过度训练致大鼠心肌和肾组织细胞凋亡及山莨菪碱干预的影响

目的同步研究过度训练致心肌和肾组织细胞凋亡及山莨菪碱干预的影响。方法采用大鼠游泳至力竭方式建立过度训练模型,将大鼠随机分为对照组、力竭组及山莨菪碱组,力竭组又根据力竭后恢复时间分为力竭即刻组、力竭后6h组和力竭后24h组;山莨菪碱组于力竭运动前腹腔注射山莨菪碱10mg/kg,分为山莨菪碱干预后6h组和山莨菪碱干预后24h组。用TUNEL法、图像分析仪及流式细胞术检测各组大鼠心肌和肾组织细胞凋亡情况。结果力竭即刻组大鼠心肌细胞凋亡较对照组增多(P<0.05),力竭后6h组心肌细胞凋亡更为明显(P<0.05),力竭后24h组心肌细胞凋亡明显减少,但仍明显高于对照组(P<0.05);力竭即刻、6h、24h组大鼠肾组织细胞凋亡逐渐增多,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。山莨菪碱干预后6h组和山莨菪碱干预后24h组心肌和肾组织凋亡细胞数较力竭同时间组明显减少(P<0.05)。结论心肌和肾组织细胞凋亡是过度训练致心肌和肾脏损伤的细胞学基础;心肌损伤比肾损伤恢复快;山莨菪碱可通过抑制心肌和肾组织细胞的过度凋亡,对心、肾损伤起到明显的防治作用。

山莨菪碱对过度训练大鼠急性肾损伤的保护作用

目的研究过度训练致急性肾损伤的特点及山莨菪碱的保护作用。方法采用大鼠游泳至力竭建立过度训练致急性肾损伤模型。将大鼠随机分为7组,即安静对照组、力竭即刻组、力竭6h组、力竭12h组、力竭24h组、山莨菪碱6h组、山莨菪碱24h组,用全自动生化仪检测各组大鼠血Cr、Ur、CK及尿γ-GT的改变;光镜观察各组肾组织结构的改变;用TUNEL法检测各组大鼠肾组织细胞凋亡,采用图像分析仪计算肾组织细胞凋亡率。结果力竭后大鼠站立不稳,对声光刺激反应淡漠。力竭后即刻组大鼠血Ur、CK明显升高(P<0.05),力竭6h后血Ur、CK继续升高(P<0.01),力竭12h后血Ur、Cr、CK均有所下降,尿γ-GT明显升高(P<0.01),力竭24h后血Ur、Cr、CK均恢复到正常,尿γ-GT继续升高(P<0.01)。光镜下力竭后即刻组大鼠肾组织结构仅见部分肾小球囊及肾小管扩张,在皮髓质交界处及髓质小血管内可见大量红细胞堆积,力竭12h大鼠可见肾小管上皮细胞刷状缘不规整,部分脱落,肾小管管腔内可见颗粒管型和透明管型,在皮髓质交界处及髓质可见大量细胞核深染,有固缩现象;力竭后即刻、6、12、24h组大鼠肾组织凋亡细胞数逐渐增多,多位于皮髓质交界处及髓质的肾小管和集合管,各组大鼠尿γ-GT与肾组织细胞凋亡率有明显相关性(P<0.01)。应用山莨菪碱后,力竭大鼠精神状态较好,游泳时间明显延长(P<0.01);力竭后6h及24h血Ur、Cr、CK及尿γ-GT均明显降低(P<0.05),肾组织结构改善,肾组织凋亡细胞数明显减少。结论过度训练可引起急性肾损伤,肾组织细胞凋亡是其损伤的主要表现形式;山莨菪碱可提高运动能力,同时可减少肾组织细胞凋亡,进而对肾损伤起到明显的保护作用。

