杂色曲霉素对体外培养人外周血白细胞介素Ⅱ分泌影响的研究

杂色曲霉素是我国肿瘤高发区粮食中的优势污染霉菌毒素。为探讨杂色曲霉素 (ST)对人体免疫机能的影响 ,采用双抗体夹心ELISA方法对ST作用后人外周血单核细胞 (HPBMc)培养上清液中白血细胞介素Ⅱ (IL 2 )的分泌水平进行了检测。结果表明 ,不同浓度 ( 0 0 3 12 5～ 2mg L)ST处理 2 4h后 ,体外培养的HPB Mc的IL 2分泌均受到一定程度的抑制 ,其中以较低浓度ST( 0 0 3 12 5～ 0 12 5mg L)和较高浓度ST( 1～ 2mg L)抑制作用最明显 (P <0 0 5 )。在ST 1mg L作用 1～ 64h的时间范围内 ,ST对HPBMcIL 2的分泌总体表现抑制作用。ST处理后 8～ 64h ,随ST处理时间的延长 ,对IL 2分泌的抑制作用逐渐增强 (r =0 82 2 ,P <0 0 5 )。本研究结果提示 ,ST对HPBMcIL

杂色曲霉素对小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ分泌和表达的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的小鼠脾细胞IL-2及IFN-γmRNA表达及其蛋白分泌的影响。方法:分别采用半定量RT-PCR及ELISA方法,研究5种不同剂量ST(0.125mg/L,0.25mg/L,0.5mg/L,1mg/L,2mg/L)预处理对小鼠脾细胞直IL-2及IFN-γmRNA表达及其蛋白分泌的影响。结果:不同剂量ST预处理2h均可引起小鼠脾细胞IL-2及法IFN-γ表达的改变,但不同剂量影响不同,小剂量ST处理组(0.125、0.25mg/L)在ST处理后2h,可诱导脾细胞IL-2及IFN-γmRNA的表达;而大剂量ST处理组(1 mg/L、2mg/L)可明显抑制脾细胞IL-2及IFN-γmRNA表达及其相应蛋白的分泌,尤以ST 1mg/L的抑制作用最明显。结论:ST可影响小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ表达和分泌的改变,较小剂量组(0.125、0.25mg/L)表现为诱导作用,而较大剂量组(1 mg/L、2mg/L),则表现为明显抑制作用。

杂色曲霉素对体外培养HPBMcIFN-γ分泌的影响

目的 :探讨杂色曲霉素 (ST)对人T淋巴细胞分泌功能的影响。方法 :采用双抗体夹心ELISA方法对ST作用后人外周血单核细胞 (HPBMc)培养上清液中γ -干扰素 (IFN -γ)的分泌水平进行检测。结果 :不同浓度ST对IFN -γ分泌的影响不同 ,较低浓度ST 0 0 3 12 5mg/L - 0 12 5 0 0mg/L对IFN -γ的分泌有一定抑制作用 (P <0 0 5 ) ,而在 0 2 5mg/L以上浓度ST可刺激IFN -γ分泌 ,至 1mg/L达到高峰 (P <0 0 5 )。在 0 2 5mg/L - 1 0 0mg/L的浓度范围内 ,ST浓度和IFN -γ分泌呈正相关 (r=0 4 92 ,P <0 0 1) ;在ST 1mg/L作用 1h - 64h的时间范围内 ,ST对IFN-γ分泌的影响依时间不同作用也不同 ,在 4h - 8hIFN -γ的分泌降低 ( 8h ,P <0 0 5 ) ,而以后各组随着ST作用时间的延长IFN -γ水平逐渐增高 ,尤以 3 2h组增高最为明显 (P <0 0 5 ) ,在ST作用 16h - 64h的时间范围内 ,IFN -γ的分泌随着ST作用时间的延长而逐渐增加 ,两者呈正相关 (r=0 73 6,P <0 0 1)。结论 :ST对HPBMcIFN -γ分泌的影响表现在较低浓度和较短时间抑制IFN -γ分泌 ,而较高浓度和较长时间则诱导IFN -γ分泌 ,但继续增加ST浓度和作用时间并不继续增加IFN -γ分泌。

