人类特别发达,面积很大,平均占全部大脑皮质的23.5％,它与躯体运动、头眼运动、发音以及高级思维活动有关。工作记忆是由Baddeley于1983年从认知心理学角度提出的一种短时记忆的概念,代表执行工作记忆的典型反应为延迟反应(delayed-response task)。

脑深部电刺激,跨颅磁刺激及迷走神经电刺激对神经精神病的治疗作用

美国Andrews RJ.(2003年5月)指出,在过去的十年间,通过神经调制作用和神经保护作用,业已开展了三种对神经、精神疾病的新一代疗法.

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠穹窿下器的扫描电镜观察

穹窿下器属于感受性室周器官,缺乏血脑屏障,可能是外周免疫信息进入脑内的窗口之一。为证实这一观点,我们观察了在外周致敏引起中枢神经系统炎症情况下,即实验性变态反应性脑脊髓炎（experimentalallergic encephalomyelitis,EAE）大鼠穹窿下器脑室面的形态变化。1 材料和方法1.1 实验用雌性Wistar大鼠（体重 180～230g）12只,