氧化应激反应在过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子的影响

目的:过度训练可引起急性肾损伤(OTIAKI),为了解氧化应激反应在过度训练致急性肾损伤中的作用,本文研究了过度训练大鼠血清及肾组织SOD和MDA的改变,观察了山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对上述变化的影响。方法:将80只雄性Wistar大鼠随机分为安静对照组(CN)、力竭运动组(ES)、山莨菪碱干预组(AD)、旋覆花素干预组(IB)、苦碟子干预组(IS)。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练致急性肾损伤模型。采用黄嘌呤氧化酶法检测血清和肾组织SOD和MDA的改变。结果:力竭后即刻和力竭后6h大鼠血清和肾组织SOD明显降低(P<0.05),MDA明显升高(P<0.05);血清SOD和MDA两个指标于力竭后24h恢复达到对照组水平,肾组织SOD和MDA与力竭后6h比较均有所恢复,但未达到对照组水平。于力竭后6h,山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子三种药物对过度训练引起的大鼠血清和肾组织SOD活性的降低和MDA含量的增高均具有不同程度的逆转作用;于力竭后24h,三种药物组大鼠血清和肾组织SOD和MDA均恢复到对照组水平。结论:氧化应激反应主要参与力竭后早期引起的肾损伤过程,山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子在OTIAKI早期可通过抗氧化应激反应来发挥肾脏保护作用。

旋覆花素及苦碟子对过度训练大鼠肾组织细胞凋亡调控基因的影响

目的:观察旋覆花素及苦碟子对过度训练大鼠肾组织细胞Bax和Bcl-2的表达以及Bax/Bcl-2比值变化的影响,探讨上述二种药物抗肾组织细胞凋亡的分子机制。方法:采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型,将大鼠随机分为安静对照组、力竭运动组(力竭6h、力竭24h)、旋覆花素防治组(旋覆花素6h、旋覆花素24h),苦碟子防治组(苦碟子6h、苦碟子24h)。采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织Bax、Bcl-2蛋白的表达;采用CMIAS病理图像分析仪测量Bax、Bcl-2蛋白表达的平均光密度。结果:力竭后6h及24h大鼠肾组织Bax的表达增强(P<0.05),Bcl-2的表达减弱(P<0.05),Bax/Bcl-2比值明显增高(P<0.05);旋覆花素和苦碟子6h及24h组大鼠与同期力竭组比较,Bax的表达减弱(P<0.05),Bcl-2的表达增高(P<0.05),Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05)。结论:旋覆花素和苦碟子均可通过调节Bax、Bcl-2及Bax/Bcl-2比值而起到抗过度训练大鼠肾组织细胞凋亡的作用。

过度训练致大鼠肾组织超微结构的变化及山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子干预的影响

目的:研究过度训练大鼠肾组织结构的变化,观察山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子对这些变化的影响。方法:采用大鼠游泳至力竭建立过度训练致急性肾损伤模型;用日立7170A全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Cr)、尿素(Ur)、磷酸肌酸激酶(CK)及尿γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GT);光镜及电镜观察各组大鼠肾组织结构的改变。结果:力竭后即刻大鼠血清Ur、Cr、CK即明显升高,6h达高峰,24h恢复到对照水平;于力竭后6h尿γ-GT也明显升高,力竭后24h尿γ-GT升高更为明显。光镜观察发现,力竭后即刻和力竭后6h大鼠肾组织结构变化轻微,力竭后24h可见肾小管上皮细胞刷状缘不规整,部分脱落,在皮髓质交界处及髓质可见大量细胞的细胞核深染,有固缩现象。电镜观察发现,力竭即刻大鼠肾小球滤过膜足突融合,近曲小管微绒毛排列稍紊乱,上皮细胞质明显水肿,线粒体大部或全部嵴和膜融合或消失,核染色质浓缩,电子密度增高并边集于核膜下,提示有早期细胞凋亡现象;力竭后6h及24h上述变化加重。AD、IB及IS组大鼠游泳至力竭的时间比ES明显延长(P<0.05,P<0.01);AD、IB及IS组大鼠于力竭后6h血Ur、Cr、CK及尿γ-GT均明显低于ES组(P<0.05);于力竭后24h,尿γ-GT也较ES组明显降低(P<0.01);AD、IB及IS 6h及24h组大鼠肾组织结构和超微结构变化减轻。结论:过度训练可引起肾功能和组织结构的损伤;山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子均在减轻过度训练大鼠肾组织形态学损伤和改善肾功能的同时,明显提高了大鼠的运动能力。