食管癌高发区粮食防霉实验

磁县是我国食管癌高发区，当地居民饮食中霉菌及其毒素污染严重。为了从病因水平上预防肿瘤发生，进一步探讨了磁县食管癌高发区居民饮食防霉措施。本实验研究了防腐剂富马酸二甲酯（ＤＭＦ）对磁县农户正在食用的储粮的抑霉防霉及抑菌作用。结果发现ＤＭＦ可明显抑制粮食中霉菌的生长。小麦洗液培养５６小时后ＤＭＦ处理组霉菌菌落数平均为２．３个，而对照组可达１２３．７个，抑制率为９５．１５％。在含有ＤＭＦ的培养基上霉菌不能生长。此外ＤＭＦ还有明显抑菌作用，加ＤＭＦ后４８ｈ即可抑制细菌生长，施药处出现明显的抑菌环。因此，应在食管癌高发区对农村储粮推广使用ＤＭＦ防霉措施，以期通过降低霉菌及其毒素的污染，阻断食管癌的霉菌病因，进一步降低食管癌发病率。

杂色曲霉素对人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响

目的探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的人外周血单个核细胞表面(HPBMc)HLAⅠ分子表达的影响。方法采用流式细胞定量术(FCM)和免疫印迹(Westernblot)分析方法,研究不同浓度ST(0.125、0.25、0.5、1和2mgL)处理后人外周血单个核细胞表面HLAⅠ分子表达的变化。结果FCM定量分析结果表明,经不同浓度ST处理24小时后,与对照组相比,各组细胞HLAⅠ的平均荧光强度均降低,以较高浓度(0.5、1和2mgL)ST处理组降低更明显(P<0.05)。在0.125mgL到2mgL的浓度范围内,随ST处理浓度的升高,HLAⅠ荧光指数逐渐降低,两者呈明显的负相关(r=-0.841,P<0.01)。免疫印迹结果也表明,随ST浓度的增高,HLAⅠ分子降低越明显。结论提示在0.125mgL到2mgL的浓度范围内,ST抑制人外周血单个核细胞表面HLAⅠ分子的表达呈现出负的剂量-反应关系。

杂色曲霉素对体外培养人胚支气管粘膜上皮的致癌作用初步研究

采用体外培养、动物接种方法研究了杂色曲霉素对体外培养的人胚支气管粘膜上皮致癌作用。结果发现，体外培养的人胚肺支气管组织块在杂色曲霉素处理后，γ射线照射的新生ＳＤ仔鼠皮下接种可见支气管粘膜及肺泡上皮增生。

赞皇县胃癌霉菌病因研究简介

全文综述了赞皇县胃癌高发区饮食和胃液霉菌及其毒素检测、杂色曲霉素致突变和动物诱癌实验、杂色曲霉素对体外培养的人胚胃粘膜细胞的致癌作用以及常见粮食污染霉菌毒素对机体免疫系统影响的研究情况 ,分析了霉菌及其相关因素与当地胃癌发生的可能关系。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对体外培养人外周血单核细胞增殖及肿瘤坏死因子-α分泌的影响

为探讨我国恶性肿瘤高发区居民饮食中的优势污染霉菌毒素 -脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)对人体免疫机能的影响 ,分别以流式细胞光度术 (FCM)、细胞计数、甲基噻唑基四唑 (MTT)比色、双抗体夹心EL ISA方法对 DON作用后人外周血单核细胞 (HPBM)增殖和肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)分泌情况进行了研究。FCM检测结果表明 ,HPBM经 PHA预刺激 48h后 ,低浓度 DON(5 0～ 5 0 0 ng/ ml)处理 6 h的细胞增殖指数 (PI)较对照组明显降低 (19.80 %～ 2 6 .0 1%∶ 37.84% ) ;而高浓度 DON (10 0 0～ 2 0 0 0 ng/ ml)处理 2 4h的细胞 PI值则显著高于对照组 (35 .74%～ 34.37%∶ 2 2 .85 % )。细胞计数和 MTT比色法结果显示 ,在 PHA存在的情况下 ,DON可抑制 HPBM的增殖。双抗体夹心 EL ISA法检测结果显示 ,5 0 0和 10 0 0 ng/ ml的 DON可明显降低 HPBM TNF- α分泌 (P<0 .0 1)。研究结果表明 ,根据作用时间和作用浓度不同及有无 PHA刺激 ,DON对 HPBM增殖的影响有所不同 ,但主要表现为对细胞增殖的抑制作用 ,并抑制 TNF- α的分泌 。

