喉癌组织RKIP基因甲基化表达调控研究

目的检测喉癌组织中Raf-1激酶抑制蛋白(Raf-1 kinase inhibitor protein,RKIP)基因启动子区域的甲基化状态及其蛋白表达情况,并探讨其临床意义。方法采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术及免疫组化方法检测53例喉癌组织及34例癌旁组织中RKIP基因启动子区域的甲基化状态及蛋白表达情况。结果喉癌及癌旁组织中RKIP基因启动子甲基化发生率分别为17%、3%,两者比较差异具有统计学意义(P=0.045)。结论 RKIP基因启动子区高甲基化状态可能是造成喉癌组织中RKIP表达缺失的分子机制之一,RKIP蛋白表达缺失与喉癌的发生发展及转移有关。

Raf-1激酶抑制蛋白在喉鳞癌中的表达及意义

目的探讨Raf-1激酶抑制蛋白(Raf-1kinase inhibitor protein,RKIP)在喉鳞癌以及正常喉黏膜中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测41例喉鳞癌及8例正常喉黏膜组织中RKIP、磷酸化的细胞外信号调节激酶(Phospho-extracellular signal-regulated kinase,P-ERK)的表达情况。结果喉鳞癌中RKIP表达比正常喉黏膜组织明显降低,差异有统计学意义(P=0.012)。RKIP在有淋巴结转移的喉癌中阳性率低于无转移的喉癌,差异有统计学意义(P=0.016)。有淋巴结转移的喉癌原发灶与其本身淋巴结转移灶间RKIP表达无显著差异。41例喉癌患者的原发灶标本中,RKIP与P-ERK的表达呈正相关性(P=0.003,r=0.456)。结论RKIP低表达的喉癌更容易发生转移。丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路受许多复杂的上游信号活化,喉癌中RKIP不能完全抑制该通路的活性。

脉络宁对老年性痴呆模型大鼠脑组织SIRT1基因表达的影响

目的观察中药复方脉络宁和谢海洲方,西药维生素(C+E)和阿托伐他汀药物干预对老年痴呆(AD)模型大鼠脑组织SIRT1基因表达的影响。方法用去卵巢同时腹腔注射D-半乳糖大鼠模拟早期AD模型,予以中药复方脉络宁和谢海洲方,西药维生素(C+E)和阿托伐他汀干预,采用Morris水迷宫检测大鼠用药前后学习记忆能力的变化,采用RT-PCR,Western印迹技术检测大鼠颞叶右侧皮层SIRT1基因表达的变化。结果与假手术组相比,去卵巢并注射D-半乳糖组逃避潜伏期明显延长;给药后,与病理组相比,四个给药组总逃避潜伏期明显缩短。与假手术组相比,病理组的SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量明显降低,而与病理组相比,四个给药组的SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量均有不同程度的升高。结论本模型大鼠颞叶皮层SIRT1 mRNA和蛋白质表达水平均降低;而脉络宁,谢海洲方,维生素(C+E),阿托伐他汀均可以不同程度的升高SIRT1 mRNA和蛋白质的表达水平,提示SIRT1表达的增加可能是这些药物对AD大鼠模型的神经保护作用分子机制之一。

去卵巢大鼠海马及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽含量的变化

目的观察雌激素缺乏对大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)含量的影响。方法选取清洁级4月龄雌性SD大鼠30只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢加雌二醇(E2)组(OVX+E2组),每组10只。除Sham组做假性手术外,其余2组均行双侧卵巢切除术;OVX+E2组去卵巢手术10d后给予E2皮下注射,100μg/kg,隔日1次。去卵巢手术后常规喂养4个月,获取组织标本,用于组织蛋白和组织总RNA的提取。用Western印迹法测定大鼠海马和皮层C-HCNPpp、N-HCNPpp的相对含量。用RT-PCR技术检测HCNPpp mRNA水平。结果OVX组大鼠海马和皮层中C-HCNPpp的相对含量较Sham组和OVX+E2组明显升高(P<0.05),而Sham组和OVX+E2组之间无显著差别(P>0.05),三组大鼠之间的海马和皮层中N-HCNPpp的相对含量差异不显著(P<0.05);OVX组和OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与Sham组无显著差异(P>0.05),OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与OVX组相比增高(P<0.05);三组大鼠皮层HCNPpp mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论雌激素缺乏可导致大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层HCNP的增多。

石家庄地区老年人APOE、LDLR和ER-α基因多态性与血清胆固醇水平的相关性

目的探讨阿尔茨海默病(AD)相关基因的基因多态性与血清胆固醇水平之间的相关性。方法 45岁以上普通健康中老年人群随机抽样201人,收集每个成员的基本信息并采静脉血3 ml。测定每个成员血清胆固醇水平,并采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RLFP)技术测定其APOE、LDLR和ER-α基因多态性分析与血清胆固醇水平的相关性。结果 APOE基因多态性与血胆固醇相关性:男性、年龄≥60岁亚组中胆固醇水平有差别,(P<0.05)、组间两两比较E3等位基因组胆固醇水平高于E2组(P<0.05);LDLR基因多态性与血清胆固醇相关性:全性别、年龄≥60岁亚组中aa型LDL-Ch水平高于Aa型(P<0.05);ER-α基因(PvuⅡ)多态性与血胆固醇相关性:男性、年龄≥60岁亚组中,p等位基因组HDL-Ch水平高低于P等位基因组(P<0.05)。结论 APOE,LDLR,ER-α(PvuⅡ)基因多态性与血胆固醇水平有关。