糖尿病大鼠白内障形成中的基因表达及生化变化

目的研究糖尿病大鼠白内障形成过程中晶状体上皮细胞(LEC)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的变化及生化改变。方法用链脲佐菌素(STZ)45mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠白内障动物模型后分为对照组、STZ组和治疗组(应用葛根素腹腔注射)。分别于实验第20、40、60d时取材,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术及生化方法观察糖尿病大鼠LECiNOSmRNA表达的变化及其对一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)生成的影响。结果糖尿病大鼠白内障形成过程中iNOSmRNA表达变化并伴有NO和NOS生成增加。对应用葛根素的糖尿病大鼠观察表明,实验后期iNOSmRNA的表达明显减弱,伴有NO和NOS活性明显下降。结论iNOS诱生并大量增加是过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在糖尿病大鼠LEC中产生的重要基础。ONOO-参与糖尿病大鼠晶状体氧化而发生白内障。葛根素通过对抗ONOO-对糖尿病大鼠LEC的氧化作用而间接调控iNOS基因的表达。

过氧亚硝基阴离子在大鼠糖尿病性白内障形成中的作用及葛根素的对抗作用

目的 探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)在糖尿病大鼠白内障形成中的作用 ,以及葛根素的对抗作用。方法 将 72只健康无热原Sprague Dawley(SD)雄性大鼠均分为对照组、链脲佐菌素(STZ)组及治疗组 ,使用STZ制作STZ组和治疗组大鼠糖尿病模型 ,治疗组大鼠腹腔注射葛根素。分别于实验 2 0、4 0及 6 0d检查大鼠的全身情况和晶状体形态 ;光镜下观察晶状体上皮细胞 (LEC)的形态 ;同时使用流式细胞仪检测LEC中凋亡细胞的数量和百分率 ,以及ONOO-标志物———硝基酪氨酸(NT)阳性细胞的荧光强度和数量 ;采用免疫印迹法检测NT蛋白质在晶状体中的表达。结果 实验2 0、4 0及 6 0d ,对照组大鼠晶状体均透明 ,治疗组大鼠晶状体仅轻度混浊 ,STZ组晶状体混浊明显且逐渐加重 ;光镜下LEC形态对照组无改变 ,治疗组仅轻度改变 ,STZ组明显改变。实验 2 0、4 0及 6 0d ,凋亡细胞数量和百分率治疗组和STZ组与对照组比较 ,治疗组与STZ组比较 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 ) ;NT阳性细胞的荧光强度和数量治疗组和STZ组与对照组比较 ,治疗组与STZ组比较 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 ) ;治疗组和STZ组LEC凋亡情况的变化趋势与NT阳性细胞的荧光强度和数量的改变情况基本相同。各组均可见NT蛋白质表达 ;实验 2 0、4 0及 6 0d ,NT蛋白?