杂色曲霉素对体外小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素12表达与分泌的影响

目的 探讨杂色曲霉素(ST)对巨噬细胞免疫功能的影响。方法 分别采用半定量逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附法,研究0 .12 5 ,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0和2 .0mg·L- 1ST预处理对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素(IL) 12mRNA表达及其蛋白分泌的影响。结果 在0 .12 5～1.0mg·L- 1范围内,ST处理对小鼠腹腔巨噬细胞IL 12p4 0和IL 12p35mRNA的表达均有一定的抑制作用。但在蛋白水平,对IL 12分泌的影响不明显。当ST浓度达到2 .0mg·L- 1时,可明显抑制IL 12p4 0mRNA的表达及IL 12的分泌。结论 ST可抑制巨噬细胞IL 12的表达或分泌,提示ST可能在一定程度上对机体的细胞免疫功能产生不利影响。

伏马菌素B1对人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响

目的:探讨伏马菌素B1(FB1)对体外培养的人外周血单个核细胞表面(HPBMc)HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)、Western blot及半定量RT-PCR方法,研究不同浓度FB1(10和50μmol/L)处理后人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化。结果:FCM定量分析结果表明,经FB1处理24 h后,两组FB1处理细胞HLAⅠ-的平均荧光强度均较对照组降低(P<0.05),但是在两个处理组之间无统计学意义。Western blot也证实了上述结果。在mRNA水平上,分别检测了HLA-Ⅰ分子3个等位基因HLA-A,HLA-B,HLA-C的表达情况。结果显示,FB1处理后,HLA-A、HLA-B mRNA的表达均没有明显影响,仅HLA-C mRNA的表达较对照组降低。结论:10和50μmol/L FB1处理24 h可抑制人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达。

光线性角化病皮损细胞Bcl-2基因表达产物的定量分析

Ｂｃｌ－２蛋白是Ｂｃｌ－２基因的表达产物，可抑制细胞凋亡，在某些恶性肿瘤细胞出现过度表达。为探讨Ｂｃｌ－２蛋白与光线性角化病（ＡＫ）的关系，作者用流式细胞免疫荧光技术，检测了２７例ＡＫ。结果显示：２７例ＡＫ及正常对照的Ｂｃｌ－２蛋白相对含量ＦＩ（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＩｎｄｅｘ）分别为１．１５０±０．１８８和０．９９６±０．０６５（Ｘ－±Ｓ），０．０５＜Ｐ＜０．０１。但其中８例不典型增生严重ＡＫ的ＦＩ为１．３３５±０．０１７６（Ｘ－±Ｓ），与正常对照相比Ｐ＜０．０２。提示该病的Ｂｃｌ－２蛋白有增高的倾向。

经表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗非小细胞肺癌后的失败模式及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的失败模式及其临床意义。方法回顾性分析77例经EGFR-TKIs治疗的NSCLC患者的复发、转移情况,分析不同失败模式下患者的疾病无进展生存时间差异。结果均出现病灶转移、复发等疾病进展现象;其中73例(94.81%)单个病灶部位疾病进展,4例(5.19%)全身多处转移复发;49例(63.64%)出现新病灶导致疾病进展,28例(36.36%)原有病灶出现进展;肺部病灶进展34例(44.16%),肺外病灶进展40例(51.95%)〔中枢神经系统疾病进展20例(25.97%),骨肿瘤病灶进展13例(16.88%),肝脏病灶进展2例(2.60%),肾脏病灶进展3例(3.90%),其他部位2例(2.60%)〕,肺内及肺外病灶进展3例(3.90%)。肺外病灶进展患者的疾病无进展中位生存时间(12个月)显著长于肺内病灶进展(7个月)和肺内+肺外病灶进展患者(6个月)(P<0.05)。结论肺部和中枢神经系统疾病进展是EGFR-TKIs治疗NSCLC患者失败的主要模式,肺部进展患者的无疾病进展生存时间较短。

常见镰刀菌素与细胞凋亡的研究进展

某些常见镰刀菌素如伏马菌素 B1 、T- 2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮 - X可以诱导多种细胞发生凋亡 ,如肝细胞、肾细胞、胃肠细胞、免疫细胞和传代细胞。这些镰刀菌素诱导细胞凋亡的机制较为复杂 ,可能与神经鞘氨醇、某些基因如 P2 1、蛋白激酶、CAMP信号系统、细胞内 Ca2 + 水平等许多因素有关。