山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练大鼠肾细胞凋亡的影响

目的 评价山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练大鼠肾细胞凋亡的影响。方法 雄性Wistar大鼠72只，体重200-220g，随机分为5组：正常对照组（C组，n=8）、力竭对照组（E组，n= 16）、山莨菪碱组（A组，n=16）、旋覆花素组（IB组，n=16）、苦碟子组（IS组，n=16）。采用游泳至力竭建立过度训练动物模型。A组于力竭前即刻腹腔注射山莨菪碱10 mg／kg，IB组于力竭前24 h及力竭前即刻胃肠灌入旋覆花素25 ml／kg，IS组于力竭前即刻腹腔注射苦碟子20 ml／kg，力竭后6、24 h处死大鼠取肾脏标本，采用流式细胞术及TUNEL法检测肾细胞凋亡，并计算肾细胞凋亡率。结果 与C组比较，E组、A组、IB组和IS组力竭后6、24 h肾细胞凋亡率升高（P〈0.05或0．01）;与E组比较，A组、IB组和IS组力竭后6、24 h肾细胞凋亡率降低（P〈0．05）。结论 山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子预先给药可减轻过度训练诱发大鼠肾细胞凋亡。

山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练致急性心肌损伤大鼠的影响

目的 探讨山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练致急性心肌损伤大鼠的影响。方法 雄性Wistar大鼠80只，体重200～220g，随机分为5组：正常对照组（C组，n=8）、力竭对照组（E组，n=24）、山莨菪碱组（A组，n=16）、旋覆花素组（IB组，n=16）、苦碟子组（IS组，n=16）。采用游泳致力竭建立过度训练动物模型。A组于力竭前即刻腹腔注射山莨菪碱10mg/kg，IB组于力竭前24h和力竭前即刻151腔灌人旋覆花素25ml／kg，IS组于力竭前即刻腹腔注射苦碟子20ml／kg。取标本检测大鼠血清磷酸肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK-MB）的活性，光镜观察心肌组织形态学，采用流式细胞术及TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡，并计算心肌细胞凋亡率。结果 与C组比较，E组、A组、IB组和IS组血清CK及CK-MB升高，心肌细胞凋亡率升高（P〈0．05）；与E组比较，A组、IB组及IS组大鼠血清CK及CK-MB及心肌细胞凋亡率均降低（P〈0．05）。光镜下，E组的心肌细胞核深染，有固缩现象；而A组、IB组及IS组的心肌心肌组织学变化均未见异常。结论 山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子预先给药通过抑制心肌细胞的凋亡，可减轻过度训练致大鼠的心肌损伤。

山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子对过度训练大鼠心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的探讨山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子对过度训练大鼠心肌Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠80只,体重200～220 g,随机分为5组：正常对照组（C组,n=8）、力竭对照组（E组,n=24）、山莨菪碱组（A组,n=16）、旋覆花素组（IB组,n=16）、苦碟子组（IS组,n=16）。采用游泳至力竭建立过度训练动物模型,A组于力竭前即刻腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg,IB组于力竭前24 h、即刻口腔灌入旋覆花素25 ml/kg,IS组于力竭前即刻腹腔注射苦碟子20 ml/kg。检测大鼠心肌Bax、Bcl-2蛋白的表达,并对Bax/Bcl-2蛋白比值与心肌细胞凋亡率进行相关性分析。结果与C组比较,E组Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,Bax/Bcl-2蛋白比值升高。A组、IB组和IS组Bax、Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白比值升高（P〈0.05）。与E组比较,A组、IB组和IS组Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白比值降低（P〈0.05）。各组Bax/Bcl-2蛋白比值与心肌细胞凋亡率呈正相关（r=0.727,P〈0.01）。结论山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子预先给药可通过下调过度训练大鼠心肌促凋亡蛋白Bax、上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制心肌细胞凋亡。