硫化氢对内毒素攻击大鼠肺组织细胞凋亡的影响及肺保护作用

目的初步探讨硫化氢(H2S)对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法将140只大鼠,随机分为4组:盐水对照组、LPS组、LPS+硫氢化钠(NaHS)组、LPS+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组35只,其中7只大鼠应用右心导管法测定2小时、4小时、6小时、8小时时平均肺动脉压(MPAP);剩余28只大鼠均于4小时或8小时时经颈总动脉放血处死动物留取肺组织,采用免疫组织化学技术检测肺组织B细胞淋巴瘤2基因(Bcl-2)、Fas蛋白表达变化;光镜下观察肺组织形态学变化并计算肺泡损伤数比值(IQA)作为肺损伤的组织学定量评价指标。结果气管内滴注LPS可引起肺组织损伤、IQA升高(P<0.01);各时间点肺MPAP升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)、Fas蛋白的表达升高(P<0.01)。预先给予NaHS可显著减轻LPS所致肺组织损伤、IQA下降;MPAP降低;Bcl-2蛋白表达升高、Fas蛋白的表达降低(均P<0.01);而预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤,IQA及各时间点肺MPAP升高更加明显;同时Bcl-2蛋白表达也降低更加明显、Fas蛋白的表达升高也更加显著(均P<0.05)。结论 H2S可通过减轻LPS攻击大鼠肺组织细胞凋亡程度而起到肺保护作用。

H2S对急性肺损伤大鼠PMN功能的影响机制

目的初步探讨硫化氢（H2S）对内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）大鼠PMN功能的影响机制。方法将112只大鼠，随机分为4组每组28只，即盐水对照组（A组）、LPS组（B组）、LPS＋硫氢化钠（NaHS）组（C组）、LPS＋炔丙基甘氨酸（PPG）组（D组），再根据给药时间分成两亚组（4h组和8h组）。均于给药4h（14只）或8h（14只）后经颈总动脉放血处死动物，留取血标本应用流式细胞学方法检测血PMNCDllb；在每一亚组各取7只大鼠留取肺组织，应用邻连茴香胺法测定肺组织髓过氧化物酶（MP0）活性、双抗体夹心ABC-ELlSA法检测肺组织中黏附分子-1（ICAM—1）的含量表达的变化，光镜下观察肺组织形态学变化并计算肺泡损伤数比值（IQA）作为肺损伤的组织学定量评价指标；剩余大鼠行支气管肺泡灌洗（BAL）并在光镜下计量支气管肺泡灌洗液（BALF）中PMN数目。结果气管内滴注LPS后可引起大鼠肺损伤、IQA升高、BALF中PMN的数目增多、MPO活性及ICAM-1蛋白表达上调，预先给予NaHS可显著减轻肺损伤、IQA下降、BALF中PMN的数目减少、MPO活性及ICAM-1蛋白表达下降，预先给予PPG可加重肺损伤、IOA升高、BALF中PMN的数目更加增多、MPO活性及ICAM-1蛋白表达上调（P均〈0．0l或P均〈O．05，F值=22．256或35．168；F值-32．760或54．722；F值=40．133或45．263；F值-85．223或98．187）；血PMNCDllb与BALF中PMN计数存在显著正相关（r-0．789，P均〈O．01），有统计学意义。结论H2S可通过减少ICAM-1，CDIib的表达、降低MPO活性来抑制ALI大鼠PMN的功能。

大承气汤对老年大鼠急性肺损伤过程中H_2S/CSE的影响

目的观察硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)在大承气汤抗脂多糖(LPS)所致老年大鼠急性肺损伤(ALI)过程中的变化。方法将88只SD老年大鼠随机分为假手术组、ALI模型组(经气管内滴注LPS复制ALI模型)、炔丙基甘氨酸(PPG,CSE抑制剂)组和大承气汤治疗组。分别于给药后4h、8h处死动物,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学法检测血浆H2S含量、肺组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性以及CSE活性的变化;RT-PCR方法检测肺组织CSEmRNA表达的变化。再将血浆H2S含量与上述指标进行相关性分析。结果气管内滴注LPS可引起肺组织明显的形态学改变;肺系数和肺组织MDA含量、MPO活性增加;血浆H2S含量、肺组织CSE活性及CSEmRNA表达下降。预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤;而给予大承气汤后,肺组织损伤减轻,肺系数和肺组织MDA含量、MPO活性下降,血浆H2S含量、肺组织CSE活性及CSEmRNA表达增加。相关性分析显示,H2S含量与CSE活性呈正相关(r值=0.950～0.981,P均<0.01);与其他指标呈负相关(r值=-0.985～-0.933,P均<0.01)。结论H2S/CSE体系的下调参与了LPS所致老年大鼠ALI的发病;上调H2S/CSE体系是大承气汤抗LPS所致老年大鼠ALI的作用机制之一。