黄曲霉毒素G_1对体外培养HPBM增殖及TNF-α分泌的影响

目的 :研究黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养人外周血单个核细胞 (HPBM)增殖及细胞TNF -α分泌的影响。方法 :采用流式细胞术 (FCM)和MTT比色法研究AFG1对HPBM增殖的影响。以双抗体夹心ELISA法检测AFG1对HPBMTNF -α分泌的影响。结果 :FCM检测结果显示 ,AFG1作用 6h ,10 0 0 μg/L处理组HPBM的增殖指数明显高于对照组。AFG1作用 2 4h ,2 0 0 μg/L和 10 0 0 μg/L浓度的AFG1可明显刺激HPBM增殖 ;回归分析结果表明 ,AFG1作用 6h和 2 4h ,AFG1浓度均与增殖指数呈正相关 (r分别为 0 5 12 2和 0 5 119,P均 <0 0 5 )。MTT比色法结果显示 ,2 0 0 0 μg/LAFG1处理HPBM的A值明显高于对照组。AFG1在 10 0 μg/L浓度下可显著抑制TNF -α分泌 (P <0 0 5 )。结论 :AFG1对体外培养HPBM的增殖有刺激作用 ,在 10 0 μg/L浓度下对HPBMTNF -α的分泌有一定抑制作用。

杂色曲霉素对小鼠脾细胞IL-4mRNA表达和蛋白分泌的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的小鼠脾细胞IL-4mRNA表达及其蛋白分泌的影响。方法:分别采用半定量RT-PCR及ELISA方法,研究5种不同剂量ST(0.125mg/L、0.25mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L)预处理2h、12h对小鼠脾细胞IL-4mRNA表达及其蛋白分泌的影响,观察ST对IL-4影响的时效及量效关系。结果:ST预处理2h,较小剂量ST(0.125、0.25、0.5mg/L)处理组小鼠脾细胞IL-4mRNA的表达高于对照组,以0.5mg/L组表达最高;当ST预处理达到12h时,较小剂量ST处理组IL-4mRNA表达均低于对照组,其中以ST0.125、0.25mg/L组降低最明显。而大剂量ST(1mg/L、2mg/L)处理2h及12h对小鼠脾细胞IL-4mRNA表达均低于对照组。在蛋白水平上的改变与mRNA水平变化相似。结论:ST对小鼠脾细胞IL-4mRNA表达的影响与其剂量和作用时间有关,既可表现为抑制作用,也可表现诱导作用。

日光性角化病P53蛋白的定量分析

应用流式细胞免疫技术 ,对 2 7例日光性角化病 (SolarkeratosisSK)及 8例高分化皮肤鳞癌皮损细胞的P53蛋白进行了定量分析。SK的P53蛋白荧光指数 (FluerescenceIndexFI)高于正常皮肤 ,低于高分化鳞癌 ,P值均 <0 .0 5。SK及高分化鳞癌的P53蛋白阳性表达率分别为 4 0 .74 %、87.50 % ,正常皮肤为阴性表达。

黄曲霉毒素G_1诱发NIH小鼠肺癌的实验研究

目的 探讨经口给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对NIH小鼠的致癌作用。方法 将NIH小鼠随机分为 3组 :AFG13μg/kg组 ;AFG130 μg/kg组和对照组 ,实验组分别灌喂不同剂量的AFG1,对照组灌喂同等容量的生理盐水 ,3次 /周 ,共 2 4周。实验期间严密观察动物变化。实验第 5 8和 74周处死实验动物 ,观察各器官组织病变。结果 对照组动物各器官组织均未见明显病理改变。AFG1各处理组均有部分动物发生支气管上皮增生、肺泡上皮增生和肺腺癌。AFG13μg/kg组和AFG130 μg/kg组支气管上皮增生、肺泡上皮增生、肺腺癌率分别为 6 0 0 %、10 0 %、30 0 %和 2 8 6 %、35 7%、4 2 9%。

光线性角化病皮损的细胞DNA含量流式细胞分析

光线性角化病的病理组织学特征为不同程度的表皮细胞的非典型增生。为了更加客观地反映该病的这一特征,应用流式细胞技术定量分析了27例光线性角化病皮损细胞的DNA含量及细胞增殖活性。结果:光线性角化病细胞的增殖指数(PI)高于正常人皮肤的PI值(P<0.05),8例非典型增生严重的光线性角化病细胞的DNA指数(DI)高于其余19例光线性角化病的DI值(P<0.05)。提示:光线性角化病皮损细胞增殖活跃,细胞非典型增生程度越高,DNA含量异常越明显。