塞来昔布对NB4细胞增殖、凋亡及VEGF表达的影响

目的探讨塞来昔布对急性早幼粒细胞白血病细胞的抑制作用及可能机制。方法不同浓度塞来昔布处理急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4,MTT法检测塞来昔布作用后细胞的增殖情况。采用流式细胞术测定NB4细胞周期分布及凋亡;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达以及RT-PCR检测塞来昔布作用对VEGF、HIF-1α在mRNA水平的表达。结果 MTT显示塞来昔布对NB4细胞生长有明显抑制作用。20～80μmol/L塞来昔布作用24h,NB4细胞G0/G1期比例明显升高,而S期细胞比例下降(P<0.05);塞来昔布处理组细胞凋亡率明显高于对照组,Western blot显示Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05);RT-PCR显示塞来昔布可抑制VEGF及HIF-1α的mRNA表达。结论塞来昔布在体外可抑制急性早幼粒细胞白血病细胞增殖并诱导凋亡。

雷帕霉素对慢性髓性白血病细胞增殖的抑制作用及其机制

目的探讨雷帕霉素对慢性髓性白血病（CML）细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法用不同浓度雷帕霉素处理CML细胞系K562细胞，用MTT法检测雷帕霉素对K562细胞的增殖抑制率；Westernblot法及RT-PCR法检测不同浓度雷帕霉素作用后的K562细胞中mTOR、4E．BP1、p70S6K蛋白及mRNA表达水平，Westernblot法检测CML慢性期患者骨髓原代细胞中mTOR、4E．BPl、p70S6K蛋白及磷酸化水平，并以健康人骨髓细胞为对照；数据采用）（2检验、Fisher确切概率计算、单因素方差分析（ANOVA）方法进行分析。结果CML慢性期患者骨髓中roTOR、4E—BP1、p70S6K蛋白磷酸化水平与正常对照相比明显增高（70．6％对30．0％，76．5％对40．0％，73．5％对20．0％，P值均〈0．05）；20nmol／L及更高浓度雷帕霉素对K562细胞增殖有明显抑制作用；雷帕霉素作用可降低K562细胞中mTOR磷酸化水平，及4E—BP1、p70S6K蛋白及mRNA表达水平（P值均〈0．05）。结论roTOR途径在CML的发病中发挥重要作用，其靶向抑制剂雷帕霉素可通过阻断roTOR途径抑制K562细胞增殖。