不同固定方法制作大鼠眼球组织石蜡切片的比较

眼球是一种构造复杂的器官，其各部位的结构和密度不同，且各层次间的依附性和连接性较差。大鼠眼球组织的石蜡切片被广泛应用于眼科相关疾病的实验研究，而常规石蜡切片方法极易造成眼球变形，各层次之间结构分离、移位，

叶黄素对体外培养的人食管癌Ec-9706细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨叶黄素对体外培养的人食管癌9706细胞(esophageal carcinoma 9706,Ec-9706)增殖和细胞凋亡的影响。方法将Ec-9706细胞用含10%胎牛血清的RPMIl640培养基于37℃、5%CO_2/95%空气饱和湿度培养箱中培养。采用随机数字表法,将其随机分为4组:对照组(C组)和不同浓度叶黄素组(L_(1-3)组)。L_(1-3)组分别加入40、80和160μmol/L叶黄素;C组加入等体积RPMI1640培养液。采用噻唑兰法检测不同浓度叶黄素对人食管癌Ec-9706细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测Ec-9706细胞凋亡情况;采用免疫细胞化学方法检测Fas、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、cyclin D1和Caspase-3蛋白的表达。结果叶黄素可抑制Ec-9706细胞的增殖,诱导Ec-9706细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。叶黄素可下调Ec-9706细胞PCNA和cyclin D1蛋白表达,上调Fas和Caspase-3蛋白表达,且呈剂量依赖性。结论叶黄素可抑制体外培养的人食管癌Ec-9706细胞的增殖,诱导其凋亡,且呈浓度依赖性,其机制与下调PCNA和cyclin D1蛋白表达,上调Fas和Caspase-3蛋白表达有关。

TGF-β1对大鼠肩袖损伤修复术后腱-骨愈合的影响

目的评价转化生长因子β_1(transforming growth factorβ_1,TGF-β_1)对Wistar大鼠肩袖损伤重修复术后早期腱-骨界面愈合的影响。方法 54只Wistar大鼠,取双侧大结节止点处横断撕裂肩袖冈上肌腱全层造模,6周后重建肩袖止点,腱骨界面注射以纤维蛋白胶为载体的TGF-β_1缓释体诱导成骨。随机分为高、低剂量组和单纯手术对照组。术后1、2、3周随机分组处死动物,取肩袖标本作生物力学检测。结果肉眼观察各组断裂点均在肌腱缝合处以内。高剂量组最大抗拉强度、最大载荷百分比、刚度及最大横断面面积与低剂量组和对照组比较有显著差异(P<0.05)。低剂量组最大载荷百分比、最大抗拉强度、刚度、刚度百分比、最大横断面面积与对照组比较有显著差异(P<0.05)。高剂量TGF-β_1在肩袖损伤修复早期效果较佳,腱-骨界面的抗拉强度及刚度随着康复时间的延长而不断增强。结论 TGF-β_1加强腱-骨界面的最大抗拉强度、最大载荷百分比、刚度及最大横断面面积,诱导断面再生成直止点的复杂结构,促进肩袖损伤的愈合。

脑源性神经营养因子对神经干细胞增殖和分化的影响

目的：通过不同浓度脑源性神经营养因子（BDNF）对神经干细胞（NSCs）增殖与分化的影响,探讨合适的诱导时间和诱导浓度.方法：按照BDNF的浓度分为对照组,实验组2、20和200ng/ml BDNF.MTT法检测不同浓度BDNF在诱导后不同的时间点（1、3、5、7d）对细胞增殖的影响,免疫细胞化学法检测神经元的标记物-神经元特异性烯醇化酶（NSE）,并计算各组在不同时间点的神经元分化率.结果：不同浓度的BDNF实验组在诱导后不同时间（1、3、5、7d）MTT法所测OD值与对照组相比差异均无统计学意义.随着BDNF浓度的增加,神经干细胞分化为神经元的比率呈增高的趋势,差异有统计学意义.在分化的时间上,各组均在第3天时达到最高,其中实验组最高接近80%,而对照组仅为35%.结论：BDNF对NSCs的增殖无明显作用,BDNF能促进NSCs向神经元方向分化,其分化的比率在一定范围内呈剂量依赖性.

姜黄素对体外培养的人食管癌Ec-109细胞增殖和凋亡的影响

目的研究姜黄素对体外培养的人食管癌(esophageal carcinoma 109,Ec-109)细胞增殖和凋亡的影响。方法采用噻唑兰(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度姜黄素对人食管癌Ec-109细胞增殖的影响;流式细胞术检测Ec-109细胞的凋亡情况;免疫细胞化学方法检测Fas、增殖细胞核抗原(proliferating cellnuclear antigen,PCNA)蛋白表达的情况。结果姜黄素可显著抑制Ec-109细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(inhibitory concentraltion 50,IC_(50))为22.09μmol/L(姜黄素浓度为80μmol/L作用60h)。不同浓度姜黄素均可诱导Ec-109细胞凋亡。姜黄素可显著下调Ec-109细胞PCNA蛋白表达,显著上调Fas蛋白表达。结论姜黄素可抑制体外培养的人食管癌Ec-109细胞的增殖,诱导其凋亡。

GATA-4基因促进5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞向心肌分化

目的探讨转染外源性基因GATA-4促进5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向心肌细胞分化的作用。方法全骨髓法分离大鼠BMSCs,按照1∶2.5比率用脂质体法将GATA-4(pVP22-GATA-4/myc-His)质粒瞬时转染第3代BMSCs,转染72 h后加入10μmol/L 5-aza诱导24 h,观察细胞形态变化。转染48 h后,免疫细胞化学检测GATA-4、myc的表达。于诱导后28 d免疫细胞化学及免疫印迹法检测GATA-4、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的表达情况,以鉴定细胞分化。结果转染72 h后,免疫细胞化学结果表明实验组可见GATA-4、myc表达。诱导后28 d应用免疫细胞化学及免疫印迹法检测结果显示,实验组GATA-4、cTnT表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源表达GATA-4能够促进5-aza诱导的BMSCs向心肌分化。

丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

目的探讨丹参酮ⅡA对骨髓间充质干细胞(BMSC)定向分化为心肌样细胞的影响。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSC,第2代细胞应用终浓度为500ng/ml丹参酮ⅡA定向诱导(诱导组),将不添加任何诱导剂的BMSC设为对照组。应用免疫细胞化学技术检测结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA-actin)和心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。免疫荧光双标染色技术检测α-SCA-actin和cTnT的表达。透射电镜观察2组超微结构的改变。结果免疫细胞化学染色结果显示,与对照组比较,诱导组BMSC中结蛋白(50 279.6±2575.2)vs(1325.6±196.1)、α-SCA-actin(44 738.3±1963.3)vs(1446.3±202.4)、cTnT(27 658.8±2382.2)vs(1369.1±214.2)明显升高(P<0.01)。免疫荧光双标染色法检测诱导组α-SCA-actin阳性为红色,cTnT阳性为绿色,两者重叠部位为黄色,呈现共表达。透射电镜结果显示,诱导组细胞可见平行排列的肌丝并富含线粒体、糖原和核糖体以及丰富的粗面内质网。结论经丹参酮ⅡA诱导的BMSC具有向心肌细胞分化的表型。